Способ получения 11 -гидроксистероидов Советский патент 1981 года по МПК C07J5/00 A61K31/57 

где X, W, R-t и R/2 имеют указанные значения, fiV - водород, гидроксил или алканоилоксигруппа с 1-6 атомами углёрОда, ферментируют грибковой культурой семейства -Си rvultiri а и полученное соединение в случае необходимости дегидрируют в положении 1,2с последующим выделением целевых продуктов известными методами.

Пригодными для гидроксилирования грибками семейства Curvularia являют9Я Curvularia dunata NRRL 2380, NRRL 5434, АТСС 12017 или 1FO.(6286), Curvularia falcuta OM-102 H, Curvularia genticulata IFO (6284) или Curvularia maculaus IFO (6292),

При у словиях, обычно применяемых для этих микроорганизмов, культуры выращивают в пригодной питательной среде при аэрировании. Затем к культурам добавляют субстрат, растворенны в пригодном растворителе, преимущественно в эмульгированной форме и ферментируют, пока не достигается максимальное превращение субстрата.

Пригодными растворителями для субстрата являются, например, метанол, этанол, гликольмонометиловый. эфир, ди метилформамид или диметилсульфоксид.. Для эмульгирования субстрата.в микронизированную форМу его или раствор в смешиваквдемся d водой растворителе (метанол, этанол, ацетон, гликольмонометиловый эфир, диметилформамид или диметилсульфоксид) при сильном турбулентном перемешивании вдувают в преимущественно декальцинированную воду, содержащую обычные способствующие эмульгированию средства. Такими средствами являются неионогенные эмульгаторы, например аддукты этиленоксида или эфиры жирных кислот полигликолей

Дегидрирование насыщенных в первой позиции д -стерои ов общей формулы I осуществляют как с помощью микробиологических методов, так и с помощью химических методов.

Так Л -стероиды При обычных уелоВИЯХ могут быть дегидрированы в первой позиции культурами бактерий семейства Bacillus (например. Bacillus Lentus или Baccilus sphaertcus) или Arthrobacter (например, Arthrobacte г S implex),

д -дегидрирование проводят также нагреванием л -стероидов в инертных растворителях с обычными для этой реакции окислителями, например диокси- дом селена или 2,3-дихлор-5,6-дицианобензохиноном.

Соединения общей формулы I при локальном применении проявляют высо

кую противовоспалительную активность в сочетании с низкимс системным побочным действием.

lO р и м е р 1. а) 21,63г ,21-диацетокси-17аи-гидрокси-5-прегнен-20-она растворяют в 150 мл безводного метиленхлорида и 100 мл безводного формапьдегиддиметилацеталя. Затем раствор охлаждают водой и в него вносят смесь 21,6 г полупятиокиси фосфора и 43 г кизельгура и переме-. шивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь фильтруют и остаток промывают метиленхлоридом, к фильтрату добавляют триэтиламин, пока рН не достигнет 9, и сгущают в вакууме. Остаток перекристаллизонывают из смеси .метанол-метиленхлорид и получают 22,68 г 30,21-диацетокси-17с1-метоксиметокси-5-прегнен-20-она с температурой плавления 182-184 С.

в) В двухлитровой колбе Эрленмейёра с 1 л стерильного питательного раствора, содержащего 0,3% дрожжевого экстракта, 0,3% Cornsteep Liqcur и 0,2% крахмального сахара, установленного на рН 7,0, засевают сухую культуру F1 avobajCter i um dehydrogenans ATCC 13930 и при встряхивают в течение 2 дней (175 об./мин)

В поллитровой колбе Эрленмейера с 85 мл равной питательной средьг прививают 10 мл выраженной культуры .F1avobacteгium dehydrogehans и при встряхивают в течение 7 ч (175 об./мин). Затем к культуре добавляют 5 мл стерильного раствора 0,5 г 3(1,21-диацетокси-17 1-метоксиметокси-5-прегнен-20-Она в диметилформамиде и встряхивают при в

течение 65 ч (175 об./мин). После ферментации культуру дважды экстрагируют 100 мл этиленхлорида, экстракт сгущают в вакууме, остаток очищают с помощью хроматографии через оксид алюминия и получают 402 мг 21-гидрокси-17е1--метоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 152153 С.

