Способ определения уробилинов в моче Советский патент 1982 года по МПК G01N33/72 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УРОБИЛИНОВ В МОЧЕ

Изобретение относится к медицине, в частности к анализу материалов химическими способами, и может быть использован в клинических и биохимических лабораториях. Известен способ определения уробилинов в моче путем добавления в пробу раствора Y -диметиламинобензальдегида в этаноле с последующей фотометрией ок рашенного комплекса ,1, Однако при определении известным способом количества уробилинов в моче, интенсивно окрашенной урохромами, продуктами обмена гемоглобина и другими пигментами, розовая окраска образукяце- гося хромогена подавляется и определение количества уробилинов невозможно. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Поставленная цепь достигается тем, что, согласно способу определения уробилинов в моче путем добавления в пробу раствора у- -диметиламинобензапьдегйда в этаноле с последующей фотометрией ок рашенного комплекса, в реакционную смесь дополнительно вносят водный раствор аскорбиновой кислоты до величины рН 3,23,5 и полученную смесь нагревают в кипящей водяной бане в течение 3-5 мин. Создаваемая аскорбиновой кислотой кислая реакция среды (рН 3,2-3,5) приводит к углублению {Розового цвета хромогена, образовавшегося в реакции между р-ДМБА и уробилинами, до красного. Нагревание в кипяшей водяной бане способствует дальнейшему углублению цвета до пурпурного, что позволяет определять количество уробилинов в моче, интенсив но окрашенной различными пигментами. При этом аскорбиновая киспота не вступает в реакцию с уробилинами и другими компонентами мочи. Способ осуществляют следующим образом. П р и м е р. 2 мл мочи, выдержанной при комнатной температуре около 2 ч (для превращения уробили ногенов в уробилины), смешивают с 0,1 мл 20%-ного 39S55 йодного раствора аскорбиновой кислоты и 0,1 МП 2%-ного раствора У -диметиламинобензапьдегида в йтанопе. Затем пробирку с реакционной смесью помещают в кипящую водяную баню на 3-5 мин. 5 После охлаждения на воздух до комнатной температуры в пробирку приливают 1,8 мл дистиллированной воды. Количество уробилинов определяют с помощью спектрофотометра СФ-4А на воп-.О Не 355 нм и калибровочного графика, поД-о Ю. А.

Темно-желтый

Оранжевый

Е-о Е. Н.

Темно-желтый

Оранжевый

Пурпурный с оранжевым оттенком

Пурпурный с оранжевым оттенкомS4 строенного по хроматографически гомоч генному уробилину, Результаты исследования представлёны в таблице, Как видно из таблицы, при определении уробилинов известным способом ро овый хромоген не улавливается в npo6ak, имеющих темную окраску, э то время ак при определении уробилинов предлагаек ым способом в этих же пробах хромоген лриобретает пурпурный цвет.