Способ определения токсичности сыворотки крови Советский патент 1980 года по МПК A61B10/00 G01N33/16 

Изо етение относится к области медицины,а именно определению токсичности сыворотки крови,и может быть использовано для обнаружения и количественного определения токсичных веществ,образующих при поражении печени,а также оценки эффективности удаления из организма токсических веществ в условиях клиники.

Известен способ определения токсичности сыворотки крови путем культивирования ее на биологическом т ест-материале с последующр измерением степени воздействия исследуемой сыворотки на тест-культуру 1.

Однако известный способ не позволяет определить токсичность сыворотки крови при поражении печени.

Целью изобретения является определение токсичности сыворотки крови при поражении печени,

Эта цель достигается тем, что сыворотку культивируют с лейкоцитарной пленкой в питательной среде, содержащей плазму крови человека и кролика, взятых в соотношении 2,5:1 и по величине зоны миграции зрелых

лейкоцитов определяют токсичность сзыворотки.

СпоссГб осуществляют следующим 5 образом.

Культивируют кусочки лейкоцитарной пленки на питательной среде, состоящей из смеси плазьсл крови человека и кролика с добавлением гепа10рина, В опытных культурах к питательной среде добавляют равное количество исследуемой сыворотки, в контрольных - раствор Рингера, Культивирование производят по методу вися15чей капли в камерах Максимова при в течение 18 ч Показателем биологической активности исследуе- мого латериала служит, величина зоны миграции лейкоцитов вокруг культиви20руемой пленки. При помощи рисовального аппарата контуры кусочков и зон миграции переносят иа бумагу и планиметрируют. Миграцию опытных культур вычисляют по отношению к конт25рольной, принятой за 100, Если исследуемая сыворотка обладает, угнетающим действием на миграцию, получают величину с отрицательным знаком, если стимулирует - с положительным.

Пр-имер l.y собаки с экспериментальной печеночной недостаточностью, которую получили .введением в общий желчный прЮток четыреххлористого углерода из расчета 0,1 ип на 1 кг веса с последующей его перевязкой , определяют токсичность сыворотки крови путем добавления ее. в количестве 0,1 мл к гемокультуре, представляющей собой кусочки лейкоцётарной пленки здорового человека, культивируемые по методу висячей капли на гепариниэированной плазме человека и кролика. После под защивания гемокультуры в течение 18 ч в термостате при образуются зоны миг- « рации лейкоцитов, которые проектируют на бумагу при помощи рийбвального аппарата и планиметрйруют, Конт-. ролем служат культуры той же пленки, к питательной среде которых прибавляют вместо испытуемой сыворотки раствор Рингера. Рост опытных культур вычисляют в процентах по отношению, к , который принимают за 100 и обозначают как плюс или тнус от 100 (контроля) , На высоте функциональной недостаточности печени в сыворотке крови обнаруживают вещества, резко снижающие миграцию лейкоцитов в гемокультуре. На илсоте поражения печени токсические свойства сыворотки равняются в среднем 43. Очистку крови у собаки производят путем пропускания, ее через колонки, заполненные активированным углем марки СКТ-ба. В процессе очистки крови токсичность сыворотки резко уменьшилась, а через 60 мин сорбции сыворотка была нетоксична (+ 6) , Уменыаение токсичности сыворотки крови коррелировало с дииагшкой клинической картины. Собаки после гемосррбции были активными, хорошо ели, адекватно реагировали на -внешние раздражи- тели.

Пример 2, Алеша С., 2,5мес,, клинический диагйоз г вирусный гапатит,В, тяжелая ;форма, гейатодистрофия, печеночная кома,

В период глубокой печеночной комл (9 день болезни), 7-Й день желтухи токсичность сыворотки крови, которую определяют аналогично приме 1РУ Д из 0,1 мл сыворотки, равнялась -42, после геомосорбции, которую проводят с помощью активированного угля марки , токсичность сыворотки полнбстью исчезла +13, в то J время как уровень билирубина, понизился только в 1,5 раза с 16,64 до 10,6 мг,%, а другие функциональные пробы существенно не изменились, Уменьшение токсичности сыворотки

Q сопровождалось просветлением сознания, нормализацией сердечно-сосудистой и дыхательной деятельности. Однако в дальнейшем состояние вновь ухудшилось и на 11 день болезни, 9 день желтушного периода наступил

5 летальный исход, Токсичность сыворотки крови непосредственно перед смертью вновь увеличилось до - 72,

Предложенный способ позволяет обнаружить и количественно измерить

0 в сыворотке крови токсичные вещества, образующиеся при поргикении печени , Способ с большой, степенью точности, по сравнению с известным,позволяет оценить результат удаления из крови токсичных веществ, например, методом гомосорбции,

Формула изобретения

Способ определения токсичности сыворотки крови путем культивирования ее на биологическом тест-материале с последующим измерением .

с степени воздействия исследуемой сыворотки на тест-культуру, о. т личающийся тем, что, с . целью определения токсичности сыворотки крови при поражении печени, сыворотку культивируют с лейкоци- .

0 тарной пленкой в питательной среде, содержащей плазму крови человека и.кролика, взятых в соотношении 2,5:1 и по величине зоны миграции зрелых лейкоцитов определяют токсичность сыворотки,

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент. США № 3944381, кл. 23-230 B.J 1976.