Способ фракционирования клеток дрожжей Советский патент 1982 года по МПК C12N1/00 

тактируют с пузырьками газа и выносятся ими в пенный слой. При этом на начальной стадии флотации, когда/ как установлено нашими исследованиями , с высокой скоростью флотируются неактивные, ослабленные клетки,поддерживают небольшой удельный расход газа в пределах от .1:1 до 3:1 объема воздуха на объем суспензии в минуту. Фракционирование при удельных расходах газа ниже 1:1 объема воздуха на объем суспензии в минуту нерационально, так как при этом намного увеличивается ёремя процесса разделения, которое в этом случае составляет от 40 до 70 мин. По мере выделения из популяции неактивных, ослабленных скорость выделения клеток снижается, при этом удельный расход воздуха увеличивают, доводя его до 10:1 объема воздуха на объем суспензии в минуту, обеспечивая пере ход в пену более активных клеток. На заключительной стадии процесса фракционирования скорость выделения клеток снижаегтся до нуля, так как в осветленной суспензии остаются наиболе активные жлетки. Повышение удельного расхода газа более 10:1 объема газа на объем суспензии в минуту приводит к нарушению гидродинамического режим процесса разделения и, следовательно к низкой степени фракционирования суспензии клеток. Наделенные фракции суспензии клеток микроорганизмов сравнивают по активности роста клеток путем оценки Распределение Ф15 акция (I ) вариантов клеток дрожжей по активности роста (единицы оптической плотности ) роставариантов, выделенных из попу-г ляции исследуемых фракций. Распределение ( % ) вариантов клеток в исследуелих поп Ляциях по активности роста, выраженной приростом биомассы в единицах оптической плот-ности за 24 ч культивирования в колбах на качалке, характеризуется активность роста популяций клеток из различных фракций суспензии микроорганизмов. Пример 1. Суспензию дрожжей Candida guI11 еrmondiI в количестве 0,25 л, полученную при пер юдическом культивировании и содержащую 4,0 5,0 г/л АСВ, помещают в ячейку, оборудованную устройством для отбора фракций пенного продукта ji дрожжевой суспензии. В качестве флотоЪгента используют воздух, который барботируют через мелкопористую перегородку 6 мин с изменяющимся удельным расходом воздуха причем в первые 2 мин удельный расход воздуха составляет от 1:1,. вторые 2 ютн - 3:1 и в третьи 2 мин - 10:1 объема воздуха на объем суспензии в минуту. Через первые 2 мин из объема суспензии отбирают фракцию пенного продукта, в последующие каждые 2 мин отбирают фракции осветленной суспензии в количестве 0,2 части от общего объема. В табл. 1 представлены результаты, полученные по сравнительной оценке активности роста клеток из различных фракций дрожжевой суспензии. Таблица

Таким образом получают фракции дрожжевых клеток, отличающиеся между собой по активности роста вариантов дрожжей. При этом наиболее активны клетки из фракции 3, которые показывают наибольшую скорость накопления биомассы.

Пример 2. Суспензию микроорганизмов Candida , содержащую 10-15 г/л. АСВ, полученную в непрерывном процессе, помещают во флотационную ячейку. В качестве флотоагента используют воздух, который пропускают через мелкопористую перегородку 10 мин с изменяющимся удельным расходом. Отбор 0,01 части сусрензии, содержащей клетки микроорга)1измов производят через промежутки Времени равные 0,5 мин: 0,5, 1,3 и 5. дин, при этом удельный расход воздуха составляет 1:1, 2:1, 4:1, 8:1, и 10:1 объема воздуха на объем суспензии в минуту соответственно. Всего в течение 10 мин получают 5 фракций, которые оценивают как и в примере 3 по активности роста.

Результаты эксперимента приведены в табл. 2. Фракция

973

О18

О14

О10

ОО

Из таблицы 2 видно, что наибольшую СКОРОСТЬ накопления биомассы показывают клетки из фракции 5.

Пример 3. Суспензию микроорганизмов Candida duill iermond iI, содержащую 25 - 30 г/л ACB помещают во флотационную ячейку,.В качестве флотоагента используют воздух, который пропускают через мелкопористую перегородку 20 мин -с изменяющимся удельным расходом. Отбор 0,05 части

Распределение (%) вариантов клеток дрожжей по активности роста (единицы оптической плотности )

Фракция

Из табл. 3 видно, что наибольшую, скорость накопления биомассы показывают клетки из фракции 5.

Таким образом, описанный способ обеспечивает фракционирование живых клеток, в частности при разделении популяции микроорганизмов удается в течение короткого времени без применения сложной аппаратуры получить до 5 фракций клеток различных по физиологическому состоянию.

4

О 5

52 38

10 8

35 38

12

суспензии, содержащей клетки микроорганизмов производят через промежутки времени равные 1,2,4,6 и 7 мин , при этом удельный расход воздуха составляет 1:1, 2:1, 4;1, 8:1 и 10:1 объема на объем суспензии в минуту соответственно. Полученные 5 фракций клеток дрожжей оценювают как в примерах 1 и 2 активности роста.

Результаты эксперимента приззедены в табл 3.

Таблица 3

Формула изобретения

Способ фракционирования клеток дрожжей, предусматривающий барботирование суспензии дрожжей газом и отбор пенного продукта, отличающийся- тем, что, с целью фракционирования живых клеток по физиологическому состоянию, удельный расход газа меняют через 0,5-7. мин в пределах от 1:1 до 10:1 объемов Распределение (% ) вариантов клеток дрожжей по активности роста (единицы оптической плотности ) 1,0-5,0 5,0-б,( Таблица2 5,0-7,0 7,0-8,0 8,0-9,0

7979503 8

газа на объём суспензии в минуту,1. Авторское свидетельство СССР

отбор пенного продукта осуществляют 372261, кл. С 12 N 1/00, 1971. перед изменением удельного расхода

газа, при этом объем отбираемой2. Калюжный М.Я. Сбраживание дрефракции пенного продукта составляет, весных гидролизатов и сульфитных.

0,01-0,2 от его полного объема. «еколов непрерывньши методами. Сб.

Источники информации,трудов. ВНИИГС, т. 16, М., Лесная

принятые во внимание при экспертизеiпромышленность, 1967, с. 213-216..