Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам определения пестицида трилана (4,5,6-трихлорбензоксазолона-2) в техническом продукте методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) получила большое развитие в 70-е годы и основана, как и тонкослойная хроматография, на различии в равновесном распределении компонентов смеси между двумя фазами, одна из которых - твердая, а другая - жидкая [1] . Определение осуществляют на жидкостном хроматографе; при этом пробу в виде раствора вводят в колонку, заполненную сорбентом, и разделение компонентов проводят в элюирующем потоке смеси растворителей. Регистрацию разделенных зон (пиков) осуществляют с помощью, например, УФ-детектора.
В качестве прототипа взят способ определения трилана с использованием хроматографического разделения в тонком слое основного вещества от примесей бензоксазолона-2, 6-хлорбензоксазолона-2, 4,6- и 5,6-дихлорбензоксазолона-2 [2] . Разделение проводят на пластине "силуфол" в смеси растворителей гексан-этилацетат при соотношении 2: 1. При этом проводят ступенчатое хроматографирование на 1/3, 1/2 и до конца пластинки.
В этом элюенте трилан имеет Rf (отношение длины пробега вещества к длине пробега растворителя) ≈ 0,46, 4,6- и 5,6-дихлорбензоксазолон-2 идут одним пятном с Rf ≈ 0,29; 6-хлорбензоксазолон-2 и бензокисазолон-2 меют близкие Rf соответственно 0,20 и 0,21.
Абсолютная ошибка при определении 75-90% -ного трилана не более ±5% .
Однако при переходе на метод ВЭЖХ с прямой фазой на основе силикагеля удовлетворительного разделения трилана и примесей в смеси растворителей гексан-этилацетат при соотношении 2: 1 получить не удается.
Предлагаемый способ определения 4,5,6-трихлорбензоксазолона-2 в техническом продукте заключается в хроматографическом разделении методом ВЭЖХ анализируемой пробы технического трилана. Разделение проводят на колонке с обращенной фазой на основе полиметакрилата в элюирующем потоке смеси растворителей метанол-вода-фосфорная кислота при объемном соотношении (68-72): (28-32): (0,1-0,2).
Регистрацию разделенных зон (пиков) осуществляют с помощью УФ-детектора при длине волны 210 нм. Массовую долю компонентов вычисляют методом внешнего стандарта по высотам пиков.
Абсолютная ошибка при определении 75-90% -ного трилана не более ±1,3% .
П р и м е р 1. Определение осуществляют на жидкостном хроматографе "Милихром - 1В". Используют колонку с обращенной фазой на основе полиметакрилата "Сепарон С-18". Предварительно готовят два градуировочных раствора эталонного образца трилана. Навеску 2-3 мг трилана помещают в мерную колбу емкостью 50 мл и растворяют в метаноле (растворы N 1 и 2). Аналогично готовят два раствора пробы технического трилана с навесками пробы массой 3-5 мг (растворы N 3 и 4).
Подготавливают колонку жидкостного хроматографа к анализу. Для этого через колонку пропускают элюент метанол-вода-фосфорная кислота (объемное соотношение 70: 30: 0,1) в течение 0,5 ч при скорости потока элюента 100 мкл/мин.
Затем проводят анализ в следующих условиях: скорость потока элюента, мкл/мин - 100, оптимальная длина волны детектора - 210 нм, диапазон чувствительности - 1,6 единиц оптической плотности, время интегрирования - 0,6 с, диапазон измерений самописца - 100, скорость диаграммной ленты - 180 мм/ч. С помощью инжектора вводят в хроматограф растворы трилана и пробы в следующем порядке: N 1, N 3, N 4, N 3 - и так еще 2 раза. Последовательность выхода компонентов и времена удерживания:
1) бензоксазолон-2 - 2 мин 23 с;
2) 6-хлорбензоксазолон-2 - 3 мин 20 с;
3) 4,5 и 5,6-дихлорбензоксазолон-2 - 4 мин 44 с;
4) трилан - 7 мин 46 с.
По полученным хроматограммам вначале вычисляют градуировочные коэффициенты для трилана по формуле К = m/h, где m - масса навески эталонного образца трилана, мг; h - высота пика эталонного образца трилана, мм. Затем вычисляют массовую долю трилана в пробе в % по формуле
X = 
где k - градуировочный коэффициент для определения трилана;
mi - масса навески i-й пробы технического трилана, мг;
hi - высота пика трилана в i-й пробе технического трилана, мм. Абсолютная ошибка при определении трилана не более ±1,3% , например, при анализе искусственной смеси, содержащей 89,4% трилана, найдено - (89,8 ± 1,3)% , n = 6, p = 0,95.
П р и м е р 2. Анализ проводят аналогично примеру 1, за исключением объемного соотношения компонентов элюента, которое составляет для смеси метанол-вода-фосфорная кислота 68: 32: 0,1.
П р и м е р 3. Анализ проводят аналогично примеру 1, используя элюент состава метанол-вода-фосфорная кислота в объемном соотношении 72: 28: 0,2. (56) 1. Стыскин Е. Л. и др. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография, М. : Химия, 1986.
2. Мясоедова А. С. и др. Сборник научных трудов ВНИИХСЗР, НИИТЭХИМ, вып. 9, 1979, с. 66-70.
Использование: изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам определения пестицида 4,5,6-трихлорбензоксазолона-2 (трилана) в техническом продукте методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Сущность изобретения: способ заключается в хроматографическом разделении методом ВЭЖХ анализируемой пробы технического трилана. Разделение проводят на колонке с обращенной фазой на основе полиметакрилата в элюирующем потоке смеси растворителей метанол - вода - фосфорная кислота при объемном соотношении (68 - 72) : (28 - 32) : (0,1 - 0,2).
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 4,5,6-ТРИХЛОРБЕНЗОКСАЗОЛОНА-2 В ТЕХНИЧЕСКОМ ПРОДУКТЕ путем хроматографического разделения и анализа компонентов пробы на неподвижной фазе с помощью органического элюента, отличающийся тем, что в качестве неподвижной фазы используют обращенную фазу на основе полиметакрилата и в качестве элюента используют смесь метанол - вода - фосфорная кислота при объемном соотношении (68 - 72) : (28 - 32) : (0,1 - 0,2).
