Матрица для иммобилизации биологически активных веществ Советский патент 1981 года по МПК A61K9/70 

(54) МАТРИЦА ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

1

Изобретение относится к биохимии и иммунологии, а точнее к матрицам (носителям) для иммобилизации различных биологически активных веществ: белковых тел, например ферментов, антигенов , антител лекарственных препаратов, ингибиторов ферментов, и может быть использовано в медицине, биохимии, иммунологии, афинной хроматографии при лечении различного рода заболеваний, а также в производстве вакцинно-жсывороточных препаратов /для разработки тест-систем ранней диагностики различных заболеваний.

Текстурированные высокообъемные нити из синтетических полимеров применяются для изготовления различного ассортимента одежды 1.

Целью изобретения является расширение/ассортимента матриц для иммобилизации биологически активных веществ.

Эта цель достигается применением в качестве матриц для иммобилизации биологически активных веществ кс Плексных текстурированных высокообъемных нитей из синтетических полимеров.

Пример 1. Для эксперимента на плоскофанговой машине 10 класса изготавливаются три вида вязаного попотна: из капроновой мононити 5 тексх

X 2, из капроновой многофиламентной нит« 5 текс X 2 и из текстурированной высокообъемной нити 5 текс х 2. Полученные вязанные полотна тщательно отстирывают и затем гидролизуют в 3%-ной соляной кислоте. После отмывки дистиллированной водой и сушки на воздухе от каждого полотна отрезают по два образца весом 0,1 г, и все образцы вместе активируют глутаровым альдегидом. После активации тщательно отмывают дистиллированной водой. Затем активированные образцы (также все вместе) помещают в 1% - ный раствор трипсина в фосфатном буферном растворе, имеющим рН 6,75 и ставят для инкубации в холодильник () на 18 ч. Далее образцы вязаных материалов тщательно отмьшают фосфатным буферным раствором и определяют их протеолитическую активность. Субстратом служит 1%-ный раствор казеина в фосфатном буфере. Активность привитоо фермента оценивают по оптической длотности раствора, обработанного по общепринятым методикам нингидриftOM, Измерения проводят на фотоэлектроколориметре ФЭК - 56, толщина кюветы - 1 см. После выдерживания текстильных образцов в растворе казеина

в течение 2 ч их извлекают, раствор обрабатывают для измерения оптической плотйости, а извлеченные образцы после тщательной промывки буферным раствором снова помещают в свежий раствор казеина на 2 ч и эту опера- . цию повторяют в течение пяти раз.

В табл. 1 показана активность трипсина, иммобилизованного на капроновых сетеполотнах, изготовленных из, нитей 5 текс X 2 (средние данные из двух определений для каждого типа образца) Пример 2. На вязальной машине КОД вяжут три образца трубок: из капроновой мононити 1,67 текс х 3/ из капроновой многофиламентной. нити 1,67 текс X 3 и из текстурированной капроновой высокообъемной нити 1,67 текс X 3. Обработку и испытания полученных образцов трубок ведут аналогично примеру 1.

В табл. 2 представлена активность трипсина, иммобилизованного на капро,новых, трубках, изготовленных из нитей 1,67 текс X 3.

Как видно из представленных в табл. 1 и 2 результатов существенно более лучшим носителем для иммобилизации биологически активного белка (трипсина) служат текстильные материалы, полученные на основе текстурированной высокообъемной нити. Испытания капроновых матриц с привитым антигеном показывают, что 20 мл сыворотки полностью исчерпываются 3 г текстильного материала с привитым антигеном, изготовленным на основе текстурированной нити, и не происходит заметного исчерпания сыворотки, если в качестве матрицы используют материОптическая плотность раствора, Д,

Образец Полотно их текстурированной нити Полотно из многофиламентной нити Полотно из мононити

Контрольный раствор казеина 1

ал на основе многофиламентных или мононитей даже в случае добавления к ней 20 г такого материала. Для проверки поведения текстильных матриц с иммобилизованными ингибиторами ферментов в качестве сорбентов для афинной хроматографии изготовлены образцы на основе капроновых мононитей, многофиламентных нитей и текстурированных нитей с привитой на них Е;аминокапроновой кислотой. Образцы

испытываются на поглощение трипсина. Полученные результаты также подтверждают, что образцы, изготовленные на основе текстурированных нитей, значительно более активны в качестве биоспецифических сорбентов, чем образцы, изготовленные из многофиламен тных или мононитей..

При использовании других методов

.активации, в частности, гидразинолиза, получены аналогичные результаты при использовании синтетических полиэфирных нитей. Таким образом, полученные экспериментальные результаты указывают на то, что использование текстурированных нитей позволяет изготавливать существенно более активные матрицы для иммобилизации биологически активных препаратов. При|менение текстурированных высокообъем;ных нитей и изделия на их основе в качестве матриц для иммобилизации биологически активных препаратов прг воляет повысить активность носителя, а потому имеет определенные преимуiiiecTBa перед текстильными матрицами, изготовленными из сырья других типов Кроме этого, активность таких матриц является высокой.

Таблица 1 в опытах 0,75 0,43 0,32

0,01 0,00 0,01

0,01

0,00 0,86 0,67 0,71 0,69 0,49 0,46 0,39 0,37 0,20 0,35 0,35 0,25 Трубка из текстурированной нити Трубка из многофи0,82 ламентной нити 0,58 Трубка из мононити Контрольный раствор 0,00 казеина

Формула изобретения| Источники информации.

Применение комплексных текстуриро- . принятые во внимание при экспертизе ванных высокообъемных нитей из синтетических полимеров в качестве матрицыЗО Смирнов А.С. Технология трикодля иммобилизации биологически актив- ;Тажа из текстурированных нитей, м.,

n v n mn ТТог тгаст UU nwroTT-ttxcT 1Q7R Г- f и

ных веществ.

Таблица 2 1,10

Легкая индустрия, 1975, с. 68. 1,23 1,20 1,08 1,15 0,81 0,71 0,63 0,68 0,61 0,61 0,57 0,59 0,00 0,01 0,03 0,02