Способ получения иммунной сыворотки Советский патент 1983 года по МПК A61K39/395 

;о сд

со

к СП

СО Изобретение относится к области медицины, а именно к способам получения иммунных сывороток с высоким содержавшем специфических антител к микробным антиген 1М. Известен способ получения иммунной сыворотки путем иммунизации прс дуцентов специфическим антигеном с адьювантом с последующим забором крови и отделением целевого продукта flj . Однако при известном способе получают низкий титр специфических антител в иммунной сьгооротке. Целью изобретения является повышение тиура антител. Это дост сгается тем, что при осущест лении способа получения иммунной сыворотки, путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последующим забором крови и отделением целевого продукта, в качестве адъюванта используют сополимер акриловой кислоты и N -винилпирролидона. Способ осуществляют следующим образом. В способе получения иммунной сьторотки путем иммунизации продуцентов специф1«еским антигеном с адъювантом с последующим забором крови и отделением целевого продукта в качестве адьюванта используют сополимер акриловой кислоты п N -винилпирролидона. Сополимер содержит 45 мол.% звеньев акриловой кислоты и используется в виде 1-5%-ного водного раствора в дозах 100 и 5.0 мг/к Пример. Сополимер, акриловой кислоты и N -винилпирролидона получают методом радикальной сополцмеризации акриловой кислоты с N -Финилпирролидоном в растворе метанола в присутствии диального инициатора азодинитрилабисизомасляной кислоты (АДН) при . Смес 4,97 мл -винилпирродадона, 1,36 мл акриловой кислоты, 14,73 мл метилового спирта и 0,0254 г ДДН замораживают при температуре жидкого, азота в вакууме после чего доводят температуру до комнат ной. Эту операцию проводят несколько раз до достижения в системе остатэчного давления, равного 1110 мм ртутного столба (1,3310 гектопаскаля) и нагревают смесь 40 мин при 6 . Реакционную массу выливают в 600 мл диэтилового эфира и вьвделяют сополимер по известной методике. Выход сополимера 1,12 г, что составляет 17%. Состав сополимера определяют методами ЯМРспектроскопии и потенциометрического тт 9 592 рования. Сополимер содержит 45 мол.% звеньев акриловой кислоты и 55 мол.-% звеньев N -винилпирролидона. Молекулярная масса, оцененная по значению характеристической вязкости в 2н. КОН, составляет 1500ОО(5-12ООООО. Сополимер представляет собой белый порошок, хорошо растворимый в низших спиртах, воде, физиологическом растворе, в водных растворах щелочей. Сополимер практически нетоксичен и существенно стимулирует антителогенез при вакцинации столбнячным анатоксином и коклкн11но 1( вакциной. П р и м е р 2. Проводят изучение влияния сополимера акриловой кислоты и N -винилпирролидона на специфический антителогенез при вакцинации коклюшной вакциной собак (весом 15-20 кг), кроликоп (весом 2-2,5 кг) и крыс (весом 200-250 г).Pei tussis (коклюшную моновакцину серии Ко 305 Ташкентского НИИ вакцин и сьшороток МЗ СССР) вводят подкожно собакам в дозе 10 млд. клеток, кроликам и крысам - по 7 млд. клеток. Сразу после инъекции животным внутривенно вводят сополимер 4%-ной концентрации в водном растворе (собакам в дозе 100 мг/кг веса тела, кроликам и крысам - в дозе 5О мг/кг веса тела). Через 8 дней после иммунизации у животных производят забор крови, отделяют целевой продукт - сьторотку, в которой определяют наличие антител к использованным антигенам методом пассивкой гемагглютинацик по Бойдену. Примерз. Исследуют влияние сополимера акриловой кислоты и N -винилпирролидона на иммунный ответ при вакцинации столбнячным анатоксином собак (весом 15-20 кг), кроликов (весом 2-2,5 кг) и крыс (весом 200-250 г). Atiataxinum Ье1с1П1Сит(столбнячный анатоксин серии № 95 Ташкентского НИИ вакцин и сывороток МЗ СССР) вводят подкожно собакам в дозе 1О ЕС, кроликам - 5 ЕС и крысам - 3 ЕС. После введения столбнячного анатоксина животным подопытных групп внутривенно инъецируют сополимер в дозе 100 мг/кг веса тела собакам и в дозе 50 мг/кг веса тела кроликам и крысам. Через 8 дней после иммунизации у животных производят забор крови, отделяют целевой продукт - сьгооротку, в которой определяют наличие антител к использованным нам методом пассивной гемагглютинации по Бойдену. Полученные результаты показьшают, что введение сополимера животным всех

39537594

использованных видов существенно повы-у собак 12-кратно, у кроликов - в 256 шает продукцию антител при вакцинации.раз, у крыс - Ю-кратно. Так, при введении сополимера одновременно с иммунизацией столбнячным анатокси-Предложенный способ получения иммунном продукция антител по сравнению с 5ной сьторотки с использованием в качестконтролем (только вакцинация) повышает-ве адъюванта сополимера акриловой кисея у собак более чем в 20 раз, у кроли-поты, и N -винилпирролидона обеспечивает ков - в 4 раза, у крыс - в 20 раз. Вве-выраженную стимуляцию имк унного ответа дение сополимера вместе с коклюшнойк использованным микробным антигенам вакциной повьпиает титр антител по срав- 10и позволяет получать сыворотки с высонению с контролем (только вакцинация)кими титрами антител.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУННОЙ СЫВОРОТКИ путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последуюшим забором крови и отделением целевого продукта, о тличаюшийс я тем, что, с целью псиаышения титра антител, в качестве адьюванта используют сополимер акриловой кислоты и Н пирролидона.