Питательная среда для выращивания дрожжей Советский патент 1982 года по МПК C12N1/16 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к питательным средам для выращивания дрожжей, содержащим отходы производства.

Известны питательные среды, использ:,емые для выращивания дрожжей, содержащие в качестве источника уг- . лерода, азота, минеральных солей н микроэлементов сточные воды производств, перерабатывающих сырье, например щелока, послеспиртовую барflVtlJ.-.

Однако использование сточных вод только пищевой промышленности сужает сырьевую базу для получения питательных сред.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту к предлагаемому является питательная среда для выращивания дрожжей, .содержащая отходы производства в качестве источника углерода, минеральных солей и микроэлементов, источник азота..

В известной питательной среде иэ отходов производства используют стоки мочки льна, а в качестве источника азота азотнокислый аммоний 0,11,0 об.% от объема стока 2.

Недостатком известного технического решения является низкое содержание белка в биомассе, состайляющее 51,2-61,4%.

Целью изобретения является увеличение содержания белка в биомассе дрожжей.

Поставленная цель достигаетсЙ тем, что в питательной среде для выращивания дрожжей, содержащей отходы производства в качестве источника углерода, минеральных солей и микроэлементов, источник азота, используют дополнительно ортофосфорную кислоту, тиамин, дестибиотин, хлористый кобальт, молибденовокислый натрий, хлористый калий, сернокислое железо, сернокислый марганец и сернокислую медь, при этом из отходов производства используют стоки промысловой обработки природного газа, а в качестве источника азота сернокислый аммоний при следую«ем соотношении компонентов, об.%«

Сернокислый

0,03-0,15

аммоний

Ортофосфорная

0,15-0,5

кислота 0,0001-0,0005

Тиамин 0,000001-0,000005,

Дестибиотин Хлористый ко0,000005-0,00002 бальт Молибденово0,00001-0,00005 кислый натрий 0,03-0,15 Хлористый калий Сернокислое 0,005-0,025 железо Сернокислый мар0,001-0,005 ганец Сернокислая 0,0001-0,0005 медь Стоки промысловой обработки Остальное природного газа В качестве исходного компонента для питательной среды используют ст ки промысловой обработки природных зов (около 2000 м в сутки), основной поток которых формируется из ст ков ; установки регенерации метанола площадки низкотемпературной сепарации газа, технологической насосной, склада хранения метанола ( на примере Оренбургского газо-конденсатного месторождения). Согласно существующей технологии в скважину при добыче газа закачива ется метанол для предотвращения гид

Компоненты сточных вод

Метанол Сероводород

Mg-i

Д ,л

а+

Zn

Я+

Fe

1+

Мп К стокам промысловой обработки родного газа добавляют ортофосфорную кислоту до рН 3,9-4,0, которая является источником фосфора, -серно лый аммоний, тиамин, дестибиотин, хлористый кобальт и молибденовокислый натрий, при этом указанные поненты взяты в следующем соотисние компонентов, об.%: Сернокислый 0,03-0,15 аммоний Ортофосфорная 0,10-0,50 кислота 0,0001-0,0005 Тиамин 0,000001-0,00000 Дестибиотин Хлористый ко0,000005-0,00002 бальт Молибденово0,00001-0,00005 кислый натрий

Количество, мг на 1 л стоков

20000-120000 5,0-20,0 300-460 100-200 0,2-1,0

1,0-5,0 2,3-8,4 ратообразования в магистральных газопроводах. Добытые газ и газовый углеводородный конденсат общим потоком поступают на установку комплексной подготовки, где в процессе низкотемпературной сепарации, исходный поток разделяется на три фазы; природный газ, нестабильный газовый конденсат и водно-метанольную смесь, представляющую собой конденсационную воду, пластовую воду и метанол. Указанная смесь при содержании в ней метанола свыше 40% поступает на установку регенерации, после которой регенерированный метанол возвращается для повторного использования в технологии , а потери метанола вместе с водой (кубовой остаток ) являются главным источником формирования стоков промысловой обработки природного газа. Основным загрязнителем в данном случае является метанол, содержание которого в сточных водах достигает 15%. Состав стоков промысловой обработки природного газа представлен в таблице. Стоки промысловой обработки природного газа -Остальное Кроме того, в питательную среду полнительно вводят источники микэлементов , например хлористый кай, сернокислое железо, сернокисй марганец, сернокислую медь до концентрации в питательной сре, об . % : 0,03-0,15 Хлористый калий Сернокислое желе0,005-0,025 зо Сернокислый мар.0,001-0,005 ганец Сернокислая медь0,00001-0,00005 Концентрация вносимых добавок

зависит от исходного количества меганола в среде.

Питательную среду засевают дрожжами, например Hansenula, и культивируют в аппарате повышенного массообмена.

Пример. К 20 л стоков промысловой обработки природного газа следунидего состава, мг на 1 л ; метанол 2000, сероводород 5, Mg 300 К 112, Zn 0,28, ,6, ,9, остальное вода, добавляют 20 мЛ ортофосфорной кислоты,6000 мг сернокислого аммония, 20 мг тиамина, 0,20 мг дестибиотина, 1 мг хлористого кобальта, 2 мг молибденовокислого натрия, бООО мг хлористого калия, 1000 сернокислого железа, 200 мг сернокислого марганца, 2 мг сернокислой меди.

