Приспособление для метки клеток Советский патент 1982 года по МПК G02B21/32 

( ПРИСПОСОБЛЕНИЕ ДЛЯ МЕТКИ КЛЕТОК

Изобретение относится к оптикомеханическому приборостроению, в час ности к технике биологических и меди цинских исследований, для приготовле ния электронномикроскопических препаратов путем изготовления тонких ер зов и может быть использовано для ме ханизированной отметки гравированием под контролем светового микроскопа прямоугольных рамок-меток вокруз свя занных с задачей исследования участков, например единичных клеток, по поверхности пластиковых препаратовзаготовок, выполненных в форме стандартных препаратов для световой микроскопии. В технике световой микроскопии биологических объектов, в частности в гистологии и цитологии, известны устройства для отметки областей препарата, к которым исследователь желает повторно вернуться. Эти устройства представляют собой имитирующий объектив микроскопа штырь, который ввинчивается как объектив в револьверную головку микроскопа и вбкруг которого вращается надетая на него и подпружиненная рубашка с алмазным резцом на торце, расположенным несколько в стороне от центра ее вращения. Обнаружив нужный участок под микроскопом, оператор замещает объектив путем поворота револьвера на устройство для отметки, приводит это устройство в соприкосновение с препаратом и, повернув рубашку упомяну- того устройства на 36О, гравирует обводную метку, которая благодаря люфту рубашки получается в виде несомкнутой круговой петли, охватывающей слишком большой участок препарата, чтобэ быть пригодной для целей электронномикроскопической техники СИ Недостатками известных устройств являются отсутствие визуального контроля в процессе нанесения метки, опасность нанести механическое повреждение на объект исследования во время вдавливания матрицы, высокая стоимост изготовления набора сменных матриц по форме (квадрат, прямоугольник, трапеция) и по величине охвата маркируемой площади объекта. Известно маркирующее устройство, действующее способом вдавливания печатающей матрицы в поверхность препарата. Печатающую матрицу выполняют как на торцах устройств, имитирующих объектив, так и на фронтальной поверх йости линзы объектива в виде алмазной пирамидки С23. п. Данное устройство позволяет выполнить отметку при визуальном контроле через микроскоп, однако отметка строится путем четырехкратного вдавливания отпечатков вокруг объектива таким образом, чтобы мыслимые линии, соединяющие противостоящие пары отпечатков, пересекались в центре объекта, т.е. отметка в этом случае является недостаточно точной. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является микроманипуляционное приспособлениеприставка к объективу светового микроскопа, которое имеет стяжной хомутик, укрепленный на корпусе объектива 20-кратного увеличения с рабочим расстоянием в 1, 4 - 1,8 мм, несущую стойку, закрепленную винтом в теле хомутика и опускающуюся вниз вдоль тела объектива, обойму-суппорт на ниж нем конце несущей стойки с двумя направляющими, между которыми перемещается под действием винта возвратнопоступательно в сторону оптической оси объектива выносная подпружиненная стальная пластинка с иглой-резцом на заостренном конце, впаянным под уг лом, превышающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронтальной линзой объектива и препаратом. Данное приспособление дает возможность изучать пре парат и выбирать нужные клетки при от носительно высоком увеличении (от 100 до 300 крат) в режиме фазового контраста с тонкой цитологической характе ристикой клеток, позволяет гравироват вокруг отмечаемого объекта прямоуголь ную обводную рамку, величина которой переменна и определяется величиной объекта и выполнять любые дополнитель ные отметки, например знаки, индивидуализирующие тип объекта, номер отметки и линии для коррекции последующей заточки пирамид ЗЗ. Недостатком известного приспособления является наличие жесткой связи по высоте между объективом и резцом, обусловленной неподвижностью несущей стойки в вертикальном направлении. Такое положение приводит к тому, что во время гравирования отметки, когда резец приводят в соприкосновение с поверхностью препарата путем вращения рукоятки тонкой наводки микроскопа на резкость, изображение отмечаемого объекта дефокусируется и размывается, что затрудняет точное выполнение метки. Цель изобретения - обеспечение резкого изображения отмечаемого объекта и повышение точности выполнения отметки. Поставленная цель достигается тем, что в приспособлении для отметки клеток стяжной хомутик, установленный на корпусе объектива микроскопа, выполнен с дополнительным посадочным местом, 8 котором установлен цилиндр гидравлического приводного устройства, подпружиненном на поршне которого снизу укреплена верхним концом несущая вертикальная стойка. На фиг. 1 изображено схематически боковое сечение приспособления для отметки клеток; на фиг. 2 - разрез А-А на фиг, 1; на фиг. 3 разрез Б-Б на фиг. 1; на фиг. k - боковое сечение гидравлического приводного устройства. Приспособление для метки клеток содержит стяжной хомутик 1, зафиксированный на микроскопном объективе 2 винтом 3, стягивающим посадочное место объектива, несущую стойку , укрепленную в теле упомянутого хомутика и опускающуюся вдоль корпуса объектива, суппорт 5 на нижнем конце несущей стойки, оснащенный двумя направляющими 6, между которыми перемещается под действием винта 7 возвратно-поступательно в горизонтальной плоскости в сторону оптической оси 8 объективная выносная подпружиненная пружиной 9 металлическая пластинка 1(Ь с резцом 11 на заостренном конце, установленным под углом, превращающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронтальной линзой объектива и препаратом.

