Способ профилактики отторжения пересаженного органа Советский патент 1988 года по МПК A61M1/38 

ьо

Изобретение отшнштся к в частности к трансггллщчхчог ии.

Цель итобретенин - повышение эффективности 1Ч5оФнлактики II умемьте- нив токсического попдействия ,.

Пример 1. У (собака самец массой 16 кг) под общим обезболиванием (калипсол 10 мг/кг в/м, атропин 0,3% в/м, тиопентал натрия 30 мг/кг в/в) с применением интубации трахеи и искусственной вентиляции аппаратом РО-5 кислородно-воздуной смесью произвели средин тую ла- паротомию и зябор дисталь;{ого сег- мента левой доли поджелудочной железы вместе с селезеночными сосудами. После промыва шя сосудистого русла гепаринизированным раствором Ев- роколлинза трансплантат желечы по- местили в тот же коргсерпирующий па- ств о) при 4 С на 2ч.

У реципиента (собака, самка массой 15 кг) под общим обезболиванием по указанной методике за 3 ч до сег-ментариой трансплантации поджелу доч)1Ой железы во вскрытый просвет обпаже 1ной сонной артерии и наруж- HOi i лрем)гой aeHfji справа ввели ли. С помоип ю экстракорпоральных шунтов их соединили с фракционатором кро:зи ФК-3,5 и ос тцествкпи лим- фсигейкасЬерез, Перед лроцедурой реципиенту внутривенно ввели 7 500 ед. гепарина (500 ед. уа 1 кг массы).

При исследояани и исходной пробы периферической венозной крови бьши определены следующие параметры изучаемых показателей: эритроциты 4,3 млн, лейкоциты 7,6 тыс., лимфоциты 29%, СОЭ 5 мм/ч,

В результате проведенного лим- фолейкафереза бьшо удалено 80% лейкоцитов и лимг})оцитов .от их исходного содержания в периферической веноной крови реципиента. Повторное исследование изучаемых показателей сразу после процедуры позволило ITO- лучить следующие результать : эритроциты 4,2 млн., лейкоциты 1,5 тыс., лимфоциты 5,9%, СОЭ 8 мм/ч. Таким образом, реципиент был подготовлен к пересадке поджелудочной железы путем снижения его предоперационной иммунной реактивности на аллотрансплантируемьгй орган.

i

Далее параректальным разрезом

внебрюшинно обнажили и моби,гп зовали наружные подвздошные сосуды. Для

g 5 0

5

5

0

5

0

5

0

обеспечения жиз геспособности поджелудочной железы Tia период ее подготовки к ересадке и непоср едствен- но во время трансплантации проксимальные концы селезеночных сосудов посредством каннхть и экстракорчораль- ных шунтов соединили с сосудами, временно выделенными на противопо- л ожной конечности, внутривенно ввели гепарин (500 ед. на 1 кг массы) и приступили к перфузии. Подготовка железы с пересадке состояла в проведении тщательного гемостаза путем электрокоагуляции и лигирования мелких сосудов, а также удаления из- л-ишней жировой клетчатки. Затем «сформированные воронкообразные раструбы из наиболее крупных дистальных ветвей селезеночной артерии и вены путем продольного рассечения их места деления вшива-г и в соответствую- ише наружные подвздошные сосуды реципиента по типу конец в бок. Пересаженную железу включили в кровоток и закончили ее внутриорганную перфузию. Продолжительность тепловой (18-21 С) аноксии (во время забора) трансплантата не превышала 3 мин, .:- длительность его холодовой (4-12 CJ аноксии составила 2 ч 40 мин.

Сегмент железы трансплантировали вместе с клетчаткоГ:, окружающей панкреатические и селезеночные сосуды, и расположенными в ней отводящими лимфатическими сосудами, регионар- ьыми лимфатическими узлами и под- желудочньми нервами. Лимфоотток осуществили наложением анастомоза вскрытым ivpaeBbiM синусом одного из самых крупных лимфатических узлов, расп. пагающимся у места впадения селезеночной вены в воротную, и глубокой огибающей подвздощной веной. Реиннерваф-гю железы осуществили путем сшивания сформированного лоскута из клетчатки, локализуюи(ейся на задней поверхности трансплантата, с фасциально-клетчаточным лоску ом, образованным над подвздошньми сосудами. Дренирование панкреатического протока осуществили в брюшную полость посредством подшивания усеченного участка железы к краям образованного окна в брюшине с размещением трансплантата экстраперитопсально. После фиксирования трансплантата железы к окружающим тканям рану зашили послойно наг лухо. Опс-рацпю выполкили под оггерлционным микроскопом с применением микрохирургической техники-, проленовых нитей 8/0-10/0 на атравматической игле.

В последующем на 3-, 5-, 7- и 9-е сутки после операции подопытному животному осуществили лимфолейка- ферез с целью снижения иммунной реактивности реципиента на аллотран- сплантированный сегмент поджелудочной железы.

В течение всего периода наблюдения после операции не наблюдали ос- ложпеиий, а трансплантированная под- желудочная железа сохраняла жизнеспособность. Для профилактики воспалительных осложнений, тромбоза сосудистых анастомозов и послеоперационного панкреатита бьш проведен курс лечения антибиотиками, гепарином и гордоксом.

