Устройство для флуоресцентного исследования биологических объектов в водной пробе Советский патент 1980 года по МПК C12K1/00 A61B10/00 

(54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ В ВОДНОЙ ПРОБЕ Изобретение относится кобласти биологических исследований, а именно к устройствам счета и анализа биологических объектов, 1 может быть использоваио при проверке качества иммунных флуоресцирующих сывороток, а также в гидробиологических исследованиях. Известно устройство для Флуоресце ного исследования биологических объектов в водной пробе, содержащей источник возбуждающего излучения, приемник флуоресцентного излучения, оптическую систему, включающую свето фильтры и микрообъектив, и проточную кювету с каналами для подачи исследуемых объектов и для подачи и стока cNUBHOft жидкости 1. Недостатком известного устройства является то, что среда, через которую проходят возбуждающее и флуоресцентное излучения, является неод.нородной) так как сушествуют области с разными коэффициентами преломления зрачок объектива-капля иммерсионной жидкости, капля иммерсионной жидкости-стекло проточной кюветы, стекло проточной кюветк-смывная жидкость, капля иммерсионной жидкости - воздух. За счет этих неоднородностей происходит рассеяние возбужлаюедего и флуоресцентного излучений, интенсивность их падает, и, соответственно, уменьшается и чувствительность устройства. Рассеянное возбуждающее излучение также частично попадает на фотоприемник из-за неидеальности оптических фильтров, дополнительно понижая чувствительность устройства. Целью изобретения является повышение чувствительности. Для этого кювета выполнена открытой для погружения в нее микрообъектива и снабжена установленным с возмэжностью перемещения вдоль оптической оси :герметичным тубусом с отверстием, в котором размещен микрробъектив. На чертеже схематично изображено устройство для флуоресцентного исследования биологических объектов в водной пробе. Устройство содержит источник 1 возбуждающего излучения, приемник 2 флуоресцентного излучения, фокусирующую линзу 3, светофильтры 4 и 5, дихроичное зеркало 6, микрообъектив 7 и проточную кювету, которая содержит основание 8 из нёкорродирующе- , го материала, в котором вЕлполнена по3луцилиндрическая канавка 9, открыта для погружения в нее микрообъектива В основании 8 проточной кювет выпол нены каналы 10 для подачи исследуеvsax объектов и 11, 12 для подачи и стока скЕдвной жидкости соответствен но. Проточная кювета снабжена установленным на основании в тубусом 13 соединенньвч с последним при помощи резьбы, и имеющим отверстие, в кото ром устанЪвлен через герметизирую прокладку 14 из вакуумной резины по жаемый в полуцилиндрическую каиавку микрообъектив 7. Микрообъектив 7 крепится в отверстии тубуса 13 посредством кольцевых пружин 15 и винтов 16, которые служат так же и для выдерживания соосности, мйкр объектива 7 и канала 10, ty6yc 13 предназначен для погружения микрообъектива 7 в с{«:1вную жидкость и настройкифокуса кшкрообъектива в смывную жидкость. Контргайка 17 служит ДЛЯ фиксации тубуса 13. Приемник 2 флуоресцентного излучения соединен с блоком 18 регистрации. Взвоаеиные в водной пробе биологические объекты по каналу ГО через микроотверстие 19 поштучно поступают в полуцилиндрическую канавку 9 Sа счет раарежения, которое создается смывной жидкостью, проходящей через канал 11, канавку 9 и канал 12. Воэбуждахяцёе излучение от источника 1 через линзу 3, светофильтр 4 Попадает на дихроичное зеркало 6 и отраженное им собирается микрообъективом 7, в фокусе которого расположено микроотверстие 19. Настройка фокуса микрообъектива ,7 на микроотверстие 19 осуществляетс пер ещением в заданных пределах тубуса 13 вдоль боковой поверхности основания 8 проточной кюветы. Выдерживание соосности микрообъектива 7 и микроотверстия 19 в заданнУх пределах осуществляется прижимны од винтами 16. Фиксгщия настройки фокуса микрообъектива 7 на микроотверстие 19 осуществляется контргайкой 17. .Возбуждакадее излучение поглощается биологическим объектом, проходящим через микроотверстие 19. Флуоресцентное излучение этого объек 0, та собирается микрообъективом 7, пропускается дихроичным зеркалом 6 и через фильтр 5 попадает на приемник 2. Электрический импульс с приемника 2 регистрируется в блоке 18. Устройство позволяет исключить рассеяние возбуждающего и флуоресцентного излучений на неоднородностях (зрачок объектива-иммерсионная жидкость, иммерсионная жидкость стекло проточной кюветы, стекло проточной кюветы-смлвная жидкость, иммерсионная жидкость - воздух), а также исключить поглощение излучений, в.следствие чего возрастает интенсивность возбуждающего и флуоресцентного излучений биологического объекта, что приводит к повышению чувствительности устройства. В устройстве смывная жидкость несет функцию иммерсионной жидкости, благодаря чему разрешгиощая способность устройства не снижается, кроме того, повьйиается надежность устройства вследствие исключения из конструкции проточной кюветы покровного стекла. Формула изобр етения Устройство для флуоресцентного исследования биологических объектов в водной пробе, содержащее источник возбуждающего излучения, приемник флуоресцентного излучения, оптическута систему, включающую светофильтгры и микрообъектив, и проточную кювету с каналами для nojqa4H исследуемых объектов и для подачи и стока смывной жидкости, отличающееся тем, что, с целью повышения чувствительности, кювета выполнена открытой для погружения в нее микрообъектива и снабжена установленным с возможностью перемещения вдоль оптической оси герметичным тубусом с отверстием, в котором размещен микрообъектив. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Automation in der guantttativen LyЛо2о0е сДегл 3mput3z.ylophotonaeter, von-Dr.WoetgQoig Qohde, SonderdrucK aus QBK-M tleitunge, cjien&t, HCtt -2, Sep lember 4972.bancl6 , seMen 255-2.76.