Способ лечения аутоиммунных гемоцитопений Советский патент 1980 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицине , а именно к иммуногематологии. Известен способ лечения аутоиммунных гемоцитопёний путем введения в организм больного иммунодепрессантов . Однако известный способ не обеспечивает индивидуального подбора пре парата. Цель изобретения - индивидуальный подбор препарата. Цель достигается тем, что предварительно исследуют чувствительность взаимодействия Т- и В-лимфоцитов крови больного с антигеном или комплексом антиген-антитело к иммунодепрессанту и пбследний выбирают по степени наибольшего угнетения феномена розеткооб азования. , Пример. Для проведения депрессантной терапии препарат циклофосфан используют в дозах 1-3,5 мг/кг/сут, что в средне, тавляет 200 мг. Вес больного 60 кг. Следовательно, по известным формулам пересчета объем циркулирующей крови у больного составляет около 4800 мл количество лейкоцитов периферическо крови - ча 1 л, из них 20% лимфоциты, абсолютное количество лимфоцитов - на 1 л. Лимфовзвесь для исследований у данного больного должна быть приготовлена так, чтобы клеточное число также со-, ответствовало на 1 л. Рассчитывают, какое количество пре парата (циклофосфана)при. введении его в организм приходится на на 1 л лимфоцитов (те., на 1 л циркулирующей крови): если на 4,8 л крови вводится 200 мг ЦФ, то на 1,0 л 41,7 мг. Далее количество иммунодепрессанта рассчитывают на объем лимфовзвеси, используемый в реакции розеткообразования: если на 1,0 л (1000 мл) вводится 41,7 мг ЦФ, то на 0,1 мл .0,0417 мг. По такому же принципу рассчитывают необходимые количества других препаратов, которые используются в качестве иммунодепрессантов при индивидуальном подборе данному больному .(преднизолон, 6-меркаптопурин, имурант (азатиоприн), метотрексат, винбластин, винкристин, цитозинарабинозида и др.) Затем вьзделяют лимфоциты перифе 1рической крови в градиенте плотност фикол-урографина (или фикол-верогра на) проводят обычным, широко исполь зуемым методом по Sand I 1 ands J.P. Определяют содержания Т-лимфоцитов и степени влияния нммунодепресс тов на образование Т-розеток. Для исследования используют метод прямого розеткообраэования, После определения содержания Т-лимф цитов проводят подбор иммунодепресс тногб средства. Для этого к 0,1 мл лимфовзвеси добавляют рассчитанную дозу препарата, инкубируют при ком натной температуре в течение 5 мин. Затем лимфовзвесь с иммунодепрессантом соединяют с ОД мл 0,5%-ной взвесью эритроцитов барана. Дальнейший ход исследования обычный. Подсчет, образовавшихся розеток прои водят в камере Горяева. Определяют, содержание В-лимфоцитов и степени влияния иммунодеп.рессантов на образование В-розеток. Для исследования используют метод непрямого (иммунного) розеткооб разования. Рассчитанную дозу иммуно депрессанта добавляют к 0,1 мллимфовзвеси, и после 5-минутной экспози ции при комнатной т емпературе вносят 0,1 мл гемолитической системы. Даль нейший ход исследования обычный. Ко личество образовавшихся В-розеток сосчитывают в камере Горяева. Приме р. Больная К., 59 лет. Поступила в гематологическое отделение больницы с жалобой на частые носовые кровотечения, появление гемо рагии на коже туловища и конечностей, прогрессирующую слабость, повышенную утомляемость. Впервые появление геморрагии отметила весной 1974 г., в это же время при анализе периферической крови обнаружена выраженная тромбоцитопения (до тромбоцитов на 1 л крови) . По поводу своего заболевания неоднократно проходила курсы лечения в раз личных стационарах.После тщательного клинико-гематологического и иммунологического исследования установлен диагноз - аутоиммуная тромбоцитопен ческая пурпура. .После этого больной проведен курс лечения препаратами кортикостероидных гормонов (преднизол в дозе 100 мг/сут в течение 7 дней, затем постепенное снижение суточТ-розеткообразуюПрепарат, щие клетки, % доза

