АНТИОКСИДАНТ Российский патент 1996 года по МПК A61K31/505 G01N33/48 

Изобретение относится к области экспериментальной фармакологии и может быть использовано в качестве актиоксидантного средства в экспериментальных исследованиях.

Известно, что вещество, относящееся к производным пиримидина (ТБ-28), проявляет высокую активность при различных видах гипоксии. В механизме защитного и лечебного антигипоксического действия, а также в механизме стимулирующего влияния на физическую работоспособность выделяют следующие моменты: активация глюконеогенеза, увеличение энергетического потенциала, предотвращение нарушений окислительно-восстановительных процессов, усиление окислительного фосфорилирования, активация гипоталямогипофизарной системы без истощения. (Полякова М.А. Фармакология нового класса производных тиобортитуровой кислоты как веществ, повышающих резистентность и физическую работоспособность в условиях экстремальных воздействий, Дисс. д-ра биол.наук, М. 1981).

Технический результат расширение арсенала средств, обладающих антиокислительной активностью, достигается использованием в качестве такового производного пиримидина ТБ₂₈, имеющего структурную формулу:
i-C₃HSCH₃CH₂N/C₂H₅/•HCl и название: хлоргидрат 5-изопропил 1-фенил 2(В-диэтиламиноэтил) меркапто-3,4 дигидропиримидин-4-ол-6-она.

Для сравнения взят прототип по назначению (функциональный аналог), широко известный окислитель-витамин Е (токоферол). М.Д. Машковский, Лекарственные средства. М. 1984, ч.2, с.37-39.

Антиокислительная активность вещества исследовалась в условиях ин витро и ин виво.

Ин витро индукцию ПОЛ изучали в системе железо-аскорбат-зависимого ПОЛ в липопротеидах яичных желтков.

Выявлено, что антиокислительная активность (АОА) ТБ-28 в концентрации мол^-4 составляет 40,4% (АОА токоферола 98%). При уменьшении концентрации исследуемых веществ АОА снижается (26,7% у ТБ-28).

Ин виво ПОЛ инициировали введением экспериментальным животным (крысам массой 150-180 г) вещества, обладающего прооксидантной активностью 50% масляного раствора четыреххлористого углерода из расчета 0,4 мл на 100 г массы в течение 3-х дней однократно в эксперименте взяты 6 групп животных: I группа интактные; II группа вводился CCl₄; III группа за 2 ч до введения CCl₄ вводился ТБ-28 (10 кг/кг) внутрибрюшинно; IV группе животных ТБ-28 (50 мг/кг) вводился за 2 ч до введения CCl₄; V группе за 2 ч до введения CCl₄ вводился токоферол (10 мг/кг); VI группе животных ТБ-28 в дозе 50 мг/кг вводился одновременно с четыреххлористым углеродом.

На 4-ый день животных декапитировали, содержание продуктов ПОЛ (диеновые конъюгаты ДК), малоновый диальдегид (МДА), гидроперекиси липидов (ГП) определяли в крови и печени.

Данные экспериментальных исследований представлены на фиг.1,2,3 и в таблице.

На фиг. 1 изображена диаграмма влияния витамина Е и ТБ-28 (10 мг/кг) на содержание МДА при остром токсическом поражении печени CCl₄.

На фиг.2 влияние витамина Е и ТБ-28 (10 мг/кг) на содержание ДК при остром токсическом поражении печени CCl₄.

На фиг.3 влияние ТБ-28 350 (мг/кг) на содержание ГП в печени при остром токсическом поражении печени CCl₄.

Таким образом, при остром токсическом поражении печени CCl₄ наблюдается значительное повышение продуктов ПОЛ в крови и печени (ДК на 25-30% ГП в 2-4 раза; МДА в 2,5-2 раза соответственно) по сравнению с интактной группой животных. Предварительное введение производного пиримидина ТБ-28 в дозе 10 мг/кг и 50 мг/кг снижает содержание продуктов ПОЛ до уровня интактных животных. Менее активным оказался витамин Е, т.к. достоверно снижал содержание МДА в печени; уровень ДК не изменял (по сравнению с контрольной группой животных, которым вводился CCl₄).

ТБ-28, вводимый животным в дозе 10 мг/кг за 2 ч до введения CCl₄, повышал активность каталазы в крови и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в крови и печени. В то же время, при остром токсическом поражении печени четыреххлористым углеродом активность указанных ферментов снижается в 1,5 раза.

Учитывая данные исследований ин витро (наличие АОА) и ин виво (стабилизация ПОЛ), можно говорить о новом биохимическом действии ТБ-28, причем АОА ТБ-28 в опытах ин виво превосходит АОА токоферола.

Использование: экспериментальная фармакология, для фармакоррекции патологических процессов, сопряженных с активацией перекисного окисления липидов (ПОЛ). Цель изобретения - расширение арсенала средств, обладающих антиоксидантной активностью. Сущность изобретения: хлоргидрат 5-изопропил, 1-фенил, 2(В-диэтиламиноэтил) меркапто-3,4-дигидропирилендин-4-ол-6-она (ТБ - 28) тормозит ПОЛ в системе ин витро и ин виво. Антиокислительную активность (АОА) ТБ - 28 измеряют ин витро при индукции железо-аскорбат-зависимого ПОЛ в среде желточных липопротеидов (ЖЛП) и ин виво при индукции ПОЛ введением четыреххлористого углерода крысам. Для выявления ОАО ТБ - 28 в экспериментальных ин витро его концентрацию в инкубационной среде поддерживают в пределах 10^- 6 - 10^- 4 моль/л, а в экспериментах ин виво ТБ - 28 вводят крысам внутрибрюшинно в виде водного раствора от 10 до 50 мг/кг массы животного за 2 ч до введения CCI₄ в течение 3-х дней. Экспериментальные данные свидетельствуют о высокой антиокислительной активности (АОА) ТБ - 28, превосходящей АОА токоферола в опытах ин витро. 3 ил, 1 табл.

Применение хлоргидрат, 5-изопропил,1-фенил, 2-(В-диэтиламиноэтил)-меркапто-3,4-дигидропиримидин-4-ол-6-она (ТБ-28) в качестве вещества, обладающего антиоксидатными свойствами в эксперименте.