с) В двухлитровой колбе Эрленмейера с 1 л стерильного питательного раствора, содержащего 2% глюкозы и 2% Cornsteep Liqour, установленного на рН 6,5, прививают с промывкой сухой культуры Curvularia Lunata NRRL 2380 и при 30°G встряхивают в течение 60 ч (175 об./мин) .

В поллитровой колбе Эрленмейера с 90 мл стерильной питательной среды, содержащей 1,0% Co.rnsteep Liqour и 1,25% соевой пудры и установленной на рН 6,2, прививают 10 мл выращенной культуры Curvularia Lunata и при встряхивают в течение 7 ч (175 об./мин). Затем к культуре добавляют стер ильный раствор 30 мг 21-гидрокси-17с1-метоксйметокси-4-прегнен-3,20-диона в диметилформамиде и ферментируют в течение 65 ч.

Перерабатывают культуру ферментации, как описано в примере 1в, и получают 27 мг 11и,21-дигидрокси-17 1-метоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 180-182 С. П p и м e p 2, a) 50 г Зр, 21-диацетокси-17(-гидрокси-5-прегнен-20-она смешивают с 50 мг безводной п-толуолсульфокислоты и 350 МП безводного метиленхлорида, охлаждают до и после добавления 10 г мети винилового эфира перемешивают при в течение 4 ч. Затем добавляют триэтиламин, пока рН не достигнет. 9, и концентрируют в вакууме. Получают 58 г 3|5,21-диацетокси-17о -(1-метоксиэтокси)-5-прегнен-20-она в виде д астёреомерной смеси с температурой плавления 80-11в С (перекристаллизованная из метанола проба плавится при 132-134С) . в) При условиях примера 1 в раствор 600 мг ЗР,21-диацетокси-17Л- ( -метоксиэтркси) -5-прегнен-20-он в виде диастереомерной смеси в 5 мл диметилформамида обрабатывают культурой F)avobacteг 1 am dehydrogenans АТСС 13930 и получают 394 мг 21-гид рокси-17с1- (l -метоксиэтокси) -4-прег нен-3,20-диона в виде диастереомерной смеси с температурой -плавления 166-178°С. с) Раствор 100 мг диастереомерно смеси 21-гидроокисиг-17е(,- (1-метоксиэтокси)-4-прегнен-3,20-диона в 2 мл диметилформамида при условиях примера 1с ферментируют культурой Curvula ria Uunata NRRL 2380 и получают 105 11(4,21-дигидрркси-17А-.(1 -метоксизто си)-4-прегнен-3,20-диона в виде масл ной диастереомерной смеси. . Пример З.а)10г 21-ацеток си-17е{,-гидрокси-4-прегнен-3,20-диона смешивают с 13 мг безводной п-толуолсульфокислоты и 130 мл безводного метиленхлорида, охлалшают до и после добавления 2,3 г мегилвинилового эфира перемешивают при 0°С примерно 7 ч. Реакционную смесь обрабатывают, как описано в примере 2а, и получают 11,6 г 21-ацетокси-17о1-(1 -метоксиэтокси)-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 135-150с. в) Раствор 0,1 г диастереомерной смеси 21-ацетокси-17е -(1-метокси этокси)-4-прегнен-3,20-диона в 2 мл диметилформамиде при описанных в при мере 1с условиях ферментируют культурой Curvularia bunata NRRL 2380, и получают 11,21-дигидрокси-17о1-(, -метоксиэтокси)-4-прегнен-3,20-дион. Пример 4. а) 10 г 21-ацеток си-17о1-гидрокси-4-прегнен-3,20-диона при условиях примера За обрабатывают 2,5 г этилвинилового эфира и получают 12,5 г 21-ацетокси-17Л.-Ц-этоксиэтокси)-4-прегнен-З,20-диона в виде масляной диастереомерной смеси. в) Раствор 0,1 г смеси 21-ацетокси-17с1- ( -этоксиэтокси) -4-прегнен-3,20-диона в 2 мл диметилформамида гидроксилируют Curvularia Lunata NRR 2380 при условиях примера 1с и получают (1 -этоксиэтокси) -11Р,21-дигидрокси-4-прегнен-З,20-дион. Пример 5. а) 10 г 21-ацетокси-17с1-гидрокси-4-прегнен-3,20-диона обрабатывают 4 г изобутилвинилового.