На 10-е сутки после операции согласно задачам эксперимента оперированное животное было выведено из опыта. В :)тот период наблюдения уровень инсулина, глюкозы и липазы крови составлял соответственно 20,4 мкед/мл, 5,4 ммоль/л и 64 .ед В что подтвердило нормальную эндокринную функцию трансплантата и отсутствие в нем признаков панкреатита. Не высокое СОЭ (10 мм/ч), небольшое уменьщение эритроцитов (4 млн.), лор мальные показатели КЩС и оксигсна- ции крови рН - 7 ,36, SB - 20,5 мэкв/л, БЕ - 1,5 мэкв/л, 94,5%, HBOjB 74,2%, А-В различие по кислороду 20,3%, отсутствие увеличения ACT и АЛТ (соответственно 6,7 МП/л и 3,9 МЕ/л) также свидетельствовали об отсутствии развития криза оттор- же}шя трансплантата. При макро- и микроскопическом исследовании трансплантата сегмента поджелудочной железы признаки деструкции органа не были выявлены. В течение всего послеоперационного периода животное не полу зло иммунодепресанты.

Таким обрачом, представленные результаты наблюдения показали, что пре.длагаемый способ позволяет добится снижения иммунной реакции реципиента на трансплантат и дает возможность сохранить функцию трансплантата на протяжении всего периода набл дения.

трансплантации поджелудочной желечь; в усл( клиники делаются

Q

Q

5 5 0

0 5

0

первые попытки. Поскольку иммунологические механизмы у людей и животных в ответ на аллотрансплантацию любого органа однотипны, то все приемы предлагаемого способа с полным основанием могут быть применимы в клинической практике не только при пересадке поджелудочной железы, но и других органов и тканей. Об этом убедительно свидетельствуют резулт - таты использования предлагаемого способа как для предотвращения, тик и купирования криза отторжения при трансплантации щитовидной железы в комплексе с паращитовидными желе зами, а также почки. При этом наблюдалось восстановление функции пересаженных органов.

Пример 2.У донора К. через 50 мин после смерти от ишемической болезни сердца с острым развитием ко ронароспазма и кардиогенного шока осуществили .забор щитовидной железы вместе с пара1цитовидными железами. После отмывания внутриоргаиного сосудистого русла до чистого отделяемого и 18-часовой консервации беспер- фузионным гипoтep пчecким способом трансплантат был пересажен реципиент- ке А. на сосуды левого плеча в связи с наличием послеоперационного ги- попаратиреоза и гиг1от реояа с тедней тяжести.

За сутки до операции с целью уменьшения иммунного отиета и предупреждения развития криза отторжения больной бььт проведен лимфолей- кз ферез. В результате этого было удалено 80% лейкоцитов и лимфоцитов от исходного количества. При исследовании исходной пробы веночной крови количество эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов и уровень СОЭ составили соответственно 5,4 , 7,2 тыс., 31% и 4 мм/ч, а срлчу после процедуры бьши получены следую11у1е результаты: эритроциты 5,1 млн., лейкоциты 1,52 тыс., лимфоциты 6% и СО Э 9 мм/ч. В посттрансплантационном периоде на 3-, 7- и 10-е сутки к больной применили предложенный способ для снижения иммунной реактивности реципиента на пересаженньп) щитовидно-пара- 1ЦИТОВИДНЫЙ комплекс. Лабораторные исследования показали, что после каждой процедуры снижалось количество лейкоцитов до 1,2-2,2 тыс., лимфоцитов до 3-6% и через 2-4 сут после

нее их возрастало соответственно до 3,7-4,5 тыс. и до 14-17%. При этом количество эритроцитов и уровень СОЭ практически изменялось. Несмотря на то, что больная не по- лзгчала -иг-мунодепрессинную терапию, в этот период наблюдения не имелось признаков отторжения. На 3- и 1О-е сутки после операции нормальные показатели гормонов и общего кальция крови (трииодтиронин Т - 1,5 и 1,9 мг/мл, тироксин Т 79 и90нг/мп паратгормон ПГ 2,2 и 2,7 мкед/мл,, гиреотропный гормон ТТГ 3,1 и 3,4 мк ад/мл, общий Са 2,25 и 2,30 ммоль/л) указывали на адекватную эндокринную функцию пересаженно :: о щитовидно-паращитоБИдног о комп- екса и нормальный кальцевый обмен. I С 12 сут реципиентка была пере- иедеиа на постоянную щадящую имнун- нодепрессивну о терапию, которая включала преднизолон 1 мг/кг и хо- риогонин 10 ед./кг.