Питательную среду засевают дрожжами Ransenula polymorpha ВНИИгенетика МЛ-6 и проводят непрерывное культивирование в аппарате интенсивного массообмена при температуре 36-38°С, скорости протока 0,5 л/ч скорости роста 0,05 ч, рН 3,9-4,0.

Выход дрожжей составляет 20 ,:025,0 г/л прессованной биомассы при содержании белка 55-58% и концентрация метанола в очищенных стоках на уровне следовых количеств.

Пример2. К20л стоков промысловой обработки природного газа следующего состава, мг на 1 л: метанол 60000, сероводород 15, , K- 130, ,6, Pel 3,0, ,%, остальное вода, добавляют 4,6 мл ортофосфорной кислоты, 18000 мг сернокислого аммония, 40 мг тиамина, 0,42 мг дестибистина, 2,4 мг хлористого кобальта, 6,4 мг молибденовокис лого натрия, 20000 мг хлористого калия , 2800 мг сернокислого железа, 500 кг сернокислого марганца, 5 мг сернокислой меди.

Питательную среду засевают дрожжами Hansenula polymorpha ВНИИгенетикамл-6 и проводят непрерывное культивирование в аппарате интенсивного массообмена при температуре 36-38°С, скорости протока 0,5 л/ч, (СКОРОСТИ роста 0,10 ч рН 3,9-4,0.

Выход дрожжей составляет 55,060,0 г/л прессованной биомассы при содержании белка 65-72% и концентргщия метанола в очищенных стоках на уровне следовых количеств. Пример 3, К 20 л стоков промысловой обработки природного газа следующего состава, мг на 1 л-, метанол 12000, сероводород 12, Mgl+328, ,. Zn2- 0,32, ,8, ,,35, остальное вода, добавляют 64 мл рртофосфорной кислоты., 36000 мг сернокислого аммония , 100 мг тиамина, t fi,6 мг дестибиотина, 5 мг хлористого кобальта, 10 мг молибденовокислого натрия, 30000 мг хлористого калия, 5000 мг сернокислого железа, 1000 мг сернокислого марганца, 10 м сернокислой меди. .

Питательную среду засевают дрожжами Hansenula polymorpha ВНИИгенетика МЛ-6 и проводят непрерывное культивирование в аппарате интенсивного массообмена при температуре 36-38°С, скорости протока 0,5 л/ч, скорости роста 0,15 ч, рН 3,94,0.

Вход дрожжей составляет 85,090,0 г/л прессованной биомассы при содержании белка 63-68% и концентрации метанола в очищенных стоках не более 0,01%.

Как следует из примеров, наилучший выход биомассы дрожжей с высоким содержанием белка дает питательная среда, содержащая 6-12% метанола.

Таким образом, предлагаемая питательная среда позволяет получить биомассу с содержанием белка на 6-11% выше, по сравнению с известной.

Кроме того, для получения предлагаемой нестабильной среды использованы стоки промысловой обработки природного газа которые образуются круглогодично и в настоящее время не находят применения, а подвергаются закачке в подземные горизонты (на примере стоков Оренбургского месторождения), что вызывает опасность загрязнения окружающей среды. Использование стоков промысловой обработки природных газов, решает задачу их очистки от метанола и снижения общего загрязнения, позволяет обеспечить стабильную сырьевую базу для выращивания микробной биомассы q высоким содержанием белка.

Формула изобретения

. о

Питательная среда для выращивани дрожжей, содержащая отходы производства в качестве источника углерода, минеральных солей и микроэлементов, источник азота, отличающаяся тем, что, с целью увеличения содержания белка в биомассе дрожжей, она дополнительно содержит ортофосфорную кислоту, тиaмиi., дестибиотин, хлористый кобальт, молибденовокислый натрий, хлористый калий, сернокислое железо, сернокислый марганец и сернокислую моль, при этом из отходов производства используют стоки промысловой ооработки при{эодного газа,а в качостве источника азота - сернокисл лй аммоний при следующем соотноиюнии компонентов. об.%

Сернокислый

аммоний0,03-0,1.5 952956 Ортофосфорная кислота 0,15-0,5 Тиамин 0,0001-0,0005 Дестибиотин0,000001-0,000005 Хлористый кобальт 0,000005-0,00002 Молибденовокислый натрий0,00001-0,00005 10 Хлористый калий0,03-0,15 Сернокислое железо 0,005-0,025 пр Бр пр J 8 Сернокислый 0,001-0,005 марганец Сернокислая 0,0001-0,0005 медь Стоки промысловрй обработки природного Остальное газа ИстЬчники информации, нятые во внимание при экспертизе 1, Андеркофлер Л,А.и Хиккей Дж. дильное производство. М,, пищемиздат, 1959, т.1, с.232-290. 2. Авторское свидетельство СССР 09763, кл. С 12 В 3/12, 1977.