эфира при условиях примера За и получают 13,5 г 21-ацетокси-17о,-(1 -изобутилоксиэтокси) -4-прег-: нен-3,20-диона в виде масляной дИастереомерной смеси. , в) Раствор 0,1 г смеси 21-ацетокси-17о1- ( -изобутилоксиэтокси -4-прегнен-3,20-диона в 2 мл диметилформамида гидроксилируют Curvularia Uunata NRRL 2380 при условиях примера 1с и получают 11р,21-дигидрокси-17cL- (1-изобутилоксиэтокси)-4-прегнен-3,20-дион. П м е р. 6. а; 1,95.г 21-ацетокси-17А-гидрокси-4-прегнен-3,20-диона смешивают с 5 мг безводной п-толуолсульфокислоты, 25 мл безводного метиленхлорида и 3,5 мл дигидропропана и перемешивают при комнатной температуре в течение 13 ч. Реакционную смесь перерабатывают, как описано в примере За, и получают 2 г 21-ацетокси-17с1- (2 -тетрагидропиранилокси)-4-прегнен-3,20-диона в виде диастереомерной смеси с температурой плавления 185-200 с. в) Раствор 0,1 г смеси 21-ацетокси-17 - (2 -тетрагидропиранилокси -4-прегнен-3,20-диона в 2 мп диметилформамида гидроксилируют Curvularia Lunata NRRL 2380 при условиях примера 1с и получают 11/Ь,21-дигидрокси-17cU (2 -тетрагидропиранилокси -4-прегнен-3,20-дион. Пример 7. а) 50 г 21-ацетокси-17с1-гидрокси-6о1-метил-4-прегнен-3,20-диона при условиях примера За обрабатывают 13,9 г метилвинилового эфира и получают 59 г 21-ацетокси-17cL- (l -метоксиэтокси) -бс4-метил-4-прегнен-3,20-диона в виде аморфной массы.; в) Раствор 200 мг 21-ацетокси-1711- (1 -метоксиэтокси) -бА-метил-4-прег- . нен-3,20-ДИОна в 0,4 мл диметилформаида гидроксилируют Curvularia Lunata NRRL 2380 при описанных в примере условиях и получают 11Р, 21-дигидокси-17б1-(1 -метоксиэтокси)-6«1-метил4-прегнен-3,20-дион. П р и м е р В. а) 2 г 21-ацетоки-17Я.-гидрокси-16Р-метил-4-прегнен3,20-диона смешивают с 5 мг безводой п-толуолсульфокислоты и 25 мл безодного метиленхлорида и охлаждают до С. Затем при перемешивании к смеси обавляют 0,5 гметилвинилового эфира, еремешивают при 0°С в течение 5 ч еще в течение 12 ч при комнатной емпературе. Перерабатывают реакционую смесь, как описано в примере За, получают 2,1 г 21-ацет6кси-17 1( -метоксиэтокси)-16р|-метил-4-прегнен-3,20-дИона в виде масляной диастереомерной смеси, в) Раствор 50 мг смеси 21-ацетокси-17 1-(1 -метоксиэтокси) -1бр-метил-4-прегнен-3 20-(Иона s 1 мл диметил формамида гидроксилируют Curvularia Lunata NRRL 2380 при описанных в при мере 1с усшовиях и получают 11,21-дигидрокси-17о,- ( -метоксиэтокси -1б(Ь-метил-4-прегнен-3,20-дион. Пример 9, а 50 г 17о1-гидро си-4-прегнен-3,20-диона при условиях примера За обрабатывают 15 г метилвинилового, эфира и получают 51,2 г 1 ld- (1 -метоксиэтокси) 4-прегнен-3,20 -диона с температурой плавления 115152 с. в) Раствор 0,1 г (1-метоксиэтокси)-4-прегнен-3,20-диона в 1 мл диметилформамиде ферментируют культурой CurvulагI а Lunata NRRL 2380 при описанных в примере 1с условиях и получают 11|5-гидрокси-17 А- ( -метоксиэтокси)-4-прегнен-З, 20-дион С температурой плавления 85-10З С. Пример 10. а) 5, г 3|5,21-диацетокси-17(1.-гидрокси-5-прегнен-2,-она при описанных S примере 1а условиях в 150 мл метиленхлорида обрабатывают 380 г ацеталя формальдегид-бис гликольмоцометилового эфира, 50 г полупятиокиси фосфора и 100 г кизельгура и получают 45,8 г ЗВ,21-диацетокси-17о - (2 -метоксиэтоксиметокси) -5-прегнен-20-она с температурой плавления 160-161С. в) При условиях примера 1в 0,5г 3}5, 21-диацетокси-17(Ь-(2 -метоксиэток си-метокси)-5-прегнен-20-она обрабатывают культурой F1avobdcterium dehydrogenans АТСС 13930 и получа ЮТ 390 мг 21-гидрокси-17е1-(2-метоксиэтоксиметокси) -4-прегнен-З,20-диона в виде стекловидной массы. с) При условиях примера 1с 30 мг 21-гйдрокси-17 Л-(2-метоксиэтокси-мётокси) -4-прегнен-З,20-диона обрабатывают культурой CufvularJa tunata NRRL 2380 и получат 24 мг lip, 21-дигидрокси-17е1- (2 -метоксиэтокси-метокси)-4-прегнен-З,20-диона с тем пературой плавления 143-147 С. Пример 11. В двухлитровой колбе Эрленмейера с 500 мл 1 итатель .