Способ очистки ингибиторов протеиназ Советский патент 1982 года по МПК G01N33/50 

му выход активности равен ско рость протекания растворов 10 мл/ч. Пример 2. Процесс проводят по примеру 1, используя в качестве адсорбента метан рил а|;ушд, сополимериэованный с трипсином, ацилированным хлорангидридом метакриловой кислоты и диэфиром метакриловой кислоты и полиэтиленгликоля. Содержание иммоби лизованного трипсина составляет 7 мг/мл адсорбента. Через колонку при рН 8,5 пропускают 20 мл раствора, содержащего препарат ингибитора трипсина из поджелудочной железы быка с суммарной активностью 16,56 ИЕ и концентрацией белков 1,5 мг/мл. Злюцию проводят при рН 1/5. Получают 5,3 мг ингибитора с удельной активностью 28,45 ИЕ/мг. Исходная удельная активность составляет 5,52 ИЕ/мг. Скорость протекания всех растворов равна,20 мл/ч. Пример 3. Процесс проводят по примеру 1, используя в качестве адсорбента N-винилпирролидон, сополимеризованный с трипсином, аЦилированным хлорангидридом акриловой кислоты, и N, N -метиленбисакриламидом Содержание иммобилизованного трипсина составляет 15 мг/мл адсорбента. Через колонку при рН 8,2 пропускают 30 мл раствора овомукоида из куриного яйца с концентрацией белка 2 1ИГ/МП и удельной активностью 14,40 ИЕ/мг. Элюцию проводят при рН 2,5. Получают 15 мг ингибитора с удельной активностью 35,48 ИЕ/м Скорость протекания растворов составляет 30 мл/ч. Способ позволяет ускорить процесс очистки ингибиторов протеиназ в 2-3 раза иповысить степень очистки целевого продукта. Формула изобретения Способ очистки ингибиторов протеиназ путем адсорбции ингибитора на аффинном адсорбенте при рН 8,0-8,5 с последунвдей элюцией адсорбированного ингибитора солевым раствором при рН 1,5-2,5, о т л-И ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повЕлшения степени очистки целевого продукта, в качестве адсорбента используют гидрофильный мономер, выбранный из группы: акриламид, метакриламид или N-винилпирролидон, сополимеризованный с трипсином, ацилированным ангидридом или галоидангидридом акриловой или метакриловой кислоты, N, N-метиленбисакриламидом, диэфиром гликоля и акриловой или метакриловой кислоты. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Swart2 М.I,, MitchelI H.L., Сох O.I., Reeck G.R. Purification and characterization of a trypsin inhibitor from Opaque-2 Corn Seed.I.Biol.Chem, 1977, v.252,№22,p,8105 8107.