Способ диагностики дизентерии Советский патент 1982 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине, а именно к способам диагностики состояния больного острой дизентерией после лечения.

Известен способ диагностики дизентерии путем исследования биологического материала 1.

Однако известный способ требует длительных сроков диагностики, так как ктериологическое исследование проводят через два дня после окончания лечения, причем окончательный результат исследования испражнений на наличие возбудителя может быть получен только через три дня после забора материала, а в случае первого отрицательного результата возникает необходимость повторных исследований еще, позднее, что приводит к перерыву в лечении, а следовательно, к снижению его эффективности, увеличению продолжительиости пре&ывания больных в стационаре на 5 и более дней, при зтом известен способ не обеспечивает необходимой точности диагностики, обусловленной низкой частотой высеваемости возбудителя дизентерии.

Цель изобретения - сокращение срока и повышение точности диагностики.

Указанная цель достигается тем, что при осуществлении способа диагностики дизентерии путем исследования биологического материала в крови определяют количество Т-лимфоцитов и по их концентрации диагностируют дизентерию .

Способ осуществляют следующим образом.

У больного берут 5 мл венозной крови

10 и выделяют лимфоциты путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 40 мин в градиенте плотности верографина (рН 7,35; плотность 1,077 г/мл). Взвесь лимфощггов дважды отмывают в 5 мл 0,9%-го

15 раствора хлористого натрия. К осадку отмытых клеток добавляют раствор Хенкса с таким расчетом, чтобы конечная концентгация составляла 0,9-1,110 клеток в 1 мл раствора.

20

Необходимое количество эритроцитов барана (0,2-0,5 мл) трижды отмывают 10 мл 0,9%го раствора хлористого натрия. Готовят 1,9-2,1%-ую взвесь эритроцитов барана в

0,9%-ок растворе хлортстого натрия, концентрацию клеток проверяют на фотоэлектроколориметре ФЭК-М по стандартному методу с использованием таблнц завнснмости гемолиза от процента эритроцитов. К взвеси лимфоцитов больного добавляют 1,9-2,1%-ую взвесь эритрофпов барабана в объемном соотношении 2:1. Полученную смесь клеток центрифугируют в течение 1-2 мин при 1000 об/мин. Затем осторожно взмучивают верхний слой осадка для перевода его в жидкую фазу ротащтей пробирки. На предметное стекло наносят 0,05 мл указанной смеси и с помощью светового микроскопа (увеличение 10x40) подсчитывают число Т-лимфоцитов путем определения числа розеток. За розетку считают Т-лимфоцит, фиксирующий на своей поверхности три и более эритроцитов барана. При количестве Т-лимфоцитов ниже 10% диагностируют выздоровление, а при наличии их выше 10% - продолжение течения болезни.

Пример 1. Больной К., 16 лет, диагноз: острая дизентерия Флекснера, тип 2а, среднётяжелая форма. Количество Т-лимфоцитов в крови больного до лечения составляло 17%. Больному проведен курс лечения фуразолидоном в течение 5 дней по 0,15 г 4 раза в день в сочетании с патогенетическо терапией: настойкой красавки, димедролом. Состояние больного после лечения о|1ределено предложенным методом по содержанию Т-лимфоцитов в крови и известными методами.- бактериологическим, клиническим. Так после лечеиия количество Т-лимфоцитов в крови больного составило 16%, что свидетельствовало о продолжении течения болезни. У больного сохранились еще клинические симптомы заболевания (боли в животе, дасфункция кишечника, болезненность при пальпации в Области сигмовидной кишки), при повторном бактериологическом обследовании был выделен возбудитель дизентерии. В связи с тем, что результаты бактериологического обследования стали известны только на шестой день после окончания лечения, повторный курс лечения дизентерийной вакциной В. А. Чертохвостовой в сочетании с канамшршом больному наз11 чеи с перерьшом в семь дней. После повторного курса лечеиия количество Т-лимфоцитов в крови больного составляло 13%, что свидетельствовало о продолжении течения болезни. В связи с тем, что обследование общеизвестными етрдами констатировало выздоровление, так как у больного отсутствовали клинические симптомы заболепакия и при двухкратном обследовании в испражнениях не был обнаружен возбудитель .| илентерии, то больной был выписан. Однако через 8 дней после окончания лечения при бактериологическом обледованин в амбулаторных условиях у больного был обнаружен возбудитель дизентерии и он был 5 госпитализирован для прохождения дальнейшего курса лечения. Следовательно, если бы диагностику состояния больного острой дизентерией после проведенных курсов лече. ния осуществляли предложенным способом 0 по количеству Т-лимфоцитов в крови, то не бьш бы допущен двухкратный перерыв в лечении больного, больной не был бы выписан из стационара с продолжающимся бактеривыделеннем.

5 Пример 2. Больной Д., 22 года, диагноз: острая дизентерия Флекснера, тип 2а, среднётяжелая форма. Количество Т-лимфоцитов в крови больного до лечения составляло 14%. Больному проведен курс речения

0 Фурззолидоном по 0,15 г 4 раза в день в течение пяти дней в сочетании с патогенетическими средствами: аскорбиновой кислотой, соляной кислотой с пепсином. Обследование больного после лечения осуществляли так

J же, как и в примере 1 предложенным способом - по количеству Т-лимфоцитов в крови и общеизвестными методами (клиническим, бактериологически). После лечения количество Т-лимфоцитов в крови составля ло 7%, что свидетельствовало о выздоровлении. Обследование общеизвестными методами, также подтвердило выздоровление, так у больного отсутствовали клинические симптомы заболевания и при двухкратном бактериологическом обследовании возбудитель не был обнаружен.

Пример 3. Больной М., 16 лет, диагноз: острая дизентерия Зоине тип 2, легкая форма. Количество Т-лимфоцитов в крови больного до лечения составляло 10%. Больному был проведен курс лечения канамицином по 250 тыс. еданиц 4 раза в сутки перррально в течение 5 дней в сочетании с патогенетический терапией: папаверином, соляной кислотой с пепсином. Обследование

больного после лечения осуществляли также, как и в примерах Ь и 2, предложенным : способом и общеизвестными методами (клиническим, бактерологическим). После лечеиия количество Т-лимфоцитов в крови состав0 ляло 16%, что свидетельствовало о продолжении течения болезни. При обследовании общеизвестными методами также у больного отмечено продолжение течения болезни, так как у больного после лечеиия еще сохрани5 лись клшшческие симптомы заболевания (отмечалась дисфункция кишечника, боли в животе, болезненность при пальпации в области сигмовидной кишки), в то же время

результаты бактериологического обследования были отрицательными.

Предложенный способ применен ари диагностике на 55 больных острой шоентерней. При этом установлено, что предложагаый способ позволяет сниэтъ срок диагности с 5 дней (известный способ), до 1 ч40мин2 ч, повысип) точность даагностики даже тогда, когда у невыздоровевших больных после лечения отсутствуют нли маловыражены клинические симшомл заболевания, а возбудитель дизентерии удается обнаружить лишь при многократном вроведении бактериологического обследования.

Формула изоб(Гетения Способ диагностики дизентерии путем исследования биологического материала, о т л ичающийся тем, что, с целью сокр1щения срока н повышения точности диагностики, в крови определяют количество Т-лимфоищов и по их концентрации диагностируют дизентерию.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Руководство по микробиолоппеекой диагностике инфекционных болезней. Под ред. К. И. Матвеева, М., Медицина, 1973, с. 162-170.