ного раствора, содержащего 0,1% дрож жевого экстракта, 0,5 Cornsteep Liquor и 0,1% крахмального сахара и ус тановленного на рН 7,0, прививают с промывкой сухой культуры Arthrobacter simpJex АТСС 6946 и при в течение 48 ч встряхивают (190 об./ми В 0,5 литровой колбе Эрленмейера с 90 мл питательной среды прививают с 10 мл выращенной культуры Arthrobacter simplex и при в течение б ч Встряхивают (165 об./мин). Затем к культуре добавляют 1 мл стерильно го раствора 50 мг 11 (Ь,21-дигидрокси -17аг-метоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона в диметилформамиде и Ферментируют в течение 42 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 44,5 мг 11Р,21-дигидрокси-17о1-метоксиметокси-1,4-прегнадиен-З,20-диона с температурой плавления 229231 С. Пример 12. В двухлитровой колбе Эрленмейера с 500 мл питательного раствора, содержащего 1% дрожжевого экстракта (Difco); 0,45% динатри и гидрофо сфат а/ 0,34% к алии гидрофосфата и 0,2% Tween 80 и установленного на р 6,7f прививают с промывкой сухой культуры Nocardiа globerula АТСС 9356 и при в течение 72 ч встряхивают (190 об./мин). В. двухлитровой колбе Эрленмейера с 950 мл питательного раствора, содержащего 2,0% Cornsteep Liquor/ 0,3 % ди аммонийгидрофосфат а и 0,25% Tweeh 80 и установленного на рН 6,5, прививают с 50 МП выраженной культуры Nocardia gtoberula и при 30°С в течение 24 ч встряхивают (190 об./мин) Затем в культуру добавляют 5 мл стерильного раствора 0,25 г lilb,-21-uit гидрокси- 17с6- (1 -метоксиэтокси)-6 -метил-4-прегнен-З,20-диона в диметилформгишде и ферментируют в течение 72 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 0,21 г 11,21-дигидрокси-17eL- (1 -метоксиэтокси) -6о -метил-1 ,4-прегнадиен-3,20-диона с точкой плавления . При мер 13. а/ 50 г 21-ацетокси-17с1-гидрокси-4-пре:гнен-3,20-диона суспендируют в 600 мл формальдегиддиэтилацеталя и бОО мл метиленхлорида и охлаждает до (-30) -. (-40)С. При перемешивании вносят смесь 75 г полупятиокиси фосфора и 150 г кизельгура и перемешивают в течение 30 ч при , Раствор фильтруют и нейтрализуют триэтил амином. После отгонки растворителя перегоняют с метанолом и остаток перекристаллизовывают из метанола. Получают 35,9 г 21-ацетокси-17(С-этоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона, который после повторной перекристаллизации плавится, при 137-139 С. в) В двухлитровой колбе Эрленмейера с 1 л питательного раствора, содержащего 1% Cornsteep Liquor и 1,25% соевой пудры и установленного на рН 6,2., прививают с промывной сухой культуры Curvutаг|а Lunata NRRL 2380 и при 30С в течение 72 ч встряхивают (175 об./мин) . В 50-литровом ферментаторе с 23 л стерильной питательной среды прививают 1 л выращенной культуры Cur.vularia Lunata и при в течение 24 ч при аэрации с 2 м уч культивируют. В 50-литровом ферментаторе с 36 л питательного раствора, как описано выше, прививают 4 л предварительно ферментированной культуры Curvular{а ..unata и при в течение 10 ч культивируют при аэрёщки 2-м перемешивании 220 об./мин . Затем к культуре добавляют 10 г 21-ацетокси-1.7вС-этоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона в 200 мл монометилового эфира этиленгликоля, С десятого часа рН дер- жится между 6,5 и 7,0. Через 4 ч добавляют 10 г 21-ацетокси-17о1--этоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона в 200мл моноэтилового эфира этиленгликоля и фермент1|руют 23 ч при указанных условиях. ..

