Изобретение относится к медицине, в частности к технике приготовления гистологических препаратов, используемлх в морфологических исследованиях в различных отраслях науки, и может быть также использовано в биологии и ветеринарии.
Известен способ приготовления гистологических препаратов путем фиксации и заключения в парафиновую среду 11.
Однако по известному способу приготовление препаратов длительное и многоэтапное наблюдается низкая проник аемость фиксатора в ткань, что приводит к деструктивным изменениям, связанным с аутолическими процессами, что качественно изменяет строение ткани.
Цель изобретения - сокращение времени приготовления препаратов.
Указанная цель .достигается тем, что в способе приготовления гистологических препаратов путем фиксгщии и заключения в парафиновую среду фиксацию ведут в растворе состава, вес.%:
Тиофансульфоксид 20-50
Этиловый спирт 96°76-46
в течение от 30 с до 3ч, причем после фиксации препараты непосредственно переносят в парафиновую среду.
Тиофансульфоксид и его спиртовые раствори хранят в темном месте при коьетатной температуре в сосуде с хорошо притертой пробкой. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы обеспечивают быструю и надежную фикtoсацию. Кусочки органов, размерами 0,5-1 см, фиксируют при экспозиции от 0,5 ч (30 мин) до 3-4 ч в 20%-ном спиртовом растворе тиофансульфоксида.
Эффективность фиксации зависит
ts от плотности и толщины объекта. При наличии кусочков более 2 см изменяют условия фиксации путем повышения концентрации тиофансульфоксида до 50%-ного или применения чистого
20 тиофансульфоксида, а также удлине- . нием времени фиксации (экспозиции) до 12-24 ч.
Тиофансульфоксид обезвоживает ткани, свертывает белки и уплотняет 25 объект, не вызывая резкого сжатия биологических структур. Тиофансульфоксид имеет преимущество перед широко npHMeHHeNbiM фиксатором (спирт) при фиксации рыхлых и отечных
30 тканей. После процесса фиксации кусочки органов переносят в смесь тиофансульфоксида, ксилола и парафина в разных частях. Кусочки в этой смеси в зависимости от их величины выдер1 - 3 ч при живают в термостате 21°С, затем переносят в следующую порцию смеси, состоящую из тиофансульфоксида и.ксилола по 25 ч и 50 ч парафина. Концентрацию парафин во второй смеем повышают и выдерживают в этой смеси в термостате при 37 1-3 ч. Из смеси тиофансульфоксида, ксилола и парафина материал переносят в расплавленный чистый парафин и выдерживсцот 1-2 ч в термостате при 54-56 с, а затем переносят во втору порцию чистого парафина также на 1-2 ч при 54-56 0. Пропитывание парафином завершают заливкой объекта в чистый расплавленный парафин в формочках и охлаждением в воде. После укрепления кусочков на деревянные блоки делают срезы на микротоме, которые после удаления пара фина окрашивают необходимыми краска ми соответственно поставленным зада чам (гематоксилин-зозин, Ван-1изон и др.) и заключают по известной методике в бальзам. Для фиксаций таких объектов, как рыхлая -соединительная ткань, наибол приемлемым является 50%-ный тиофансульфоксид на этиловом спирте. Тиофансульфоксид и его спиртовые растворы обеспечивают быструю фиксацию не вызывая существенного искгикения строения тканей и органов, что дае тиофансульфоксиду и его спиртовым растворам большие преимущества пер известными фиксаторами (разведения формсшина, этиловый спирт, жидкос Буэна). Тиофансульфоксид рекоменду ется как фиксатор при изготовлении обзорных препаратов и для более тонких исследований. Преимуществом тиофансульфоксида и его спиртовых растворов (20,30и 50%-ные) является то, что такая фиксация не требует последующей промывки в воде для его удаления и обезвоживания объекта перед уплотнением парафином путем проведения через спирты. Предлагае «лй способ обеспечивает сокращение времени при изготовлении гистологических препаратов, сокращение числа реактивов, через которые необходимо провести исследуемый объект. Ускоренная проводка уменьшает также время пребывания биологического объекта в реактивах, что повышает качественное сохранение структур, подвергающихся обработке. Сокращение многоэтапной проводки обеспечивает экономию реактивов, в частности этилового спирта, и рабочую силу. Используемый в предлагаемом способе фиксатор позволяет фиксировать любую ткань и кусочки органов, обеспечивая качественное изготовление препаратов для микроскопирования. Формула изобретения Способ приг-отовления гистологических препаратов путем фиксации и заключения в парафиновую среду, о тличающийся тем, что, с целью сокращения времени приготовления препаратов, фиксацию ведут в растворе состава, вес.%: Тиофансульфоксид20-50 Этиловый спирт 96° 76-46 в течение от 30 с до 3 ч, причем после фиксации препараты непосредствеино переносят в парафиновую среду. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., Иностранная литература , 1953, с. 62-67.
