Стимулятор митоза Советский патент 1982 года по МПК A61K31/45 A61K31/85 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть ис пользовано в эксперименте на животных и изолированной культуре клеток для.стимуляции митоза. Известны средства для ускорения процессов восстановления тканей, такие как метацил, френолон, ретаболил, сиренар Cl. Однако известные средства стимулируют, в основном, только гипертрофию клеток резацированного и повреж денного органа. Целью изобретения является расшир ние ассортимента высокоэффективных стимуляторов митоза. Поставленная цель достигается применением в качестве стимулятора митоза эвгенола (1-окси-2-метокси-4аллилбензола)- известного компонента эфирного масла многолетнего полукустарникового растения рода Ocimum gratlssimum (базилика эвгенольного) семейства Zabiatal (губоцветных). Эвганол (1 -окси-2-метокси- -аллилбензол), полученный из эфирного масла базилика эвгенольного, желтоватая жидкость с запахом гвоздики, растворимая в спирте, эфире и других органических растворителях, ограниченно - в воде, химическая структура эвганола СИ27СН СН2 Т.пл. - 10,, т.кип. - 252,7°С, плотность 1,066 г/см ( Испытание острой токсичности эвгенола на белых мышах весом г показали, что доза, вызывающая гибель 50% животных (flljD Ри внутрибрюшинном введении, равна 353 мг/кг. Экспериментами установлено, что эвгенол может быть введен в организм различными путями: внутрибрюшинно, внутримышечно, перорально, ингаляционно, интратрахеально, подкожно, накожно (хорошо проникает внутрь через кожные покровы.. Применение эвгенола возможно в различных формах, например в виде водной эмульсии, спиртово го раствора, масляного раствора (мае ло какао и другие растительные масла , I Средство проверено в лабораторных условиях на культуре фибробластов. Для этого 8 среду 199, содержащую телячью сыворотку, добавляют водную эмульсию эвгенола в концентрации 0,550 мг/100 мл. При этом содержание всех указанныхингрёдиентов находится вследующих соотношениях: среда 199-80 мл, телячья сыворотка 20 мл, эвгенол 0,5-50 мг. Культуру клеток фибробластов легкого плода человека {посевная доза 15 000 клеток в 2 мл среды 199 с добавлением 20% сыворотки крупного г рогатого скота помещают в пробирки в асептических условиях. Пробирки устанавливают в наклонном положении и ставят в термостат при , Через 72 ч проводят микроскопический контроль монослоя фибробластов. 0, ную водную эмульсию эвгенола, приготовленную с помощью ультразвукового дезинтегратора, разводят до концентрации соответственно 0,5; 0,05; 0,005; 0,0005%. В опытные культуры клеток добавляют по О,1 мл эмульсии эвгенола указанных концентраций. Каждая концентрация эмульсии изучается на двух параллельных культурах фибробластов. В контрольные культуры добавляют по 0,1 мл физиологического раствора, в контрольные культуры - 0,01% гепарина. Во все опытнь1е и контрольные культуры клеток добавляют по 2 мкК и Н--тимидина и вновь инкубируют 18 ч в термостате. Через 18 ч культуры изучают в световом микроскопе,. затем сливают в среду, отмывают от несвязавшейся матки и готовят с счету импульсов на р-.счетчике. В таблице приведены результаты опытов.

Й87 855 0,0005 0,0005 Контроль 9 С гепарином С физиологическим раствором ИЗ

12

100

121,5121,5 196,5±23,5 Р 0,05 659,5t99,0 Р 0,05 11,5176,2 Р -0,001 t 19,0 Р 0,05 ,0 5 Полученные данные показывают,что ,0, эмульсия эвгенола способ ствует значительному повышению включения изотопа Н в клетки. Это свидетельствует о повышении интенсивност метаболической и митотической- активности клеток Гр 0,ООП. Аналогичные данные получают при изучеНИИ культур в световом микроскопе: количество клеток в поле зрения при добавлении в культуру 0kf6p66nacTOB 0,1 мл 0, эмульсии эвгенола в А-6 раз превышает аналогичные показатели в контрольных культурах. Приведеннь е данные показывают, что эвгенол является высокоэффективным стимулятором митоза Средство может использоваться для ускорения регенерации тканей при 2 проведении экспериментов, размножения культур клеток, необходимых для постановки опытов; получения данных для выявления скрытьЛх нарушений в генетическом аппарате клеток при их делении. Формула изобретения Применение эвгенола (1-скси-2-метокси-4-аллилбензола) в качестве сти мулятора митоза. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Полуденный Л.В., Сотник В.Ф., Хлапуев Е.Е. Эфирномасляничные и лекарственные растения. М., Колос, 1979, с. 32-33.