Культуру ферментации трижды экстрагируют 10 л этиленхлорида и затем перерабатывают дальше так, как описано в примере 1в. Получают 13,8 г ; 1ЦЬ,21-дигидрокси-17о -этоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 153-154 с.

Пример 14. а) 25 г 21тацетокси-17с11/-гидрокси-4-прёгнен-3,20-диона суспендируют в 20.0 Мл формальдегиддипропилацеталя и 320 мл метиленхлорида и охлаждают до . При перемешивании вносят смесь из г полупя тиокиси фосфора и 97 г кизельгура и перемешивают в течение 22 ч при 20с Раствор фильтруют и нёйтpaпиэsrЮт триэтиламином. Метиленхлорид отгоняют в вакууме и формальдегиддипропилацетальную фаэ1у сливают с высадившегося масла. После отгонки растворителя в вакууме выкристаллизовываются 19 г 21-ацетокси-17си-пропоксимет.окси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 145-147 0.

в) 10 г 21гацетокс:и-17Л-пропоксиметоксн-4-прегнен-З,20-диона пёремаг лывают с 1 г Tween 80 и трехкратном количеством воды в Dyno-мельнице типа KDL (Fa. Bachoferi, Basel).. Эту измель ченную массу стерилизуют с 1%-н6Й ,: .минимум 4 ч.- J

CurvularJa .Lunata MRRL 2380, как описано в примере 13 в, выращивают . в колбе для встряхивания и предфермён таторе и затем прививают в главном ферментаторе. Этот ферментатор ycTia«авливают так же, как описано в при-мере 13в, и выращивают в течени е10 ч при условиях примера 13в. ЗатеМ к культуре прибавляют измельчённую маеСУ 21-ацетЬкси-17о1-пропоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона и ферментируют в течение 44 ч при рН 6,4-6,7.. Культуру ферментации, как описано в примере 13в, перерабатывают и получают 6,5 г lip,21 -дигида окси-17«6- пропоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 134/135-136 С.

Пример 15, а) 50 г 21-ацетокси-17е -гидрокси-4-преГнен-3,20- : -диона суспендируют с 500 мл формаЛ1Ьдегиддибутилацетёшя и 500 мл метиленхлорида и охлаждают до . При перемешивании вносят смесь из 74 г полупятиокиси фосфора и 150 г кизелЬгура и перемешивают в течение 30 ч при . Раствор фильтруют и нейтрализуют триэтиламином. Метиленхлорид отгоняют в вакууме и формальдегиддибутилацетальную фазу сливают с высадившегося масла.. После отгонки растворителя в вакууме выкристаллзовываются, 38,7 г 21-ацетокси-17Л-бутоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 123,5-124,5

в) 8 г 21-ацетокси-17«1-бутоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона перемалывают с 0,8 г Tween 80, как описано в примере 14B.Curvula,rIa Lunata NRRL 2380 выращивают и ферментируют в колбе для встряхивания в качестве культуры для выращивания, в предферметаторе и основном ферментаторе, как описано в примере 13в. Через 10 в основной ферментатор .добавляют вещество и ферментируют 50 ч.

Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в, и получают 3,7 г 11(Л,21-дигидрокси-1И.-бутоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 79-81 С.

Пример 16. а 10,6 г 21-ацетокси-6с1-фтор-17«{-гидрокси-4-прегнен-3,20- диона растворяют в , 265 мл Метиленхлорида и 47,7 мл формальйегиддиметилацеталя, добавляют смесь из 7,95 г полупятиокиси фосфора и 15,9 г кизельгура и в течение 90 мин под азотом перемешивают при комнатной температуре. Раствор фильтруют и смешивают с 2,1 мл триэтиламина. Растворитель отгоняют и остаток выкристаллизовывается из метанола, получают 7,6 г 21-ацетокси-б(-фтор-17сС-метоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 16 1-16 7 С.

