Способ замораживания спермы гусей Советский патент 1982 года по МПК A61D7/02 

(Б ) СПОСОБ ЗАМОРЛ;:(ИВАНИЯ СПЕРМЫ ГУСЕЙ

1

Изобретение относится к разведению сельскохозяйственных животных, а именно, к способам замораживания спермы гусей.

Известен способ замораживания спермы гусей, заключающийся в том, что сперму высокой активности разбавляют средой для замораживания в соотношении 1:1 и добавляют криопротектор этиленгликоль в количестве 10 в конечной концентрации. Раз бавление спермы и добавление этиленгликоля проводят при комнатной температуре. Затем ставят в холодильник при 2-k С на эквилибрацию, которая продолжается 1 ч. Сперму, подготовленную для. замораживания, набирают охлажденными пипетками и накапывают в виде гранул объемом 0,1-0,15 мл на поверхность фторопластовой пластины, предварительно охлажденной до. 60-75 С. Гранулы выдерживают на пластине в течение

20 с. За это время сперма охлаждается до 10-12 С. Далее пластину с гранулами опускают в пары азота на 1 мин, сперма охлаждается до 0r 50 С, затем гранулы опускают в жидкий азот. Оттаивание гранул производят в пенициллиновых флаконах в водяной бане при 70-75 С в течение 7-10 с. Оплодотворенность яиц гусынь to осемененных спермой, замороженной По указанному способу была в весенний период 78,5% а осенью k,У, Выводимость гусят от числа заложенных яиц была 64,2 и 30,5% COOTIS ветственно fl J.

Недостатками этого способа являют,ся сравнительно низкая оплодотворенность яиц и низкая выводимость гусят. Цель изобретения - повышение сох2 ,ранности биологической полноценности спермы после замораживания.

Поставленная цель достигается тем, что эквилибрацию спермы огуществляют в два этапа, вначале перед добавлением криопротектора в течение 20-30 мин, а затем после добавления криопротектора в течение 10-15 мин, причем накапывание спермы пpoвoдяt на фторопластовую пластину, имеющую температуру 18519СгС в течение 2-3 мин, а затем пл стину с гранулами помещают в жидкий азот на 1-2 мин. Пример. Сперму гусаков высокой активности разбавляют в соотвношении 1:3 одной из сред, предназначенных для замораживания, и ставят в холодильник, где поддерживается температура 2-4 С. Флаконы закрывают резиновой пробкой. Через 30 мин в охлажденную сперму добавляют охлажденный этиленгликоль или диметилсульфоксид в количестве конечной концентрации. Со держание флакона быстро перемешивают круговыми движениями и ставят в холодильник еще на 10 мин. После этого флакон вынимают из холодильника, определяют активность спермы после эквилибрации и, если активнос рпермы оказалась не ниже 4-5 баллов ее замораживают. Для этого сперму подготовленную к замораживанию наби рают в остуженную пипетку или шприц и накапывают по 0,1-0,15 мл на фтор пластовую пластину, предварительно охлажденную в жидком хладагенте до -196 t, а затем поднимают .пластину на уровень 1,5 см. Температура плас ны в начале накапывания должна быть -185 С, такую температуру она приобретает через 15 с, экспозиция пластины в этом положении должна €ы 2,5 мин, а скорость охлаждения 0,7 Затем пластину с гранулами погружают в жидкий азот, в котором она н ходится 1,5 мин, обеспечивая скорос охлаждения гранул 3,1°/с. После вых да пластины из азота гранулы собирают пинцетом, помещая их в пеницил линовый флакон, последний ставят в контейнер сосуда Дьюара, погружая в жидкий азот или другой жидкий хладагент. .Для искусственного осеменения гусынь флаконы с гранулами спер 9 мы достают из сосуда Дьюара и отогре вают в водяной бане, имеющей температуру. 40-80 С, периодически встряхивая сперму. Держат флаконы в воде до полного оттаивания гранул. Затем быстро оценивают активность спер мы и осеменяют гусынь. Результаты искусственного осемене ния гусынь спермой замороженно-оттаянной представлены в таблице, показывают, что искусственное осеменение гусынь спермой, замороженнооттаянной по предлагаемому способу, обеспечивает получение более высокой оплодотворенности яиц и выводимости гусят, чем при использовании спермыj замороженной по способу прототипа. Так,оплодотворенность яиц гусынь в первом случае была при использовании инозитол-глюкозной среды от 56,3 до 86,7, а вывод гусят ot числа яиц, заложенных на инкубацию,от 45,8 до 67,7 тогда как при использовании спермы, замороженной по способу-прототипу, оплодртворенность яиц была лишь.52,6-70,2, а выводимость от 38,3 до 44,9. Разница была достоверна по второму порогу, хотя опыты были проведены в сравнимых условиях на птицах-аналогах.. Научное и экономическое значение предлагаемого способа состоит в том, что он обеспечивает лучшую опло дотворенность яиц гусынь при использовании замороженно-оттаянной спермы чем ранее существовавшие способы. Консервация спермы гусей ставит селекционную работу на более высокий уровень, так как дает возможность длительного хранения спермы самцов улучшателей и тем самым позволяет использовать ее тогда, когда селекционеру она нужна. Кроме того, метод низкотемпературной консервации дает возможность сохранения гено фонда гусей локальных пород, которым грозит уничтожение из-за их неконкурентноспособности, но которые могут сыграть в дальнейшем большую роль в выведении новых пород и ли.ний. Формула изобретения Способ замораживания спермы гусей , включающий разбавление спермы добавление криопроектора, эквилибра цию, накапывание спермы на фя-оропластовую пластину для образования гранул и помещение гранул замороженной спермы в жидкий азот, о тличающийся тем, что. с целью повышений сохранности биологической полноценности спермы после замораживания, эквилибрацию спермы .осуществляют в два этапа, вначале Э8 перед добавлением криопротектора в течение 20-30 мин, а затем после добавления криопротектора в течение 10-15 мин, причем накапывание спермы проводят на фторопластовую пластину, имеющую температуру ISS-I O C, в течение 2-3 мин, а затем пластину с гранулами помещают в жидкий азот на 1-2 мин. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе. 1. Авторское свидетельство СССР № , кл. А 61 D 7/02, 1976.