(54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ВЕЩЕСТВ С РЕТАРДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
I
Изобретение относится к регуляции роста растений и может быть использовано при поиске веществ с ретардантной активностью для использования их в сельскохозяйственной практике.
Известен способ обнаружения веществ с ретардантной активностью по различным показателям, свидетельствующим о торможении роста l.
Известен также способ обнаружения веществ с ретардантной активностью, включающий выращивание тест-культуры на субстрате с испытуемыми веществами. Так, используя проростки пшеницы, ретардантную активность можно выявить на 5-й - 15-й день после начала тестирования 2 .
Однако известные способы имеют относительно длительный срок тестирования и недостаточную объективность обнаружения.
Рост является лишь конечным проявлением длительной цепи биохимических и физиологических процессов. Кроме
2
того, действие ретардантов проявляется не только в их влиянии на рост, но и в изменении ряда свойств, не связанных с ростом. Например, усиливается окраска цветов, повышается содержание хлорофилла, усиливается интенсивность фотосинтеза, повышается белковость семян. Поэтому биохимические показатели могут быть более быстрыми , более объективными и специфич10ными, чем ростовые.
Целью изобретения является сокращение срока тестирования и повышение объективности обнаружения.
Поставленная цель достигается тем,
15 что в качестве тест-культуры используют проростки гречихи, определяют в 3-5-дневных проростках содержание фенольных соединений и по увеличению последних обнаруживают вещества с
20 ретардантной активностью.
Тестирование на ретардантную ак тивность проводится следующим обра- 90М.
Семена гречихи сорта Шатиловская замачивают на ночь в воде. Затем их, раскладывают в кюветы на влажную , фильтровальную бумагу для проращивания. Проращивание проводят при комнатной температуре. Одинаково наклю-нувшиеся семена с корешком, длиной 5-7 мм, .что достигается на вторые сутки, высаживают по JO шт. в бумажные стаканчики высотой 2,5 см и объемом 40 см на влажный перлит, куда вносят 1 мл исследуемых веществ разной концентрации. В контроль вносят такое же количество воды.
Проростки выращивают в кондиционированных условиях при 20 С и освещении 35 тыс. эрг/см сек. На 3-й день проводят анализ фенольных соединений. Промеряют также и высоту проростков. Для анализа навеску из 10 проростков, отдельно семядоли и гипокотили, замораживают жидким азотом, тщательно растирают в ступке и элюируют 80%-ным этанолом или метанолом общим объемом 3 мл. После фильтрования 1 мл элюата наносят на колонку из окиси алюминия и дальнейщее определение проводят по методу Дукера и Аренса.
В таблице показано влияние ретардантов и гибберелловой кислоты на уровень фенольных соединений и рост в трехдневных проростках гречихи сорта Шатиловская.
Как видно из данных таблицы, ретарданты по-разному стимулируют образование фенольных соединений в семядолях и гипокотилях проростков . Нет прямой корреляции между уве личением содержания фенольных соеди803484
неиий и подавлением роста, Так, хотя максимальное подавление роста гипокотиля и максимальное увеличение фенольных соединений происходит под 5 действием Н,М-диметилморфолиния, хлорхолинхлорид, значительно увеличивающий уровень фенольных соединений, в меньшей степени подавляет рост, чем бромистый диметил-|5-бромэтилсульфоfO НИИ, который в меньшей степени увеличивает содержание фенольных соединений. По-видимому, это может позволить выделить различные группы ретардантов , одни из которых сильнее ствуют на рост, другие - на синтез фенольных соединений, а третьи сильно влияют на оба показателя. Приведенные результаты, кроме того, еще раз показывают, что ростовая реакция
2Q и стимуляция синтеза фенольных соединений могут быть разными характеристиками ретардантной активности. Для всех испытанных соединений реакция гипокотилеЙ сильнее, чем семядолей.
Гибберелловая кислота, вещество,
противоположное ретардантам по действию На рост, так же противоположно влияет и на содержание фенольных сое3Q динений понижая их уровень. Это свидетельствует о некоторой специфичности проростков гречихи, как теста на ретарданты. По литературным данным у других растений, например у гилениума, и ретарданты и гиббереллин примерно в 2 раза повышают содержание фенольных соеди(1ений.
Эффект действия ретардантов, хотя и менее четкий, сохраняется и на 5-ft день.
78803488
Формула изобретения v проростках содержание фенольных соеСпособ обнаружения веществ с ретар- обнаруживают вещества с ретардантной дантной активностью, включающий вьфа- активностью, щивание тест-культуры на субстрате с s
испытуемыми веществами, отличаю- Источники и орнации, щ и и с я тем, что, с целью сокраще- принятые во внимание при экспертизе ния срока тестирования и повышения : Задонцев А.П. и др. Хлорхолинобъективности обнарзпкения, в качест- в растениеводстве. 1973. ве тест-культуры используют пророст- ю 2. Патент США W 3376125, кл. 71-65, ки гречихи, определяют в 3-5-дневных 1968. динений и по увеличению последних