в)- Curvu lari а I unata NRRL 2380 выращивают, как описано в примере 13в в колбе для встряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 10 ч в основной фрементатор добавляют 5 г 21-ацетОКси-6Ы.-фтор-17 -метоксимётокси-4-прегнен-3,20-диона В 100 мя монометилового эфира этиленгликоля. К этому времени рН составляет 6,5-7,0. Через 14 ч добавляют 5 г 21-ацетокси-6сЬ-фтор-17о1-метокси-4-прегнен-3,20-диона в 100 мл Монометилового эфира этиленгликоля и ферментируют 26 Ч.

Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в, и получают 4,2г 11|Ь,21 -ди гидрок си - 6о1-фтор-17А-метоксиметокси-4-щ)егнен-3,20-диона с температурой плавления 190192 С.

Пример 17. а) 43 г 3(,21-диaцeтoкcи-17(i,-rt дpoкcи-16-мeтил-5-пpeгнeн-20-oнa растворяют в 800 мл формальдегиддиметнлацеталя и охлаждают до . Порциями вносят смесь 43 г полупятиокиси фосфора и 86 г кизельгура и перемешивают при в течение 15 ч. Раствор.фильтруют, нейтрализуют триэтиламином и растворитель отгоняют в вакууме. Остаток выкристаллизовывается из метанола, по 31,5 г ЗР, 21-диaцeтoкcи-17(i-мeтoкcимeтoкcи-16pl-мeтил-5-пpeгнeн-20-она с температурой плавления 117iie c. в) F1avobacteгI urn dehydrogenans АТСС 13930 выращивают и ферментируют как описано в примере 1в. Через б ч к культуре добавляют 4 .мл стерильного раствора 0,2 г 3(Ь,21-диацетокси 17о1-метоксиметокси-1б)-метил-5-прегнен-20-она в диметилформамиде и встря хивают еще 65 ч. После прошедшей ферментации культуру перерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 163 мг 21-гидроксн-17сС-метоксиметокси-16(Ь-метил-прегнен-3,20-диона с температурбй плавления 126/128-129°С. с) Curvularia Lunata NRRL 2380 выращивают и ферментируют как описано в примере 1с. Через 6 ч к культуре добавляют раствор 50 мг 21-гидрокси -17cL.-мeтoкcи-16f -мeтил-4-пpeгнeн-3 ЗО -диона в диметилформамиде и ферменти руют 65 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 34,5 мг 11р,21-дигидp кcи-17«l-мeтoкcимeтoкcи-16Э-мeтил-4-пpeгнeн-3,20-диoнa с температурой плавления 204/205-20бС. . Пример 18. а) 29,1 г 21-аце токси-6-хлор-17Ы.-гидрокси-4,6-прегнадиен-3,20-диона растворяют в 730мл метиленхлорида и 131 мл формальдегид диметилацеталя добавляют смесь из 22,12 г полупятиокиси фосфора и 44 г кизельгура и смесь перемешивают под азото в течение 2,5 ч при комнатной температуре . Раствор фильтруют и смешивают с 5,8 мл триэтиламина. Растворитель отгоняют и остаток пере-кристал- лизовывают из метанола при добавлени активированного.угЛя и-1% триэтилами на. Получают 15,6 г 21-ацетокси-б-хлор-17оЬ-метоксиметокси-4,6-прегнадиен-3,20-диона с температурой плавл ния 183-186 С. в) Curvularia Lunata NRRL 2380, как в примере 13в, выращивают в колбе для встряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 9чв основной ферментатор добавляют 3 г 21-ацетокси-6-хлор-17с).-метоксиметокси-4,6-прегнадиен-3,20-диона в 60 мл монометилового эфира этиленгликоля. При рН 6,4-6,7 ферментируют 20 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в/ и получаю 1,8 г 11|1,12-дигидрокси-6-хлор-17вг.-метоксиметокси-4,6-прегнадиен-3,20-диона с температурой плавления 234/ /235-236«С. Пример 19. а) 38,85 г 21-ацетокси-17й1-гидрокси-4-прегнен-3,2 -диона перемешивают с 235 мл формадь дегиддиизопропилацеталя и 500 мл мётиленхлорида и охлаждают до -20С. При перемешивании вносят смесь из 75 г полупятиокиси фосфора и 150 г кизельгура и перемешивают при -20с в течение 20 ч. Смесь фильтруют, промывают метиленхлоридом и триэтиламином, доводят до рН 9. Растворитель отгоняют в вакууме и остаток экстрагируют метиленхлоридом. Раствоо поомывают полунасыгаенным оаствооом хлооида натЕэия. сушат сульфатом натоия, обрабатывают активированным углом, отсасывают через кизельгур и