Штамм бактерий рSеUDомоNаS aeRUGINoSa в-2197,используемый для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов Советский патент 1982 года по МПК C02F3/34 C12N1/20 C02F3/34 C02F101/10 C12N1/20 C12R1/385 C02F103/36 

39 вижны. Размножаются делением. Форма и величина клеток постоянны. Культуральные признаки. На твердых элективных родановых средах образует очень мелкие, прозрачные, круглые колонии. Подобные колонии вырастают на мясогпептонном агаре. Растут на питательных средах с промышленными сточными водами, содержащими роданиды. Биохимические признакио Не ферментируют лактозу, сахарозу, не образуют индол, выделяют сероводород. Не ферментируют маннит, мальтозу 2 Недостатками штамма являются низ кая интенсивность разложения роданидов в промышленных сточных водах (80 г/м сут), медленное развитие бактерий (5-6 сут) незначительный прирост биомассы и низкая удельная скорость роста бактерий. 1|елью изобретения является интен сификация процесса очистки промышленных сточных вод от роданидов более активными штаммами микроорганиз мов. Цель достигается исп9льзованием штамма Pseudomonas aeruginosa В-219 при очистке промышленных сточных вод, содержащих роданиды на биохимических установках коксохимических производств. Штамм отличается от известных св ими морфологическими, физиологическими и культуральными признаками, а также выраженной способностью окислять роданистые соединения в промыш ленных сточных водах химического и коксохимического производства. Штамм Pseudomonas aeruginosa В-2197 получен методом селективной адаптации на содержащих роданиды питательных средах, г: Вода водопроводная 1000 NH4CNS0,2-0, К4НР040,5 KHiPQ, . 0,5 MgS040,1-0,2 FeS04Следы с последующим скринингом наиболее активных и стабильных форм. Источником выделения штамма является сточная вода коксохимического производства. Итамм имеет следующую характеристику. Морфологические признаки. Палочк прямые с закругленными концами, размер 0,570, мкм. По методу Грама окрашиваются отрицательно. Спор не образуют, подвижны. Размножаются делением. Физиологические признаки. Аэробы и факультативные анаэробы, оптимальная температура роста 25-35С, максимальная , Культуральные свойства. На мясоп птонном агаре штамм образует колонии двух типов. первый диаметром 2-5 мкм, гладкие с блестящей поверхностью, выпуклые, сероватого цвета, ровным краем, полупрозрачные, второй диаметром 2-3 мм, вначале выпуклые, полупрозрачные, сероватого цвета, уплотненные с шероховатой поверхностью и неровными краями. Агар вокруг колоний чаще окрашивается. При высеве в пробирку с агаром Хоттингера вызывает позеленение верхней части столбика агара. Штамм приводит к помутнению мясо-пептонного бульона с последующим развитием слизистой пленки серовато-зеленого цвета. 1ленка при встряхивании с питательной средой не смешивается. На разведенном бульоне Хоттингера культура образует зеленый пигмент. На средеЛлоскирева растет в виде небольших (до 1,5 мм в диаметре) колоний, гладких, выпуклых,, блестящих, cepoBatoro цвета, прозрачных в проходящем свете. На содержащей роданиды синтетической плотной питательной среде образует мелкие, бесцветные колонии. Биохимические свойства. Ферментирует глюкозу в аэробных условиях и , не ферментирует при культивировании под слоем вазелинового масла, расщепляет ксилозу и галактозу, не разлагает лактозу, сахарозу, сорбит, не гидролизует крахмал. Утилизирует аргинин в аэробных и анаэробных условиях. Желатин разжижает через 9 ч. Молоко пептонизирует, не изменяя резко реакцию среды. Восстанавливает нитраты до азота. На среде Кларм а образует ацетилметизкарбинол (ацетоин), Проба на оксидазу положительная. Родамины разрушают на 90% в течение суток (при исходном его содержании 200 мг/л). Штамм депонирован во Всесоюзном научно-исследовательском институте генетики и селекции промышленных микроорганизмов и ему присвоен шифр i ЦНПМ-В-2197.

59

Культивирование в лабораторных условияхi Выделенный штамм сохраняю в лабораторных условиях на жидкой родановой среде, состава, гТ

Водопроводная

1000

вода 0,2-0,1

0,5

0,1-0,2

MgS04

Следы

FeSO /Для сохранения степени адаптации штамм содержат на плотной 2%-ной агаризованной и жидкой среде, приготовленной -на сточной воде из аэро тенка биохимической установки (содержание фенолов 1-3 мг/л, роданидов 200-250 мг/л, аммиак общий в пределах 2000 мг/л, летучий аммиак (NHj-N) 300-600 мг/л, связанный амг миак до 1500 мг/л).

Роданазная активность штамма поддерживается путем пересевов 1 раз

166

в мес. После инкубации в течение 2 м при 30 С лтамм хранят при комнатной температуре (или ) в темноте.

Пример использоадния штамма Pfeudomonas aeruginosa 8-2197 для обезроданивания промышленных сточных вод.

Роданазная активность штамма проверена на лабораторной установке со сточными водами коксохимических производств. Основные параметры бактериального обезроданивания промышленных сточных вод следующие: опгимальная температура процесса обезроданивания 28-30 С. рН 7,8-8,0. В результате испытаний, проведенных в ферментаторах периодического культивирования микроорганизмов, опреде.лены следующие периметры обезролзнивания, которые приведены в таблице.

Предлагаемый штамм интенсивнсГ развивается на родановых синтетических средах и МПА уже в первые сутки. Разрушает роданиды на 99,8 за 18 ч (при исходном их содержании 250 ). В динамике обезроданивания многократно изучались ферментативныессвойства штамма и существенных отклонений

от характеристик исходного штамма не отмечено. Периодическая культура штайма Pseudomonas aeruginosa В-2197 в процессе onHta исследована по следующим показателям: удельная скорость роста время удвоения биомассы и продолжительность различных фаз развития; 9 ,: 9 По сравнительно короткой лаг-фазе экспоненциальный период развития культуры наступает уже через 3-5 ч культивирования, .По исследованным па раметрам роста периодической культур предлагаемый штамм охарактеризован как быстрорастущий, „ Таким образом, штамм Pseudomonas aeruginosa В-2197 обеспечивает эффективное обезроданивание промышленных сточных вод характеризуется высокой (i сут) скоростью роста и стабильностью ферментативных свойств Штамм хранится в музеях живых культур микробов Кузнецкого филиала Восточного научно-исследовательского углехимического института и кафед ры миОэобиологии Новокузнецкого института усовершенствования врачей. 10 Формула изобретения Штамм бактерий Pseudomonas аагиginosa 8-2197 депонирован в Центральном музее промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика, регистрационный номер ЦМПИ В-2197, используемый для очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов. , Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. |утилина Н.Т. Микробиология. 1$1б1, 1ХХХ, вып., 2, с. . 2.Юровская Е.М. Бактерии, окисляющие роданиды в промышленных сточных водах, - Микробиологический журнал, т. 33, N 2, 1971, с. Ul-1i 5.