В отяжнбм хомутике 1 во втором стяжном посадочном месте винтом 12 зафиксирован цилиндр 13 гидравлического привода рабочей камерой кверху, на подпружиненном пружиной 1 поршне 15 которого снизу укреплена верхни концом несущая стойка j, а гидравлическое приводное устройство с микрометрическим контролем подачи рабочей жидкости, соединенное с помощью гибкой пластиковой трубки 16 со штуцером 17 в верхнем торце цилиндра 13 гидравлического привода, помещено на. столе

рядом с микроскопом.

Гидравлическое приводное устройство содержит инъекционный медицинский шприц 18, прикрепленный сверху к массивной подставке 19, пружину 20 вокруг штока 21 шприца с упором ее в тыльный торец 22 цилиндра 23 и пуговку 24 под палец на штоке, а также микрометрическую винтовую головку 25 с остаточной и нониусной шкалами, укрепленную на подставке 19 таким образом, что при повороте рукоятки 2б микрометрической головки 25 по движению часовой -стрелки подвижный стержень 2/ микрометрической головки толкает шток 21 и поршень 28 шприца 18 вглубь цилиндра 23, и, наоборот, при вращении рукоятки 2б против движения часовой стрелки под действием пружины 20 шток 21 и поршень 28 шприца выдвигаются из глубины цилиндра 23.

Приспособление для меток клеток работает следующим образом.

Устанавливают под контролем светового микроскопа режущий кончик резца 11 в центре поля зрения, манипулируя винтом 7 на суппорте 5 и поворотом в посадочном месте после ослабления стяжки винтом 12 цилиндра 13 гидравли чешского привода. Поднимают суппорт 5 с помощью приводной рукоятки 26гидравлического приводного устройства в верхнее положение, при котором видно резкое изсбражение объекта, а резец 11 не касается поверхности препарата. Производят изучение препарата и поиск структуры, связанных с задачей исследования. Обнаружив нужную структуру, опускают с помощью упомянутой рукоятки 2б гидравлического приводного устройства суппорт 5 До прикосновения режущего кончика резца 11 с поверхностью препарата в том месте, где

должна быть сделена гравировкой первая линия обводной отметки, производят, манипулируя рукоятками для перемещения препаратовбдителя и подвижного стола предметного столика микроскопа, гравирование обводных линий метки вокруг объекта. По окончании первой метки рукояткой 2б гидравлического приводного устройства поднимают режущий кончик резца 11 над поверхностью препарата и выполняют описанным выше способом все последующие метки,

Т1редлагаемое приспособление для метки клеток обеспечивает выполнение гравирования отметки вокруг выбранного объекта исследования при резком (сфокусированном) его изображении. . Благодаря этому оператор может уверенно и быстро гравировать обводные линии отметки на расстоянии 0,5-1,0 мкм от границ объекта, в то время как известное устройство в условиях размытого (дефокусированного} изображения из-за опасности задеть режущим инструментом объект отметки позволяет производить ее на расстоянии 5 10 мкм, т.е. на порядок дальше.

Поскольку приспособление для меток клеток конструктивно сопряжено со световым микроскопом, как правило имеющимся в лабораториях электронной микроскопии биологического и медицин- , ского профилей, и может быть изготовлено в виде приставки к нему, то отпадает необходимость в разработке и выпуске промышленным путем специального автономного прибора для этой цели.

Формула изобретения

Приспособление для метки клеток, выполненное в виде установленного на корпусе объектива светового микроскопа стяжного хомутика с укрепленным в посадочном месте последнего объективом микроскопа и несущей вертикальной стойкой, снабженной суппортом с двумя направляющими, между которыми установлена с возможностью во- звратно-поступательного движения в горизонтальной плоскости выносная подпружиненная металлическая пластинка с резцом на заостренном конце, и установленным под углом, превьшающим 7 9 апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронталь ной линзой объектива и препаратом, отличающееся тем,- что, с целью получения резкого изображения отмечаемого объекта и повышения точности выполнения отметки, стяжной хомутик выполнен с дополнительным посадочным местом, в котором установлен цилиндр гидравлического привода, на подпружиненном поршне которого.снизу укреплена верхним своим концом несущая вертикальная стойка. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

73

:

fwyvy/s vvv :

V fS V

/5 73 1.Аппельт Г. Введение и методы микроскопического исследования. М., Медгиз, 1959. с. 303. 2.Авторское свидетельство СССР № . кл. G 02 В 21/32, 197. 3- Рейнгольд В.Н. Простое приспособление для метки клеток культур тканей и клеток толстых срезов тканей животного организма, залитых в полиметакрилате в форме плоскопараллельных пластинок. IV Всесоюзное совещание по электронной микроскопии. Суммы, 19бЗ, с. 107-t08 (прототип). S-S 4

фиг.З

фиг.