Способ определения криза отторжения трансплантированной почки Советский патент 1981 года по МПК G01N33/48 

С54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КРИЗА ОТТОРЖЕНИЯ ТРАНСПЛАНТИРОВАННОЙ ПОЧКИ Изобретение относится к медицине а именно к способам диагностики криз отторжения пересаженных органов. . Известен способ определения криза отторжения трансплантированной почки путем измерения активности фермента в моче реципиента J. Однако известный способ не позволяет проводить раннее определение криза отторжения, а именно за 3-4 су до развития клинических проявлений криза отторжения трансплантированной почки. Цель изобретения - более раннее определение криза отторжения. Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа определения криза отторжения трансплантированной почки путем измерения активности фермента в моче реципиента, определяют активность Г-глутамилтрансферазы и по повьпиению уровня активности этого фермента по сравнению с нормой определяют криз отторжения трансплантированной почки Способ осуществляют следующим образом. Инкубируют при пробу мочи 0 0/1 мл (или плазмы крови) в 3 мл реакционной смеси, содержащей, MMIJ-глутамил п-нитроанилид 4, глицил глицин 65, NaCI 140, трис-HCl 10, янтарную кислоту 6, рН смеси 8,2+0,1, Активность фермента определяют кинематическим методом, а именно по изменению оптической плотности за 1 мин, Определение оптической плотности образца производят «а спектрофотометрах при длине волны 400-420 нм(точнее при 405 нм } в 2 см кварцевых кюветах, По повышению уровня активности У-глутамилтрансферазы по сравнению с нормой определяют криз отторжения трансплантированной почки. Пример 1. Больной Н., 39 лет, поступил по поводу хронического гломерулонефрита. В тот же день больному сделана операция по аллотрансплантации трупной почки. После операции состояние средней тяжести, Функционирование трансплантата удовлетворительно, на девятые сутки после операции развился острый криз отторже НИН, который не удалось купировать. Динамика показателей активности У-глутамил-рансферазы (ГГТФ) у больного Н. после аллотралсплантации трупной почки приведена в табл.Ч. Из табл. 1 видно, что развитие криза отторжения, определяемого клини.ческими методами, а именно только на де вятые сутки,удается данным методом диагностировать за 2-3 сут,т.е.в данном случае на 7-8 сут после операции Отличительной чертой развития криза отторжения является возрастание абсолютных значений активности ГГТФ в моче от 15,65 ME (что является средним фоновым показателем) по 78,2 МБ на 7-8 сут и 93,6 ME на вось мые сутки, что в 5-6 раз превышает фоновые показатели. Имеют место такж возрастание разности в активности ме ду ГГТФ в моче и крови,что свидетель ствует о том,что данный фермент,кото рый .определяется в моче - в основном почечного происхождения, не идет по гр диенту концентрации из крови. Пример 2, Больной Б., 41 го поступил по поводу хронического гломерулонефтрита. Больному произведена аллотрансплантация трупной почки Примерно через месяц после операции больной был выписан при хорошей функции аллотрансплантата. Через 2 мес после операции больной повторно госпитализирован по поводу ухудшения состояния после трансплантации трупной почки. Сравнительная характеристика показателей активности ГГТФ у больного В.в раннем послеоперационном периоде и через 2 мес приведена в табл. 2. Как видно из табл. 2, ранний послеоперационный период у больного Б. характеризовался невысокими цифрами активности ГГТФ как в крови, так и в моче, а коэффициент риска был в пределах от О до 1. Через 2 мес посл операции наступило ухудшение состояния в связи с развитием криза отторжения аллотрансплантированной почки, о .чем свидетельствовали не только клинико-лабораторные показа.тели при повторном поступлении боль- него в клинику, но и повышение активности ГГТФ в моче в 2-3 раза по сравнению со спокойным периодом, а также увеличение коэффициента риска до 5,1. Возрастание абсолютных цифр активности ГГТФ и коэффициента риска было не столь резким, что свидетельствует о обратимости клини ческих проявлений криза при своевременном и правильном его лечение. Возникший криз отторжения у данного больного удалось купировать и он был вновь выписан через 2 нед. Пример 3. Беспородная собака .с аллотрансплантированной почкой, которая не получила иммунодепре санты в послеоперационном периоде, и, следовательно, у нее закономерно ожидали криз отторжения на 7-10 сут. после операции. Динамика показателей активности ГГТФ и пересадке почки в. эксперименте приведена в табл. 3. Из табл; 3 видно, что определять криз удается на пятые сутки, что выражается В 24-кратном увеличении активности ГГТФ. Пример 4. Больной А., 20 лет, диагноз: хроническая почечная недостаточность на почве хронического пиелонефрита, хронической азотемической уремии (терминальной стадии). При поступлении состояние тяжелое. Больному произведена операция пересадки почки от трупа. Через месяц больной выписан домой на амбулаторное лечение. Сравнительные показатели анзимограммы при положительной динамике восстановления функции аллотрансплантированной почки у больного А. при-ведены в табл. 4. Как видно.из табл. 4 при хорошей динамике восстановления функции аллотрансплантированной почки показатели активности ГГТФ в моче колеблются в пределах средних значений активности ГГТФ, выраженных в Международных Единицах, характерных для удовлетворительного течения послеоперационного периода при аллотрансплантации трупной почки. Пример 5. Активность ГГТФ в моче больной Х-ой, 14 лет при развитии острого криза отторжения аллотрансплантированной почки, взятой от трупа, приведена в табл. 5. Как видно из табл. 5 определение активности ГГТФ в моче больной опережает информацию о надвигающемся кризе отторжения по сравнению с таковой, полученной при определении активности ЛДГ в 2 раза. При этом криз отторжения был установлен по используемым трансплантологг1ми клиническим признакам. Предлагаемый способ был опробован на 60 больных с пересаженной почкой трупа и на 12 собаках, при этом было выявлено опережение предлагаемого способа определения криза отторжения за 2-3 сут.- до начала криза отторжения диагностируемого клиническим методом, что позволяет начать лечение раньше чем появлялись клинические признаки криза и дает возможность более успешного купирования криза.

Таблица 1

Коэффициент риска определяют по отношению активности фермента в моче к активности фермента в крови.

Таблица i

Таблица 3

Таблица 4