Способ получения иммуноглобулинового препарата Советский патент 1982 года по МПК A61K35/14 

охлаждением до -получения прозрачного цеитрифугата. Осадок удаляют. Объем деитрифугата составляет 8 л, содержание белка 0,4%. К 8 л экстракта для концентрнровання иммуноглобулинов добавляют 50%-1Ь1Й ))аствор полиэтиленглнколя (мол. нес 6000) до конечной концентрации 5% нри постоянном перемешивании. Эту смесь оставляют на ночь (18 ч) прн 4-6°С. После выстаивания осадок иммуиоглобулиноз отделяют нутем декаитацни и центрифугирования 15-30 мни при 3000 об/мии на центрифуге с охлаждением. Осадок нромывают 300-- -00 мл дистиллированной воды, подкисленной ацетат1 ь;м буфером до рН о-гО,2, при , растворяют в охлаждеииом, 0,9%-ном растворе хлорида ):атрня до содержания белка 5% (200- 250 ,,|), рИ 6,3. После растворепня осадка црспарат цеитрифугнруют 15 гмин нрн 3000 об/мин на центрифуге с охлаждением для удаления нерастворимых примесей. С центрнфугатом проводят реакцию на удпление полиэтиленгликоля с реактивом Неслера (на 3 мл реактива Неслера осторож1 о наслаивают 0,1 мл центрифугата), при этом не должен образовываться слой белого осадка. После цент)ифугироваиия в иренарате устанавливают рП 7,0-7,5 О, NaOH.

Для удаления нестабильных прнмесей к раствору иммуноглобулинов добавляют фосфорнокислый кальций Саз(Р04)2 из расчета 0,4 г па 100 мл. После переметивапня и выстаивания в течение часа раствор цеитрифугируют 30 мин при 3000 об/мин на центрифуге с охлаждением, затем добавляют глюкозу до конечной концентрации 2% в качестве стабилизатора, После стерилизующей фильтрации препарат разливают по ампулам и лиофнлизирзют.

Предлагаемый способ позволяет получить комплексный нммуноглобулиновый препарат, с активностью 97,3%, содержащий иммуноглобз лины трех классов в следующих соотнощениях: SgG 55-60%, Sg А 15-20% и Sg М 25-30%. Препарат обладает высокой еерологической активцоетью в отнощении энтеробактерий, менингококка, Pseredomonas aeruginosa н характеризуется высокой степенью очистки от примесей иммуиологнчески иеактивных белков.

Количество примесей не превышает 3% от общего белка, что регламентировано для препаратов иммуиоглобулииа человека.

Кроме того, способ пригоден для про1 зводства и экономически эффектнвен, так как помимо улучщення условнй труда он не нуждается в сложном техническом оснащении производства. Применение способа предусматривает более рациональное нсцользование отходов нроизводства препаратов крови из плацентарной сыворотки.

Формула изобретения

Способ получения иммуноглобулинового препарата пугем обработки хлоридом натрия экстракта из осадка Б (HI фракции) плазмы крови, фракциоцироваиия экстракта, очистки центрифугата и выделения иммуноглобулииов, о т л ич а ю нл и и с я тем, что, с целью повышения активности целевого продукта и упрощения процесса, к цеитрифугату добавляют хлороформ, затем декстраисульфат ц полиэтилеиглнколь.

Источники ниформацни, принятые во внимание при эксиертизе

1. Steinbuch-Prep chemistry, 1973, 3 (4), 363-373.