В-розеткоо.бразующие клетки,% ной дозы препарата до полной отмены в течение 30 дней) в сочетании с цитостатическим препаратом из группы антиметаболитов - 6-меркаптопурином (по 150 мг в день в течение 26 дней). Уже к концу второй недели преднизолонотерапии у больной отмечалось повышение содержания сахара в крови до 1,45 мг %, которое прогрессировало и, несмотря на проводимую отмену препарата, к 21 дню достигло 352 мг%. В это же время отмечалосьповышение уровня сахара в моче до 3,2%. Клинически явления стероидного-диабета сопровождались резкой слабостью, жаждой, повышением дневного и но ного диуреза. Кроме того, обнаружено повышение кровяного давления до 200/100 мм рт.ст. Больной была назначена инсулинотерапия, на фоне которой отмеченные осложнения терапии кортикостероидами исчезли. Содержание тромбоцитов крови к моменту окончания курса терапии - на1л. На поддерживающее лечение больной назначен 6-меркаптопурин по 100.мг 2 раза в неделю в течение месяца, затем иммунодепрессантная терапия бьша отменена. При контрольной амбулаторной проверке количество тромбоцитов крови - на 1 л. Полная клинико-гематологическая ремиссия сохранялась в течение 10 мес. Затем вновь началось постепенное снижение тромбоцитов периферической крови, клинические проявления геморрагического диатеза. Однако Црльная наблюдалась амбулаторно, отказываясь от госпитализации. К январю 1977 г. состояние ее значитель но ухудшилось - появились головные боли, резко усилились проявления геморрагического диатеза, прогрессирующая общая слабость. Тромбоциты в периферической крови в это время - единичные в препаратах. Больная бьша госпитсшизирована в стационар. Учитывая наличие в анамнезе осложйений при лечении больной препаратами кортикостероидных гормонов и в связи с этим невозможность повторного применения терапии глюкокортикоиднЕлми гормонами, был проведен индивидуальный подбор иммунодепрессанта по описанному способу. Результаты исследования приведены в таблице.

Исходное количество

Циклофосфан, 2 мг/кг веса

63 9

Анализ полученных результатов позывает, что преднизолон оказывает нменее выраженный иммунодепрессантны эффект у этой больной. Из всех примененных в данном случае для индивидуального подбора средств с иммунодепрессантным эффектом наиболее выраженное действие ин витро отмечено у циклофосфана. Этот препарат ибыл выбран для проведения курса иммунодпрессантной терапии у данной больной , Лечение циклофосфаном проводилось по схеме Lanos К.К, Реплег J.A в течение 45 дней. Курсовая доза препарата составила 6700 мг. В процессе терапии отмечалось постепенное нарастание содержания тромбоцитов (до на 1 л к моменту выписки), исчезновение проявлений геморрагического диатеза. Осложнений в течение и после курса терапии не отмечено. Достигнута1н полная клинико-гематологическая ремиссия поддерживается у этой больной в течение 15 месяцев.

Выл также проведен индивидуальный подбор препарата для иммунодепрессантной терапии описанным методом и последующее лечение подобранным цитостатическим средством у 14 больных аутоиммунными гемоцито- пениями (10 больных - аутоиммунной тромбоцитопенйческой пурпурой и 4 аутоиммунной гемолитической анемией) . Во всех случаях получен вы- сокий терапевтический эффект, не отмечалось проявлений токсичного

Продолжение таблицы

действия химиотерапевтических средств на организм больного, получена длительная клинико-гематологическая ремиссия.

Предлагаемый способ позволяет под бирать индивидуально препарат для иммунодепрессантной терапии с учетом его влияния на иммунокомпетент- . ную систему больного. Таким образом повышается специфическое действие иммунодепрессанта, с чем связано повышение клинического эффекта проводимой терапии и снижение побочного влияния цитостатических средств, применяемых в качестве иммуносупрессоров.

Формула изобретения

Способ лечения аутоиммунных гемоцитопений путем введения в организм больного иммунодепрессантов, отличающийся тем, что, с целью индивидуального подбора препарата, предварительно исследуют чув ствительность взаимодействия Т- и В-лимфоцитов крови больного с антигеном или комплексом антиген-антитело к иммунодепрессанту и последний выбиргиот по степени наибольшего угнетения феномена розеткообразования.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Swans on Н.А. et al. Immunosupressive therapy. New.EngI . J . Med . 1967, 277. 163-170.