концентрируют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле смесью толуолуксусный эфир, получают 35,8 г 21-ацетокси-17 -изопропоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона, который после кристаллизации с пентаном имеет температуру плавления 111-117с. в Curvelaria Lunata NRRL 2380 выращивают, как описано в примере 13в, в колбе для встряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 9 ч в основной ферментатор добавляют 12 г 21-ацетокси-17с6-изопропоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона в 240 мл этиленгликольмонометилового эфира при рН 6,5-7,0 и ферментируют в течение 15 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в, и получают 8,4 г 11,21-дигидрокси-17о1--изопропоксиметокси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 71/73-78°С. с) Arthrobacter simplex АТСС 6946 выращивают, как описано в примере 11 в колбах для выращивания и ферментации. Через 5 ч в колбу для ферментации добавляют 1 мл стерильного раствора 50 мг 11|1,21-дигидрокси-17с1изопропоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона в этиленгликольмонометиловом эфире и ферментируют в течение 42 ч. Культуру ферментации лерерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 32 мг 111Ь,21-дигидрокси-17 -изопропок симетокси-1,4-прегнадиен-З,20-диона с температурой плавления 58/63-65с. Пример 20. а) F1avobacteriит dehydrogenaus АТСС 13930 выращивают в колбе для встряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 24 ч в основной ферментатор добавляют 19,5 г 16-метилвн-3(Ь,21-диацетокси-17 1-метоксиметокси-5-прегнен-20-она в 500 мл диметилформамида и ферментируют в течение 28 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в, и получают 15,5 г 16-метилен-21-гидрокси-17о(,-метоксиметокси-4-прегнен-З,20-диона с температурой плавления 147/15015lc. в) Curvularta Lunata NRRL 2380 выращивают, как описано в примере 13в, в колбе для встряхивания, предварительнрм и основном ферментаторе. Череэ 9 ч в основной ферментатор добавляют 20 г 16-метилен-21-гидрокси-17с -метоксиметокси-4-преЫен-3,20-диЬна в 400 МП этиленгликольмонометилового эфира при рН 6,4-6,7 и ферментируют 8ч, Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13в, и полу чают 11 г Хб-метилен-ИР,21-дигидрокси-17А-метокскметокси-4-прегнен-3,20-диона с температурой плавления 205/ 206-208 С. Пример 21. Arthrobacter simp lex АТСС 6946 выращивают, как описано в примере 11, в колбах для выращивания и ферментации. Через 5ч в колбУ для ферментации добавляют 1 мл сте рильного раствора 50 мг llf ,2i-дигидpoкcи-17eL-пpoпoкcймeтoкcи-4-пpeгнeн-3,20-диoнa в этилёнглккольмонометиловом эфире и ферментируют в течение 42 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1в, и получают 41 мг 11,21-дигидрокси-17с1/-пропоксиметокси-1,4-прегнадиен-З., 20 диона с температурой плавления 121/, /125-127 С. 1юрмула изобретения. Способ получения 11р -гидроксистероидов общей формулы I осш где X - водород, фтор, хлор или метил; . W - метиленовая, этилиденовая или винилиденовая группа, R - алкил с 1-8 атомами углерода; R/j - водород или алкил с 1-4 ато-. мами углерода; R4. - водород или гидроксил, пунктирная линия .означает возможную . двойную связь, отл и чающий с я тем, что 11-дезоксистероид общей формулы II ocHOR W j рде X., W. R и R имеют указанные , R| - водород, гидроксил или алканоилоксигруппа с 1-6 атомами уг-. лерода, ферментируют грибковой культурой семейства Curvularia и полученное соединение в случае необходимое- . ти дегидрируют в положении 1,2 с последующим вкзделением целевых продуктовПриоритет по признакам: 25.01.78 X - атом водорода, фтора или метил; R - алкил ,, 19.12.78 г X - атом хлора, R - гшкил G-y-Cg. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Патент ФРГ № 1618599, кл. С 07J 5/00, 1966.