В течение 12 мес после операции Пересаженный трансплантат хорошо уикционировал (Тд 1,2-2,1 нг/мг, 86-102 нг/мл, ПГ 2,1-2,6 мкед/м ;ТГ 2,0-2,6 мкед/мл, обвд-тй Са ,10-2,25 ммоль/л) и не наблюдалось р|азвития признаков криза отторже шя : Таким образом, представленное р аблюдение показывает, что предложенный способ обеспечивает снижение иммунноГ: реакции реципиента HJa аллотрансплантат и предупрежде- криза отторжения без применения и муннодепрессивной терапии и обе- с 1ечивает нормальную функцию пересаженного органа. Г

Предлоясенный способ может применяться не только с целью предупреждения развития криза отторжения трансплантата, но и для купирования начавшегося криза отторжения.

Пример 3. Б-ная 3. Кли- нический диагноз: Гипопаратиреоз и гопотиреоз послеоперационный, тяжелая форма. Больной была произведана аллотрансплантация щитовидной железы в комплексе с паращи- товидными железами. Трансплантат был взят через 30 мин после смерти от инфракта миокарда и в течение 20 ч подвергался консер)зации бе Сперфузионным гипотермическим сп , С первых суток после опера

15

20

424854

ции больная полу1гала щадящую пммуно- депрессивную терапию (преднизолон 0,5 мг/кг, гепарин 330 кед/кг). На

10-е сутки развились признаки остро- ь

го криза отторжения, выразившиеся в

уменьшении в крови тпреоидных гормонов (Tj 1,8 до 0,4 нг/мл, Т с 96 до 32 1 г/мл), паратгормона (ПГ с 2,4 до

IQ 0,7 мкед/мл), общего кальция (Са с 2,24 до 1,65 ммоль/л) и повышении уровня тиреотропного гормона (ТТГ с 2,4 до 42,5 мкед/мл). Одновременно возросло количество лейкоцитов (с 3,3 до 12,5 тыс.) и лимфоцитов (с 5 до 28%) . В связи с чем больной провели две процедуры лимфолейкафереза по предложенному способу с интервалом в 3 дн. и начавшийся криз отторжения был купирован без увеличения дозы иммуннодепрессантов.

Через сутки после первой процедут ы было отмечено быстрое восстановление функции пересаженного 1цитовидно-па25 ащитовидного комплекса и нормализация содержания общего кальция в крови на фоне снижения количества лей- КО1ЩТОВ и лимфоцитов. Спустя двое суток после второй процедуры конце нтраци i в крови изучаемых показателей составила Т 2,3 нг/мл, Т 98 нг/мл, ПГ 2j 4 мкед/мл,ТТГ 1,4мкед/м.П5 общий кальций 2,18 ммоль/л, что указывало на нормальную функцию трансплантата. Нормальная функция пересаженного щит ОБИД но парашд товидного комплекса сохранялась в течение 10 мес наблюдения за больной. На протяжении всего периода наблюдения получала иммуннодегтрессивную терапию.

Таким оСразом, данное наблюдение свидетельствует, что применение пред- ложен}1ого способа дает возможность предотвратить развитие криза отторжения и сохранить функцию пересаженного органа. При этом важно отметить, что применение предлагаемого способа усиливает действие проводимой иммун- нодепрессивной терапии.

30

35

40

45

Пример 4.У больного X на

6-е сутки после аллотрансплантации почки по поводу хронической почечной недостаточности в стадии декомпенсации развился .острый криз отторжения на фоне проводимой иммуноде- прессивной терапии (преднизолон 1,5 мг/кг, азатиоприн 3 мг/кг в сут ки). При этом количество отделяемой мочи в сутки сократилось с 900 до

714248

i50 мл, позрогло количество лейкоцитов с 5,4 тыс. до 19,7 тыс. лимфоцитов с 5 до 26%. Одновременно увеличилась концентрация креатинина в нлазме до 0,76 ммоль/л. Больному была проведена одна процедура лим- фолейкофереза на 7-е сутки после операции. В результате чего снизились

лейкоциты и лимфоциты периферической крови соответственно до 3,1 тыс, и 4%. Через сутки после процедуры началось быстрое восстановление моче- выделительной и азотовьиелительной функции трансплантата. Это вырази- лось в увеличении количества мочи до 800 ил, уменьшилась концентра ция креатинина плазмы крови до 0,37 ммоль/л. Спустя трое суток после процедуры количество мочи достиг- ло 2300 мл в сутки и наступила нормализация креатинина плазмы крови

548

(0,12 ммоль/л). В течение следующих 2,5 мес иммуннопрессивной терапии развития признаков криза отторжения не отмечалось. Больной бып выписан в удовлетворительном состоянии.

Таким образом, предлагаемый способ может не только предотвратить дальнейшее прогрессирование уже развившегося острого криза отторжения, но ликвидировать его и нормализовать функцию трансплантата.

Формула изобрете-ни

Способ профилактики отторжения пересаженного органа путем иммуно-. супрессии, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности профилактики при снижении токсического воздействия, за сутки до операции и каждые 2-3 сут после операции проводят лимфолейкаферез.

Изобретение относится к трансплантологии. Цель изобретения - повышение эффективности профилактики при снижении токсического воздействия. За сутки до операции и каждые 2 - 3 сут после операции проводят лимфо лейкаферез. Способ позволяет предотвратить прогрессирование развиЕ. аегося острого криза отторжения, ликвидировать этот криз и нормализовать функцию трансплантата.