СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ГЕНЕЗА У ДЕТЕЙ Российский патент 1995 года по МПК G01N1/28 G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины, а именно аллергологии.

Аллергические заболевания, в основе патогенеза которых лежат 1 тип иммунопатологических реакций - гиперчувствительность немедленного типа - по Gell и Coombs (1962 г), в последнее время приобретают все большую распространенность. В связи с этим одной из важнейших задач является своевременная диагностика патологических состояний, связанных с атопическими реакциями.

Наибольшую иммунодиагностическую ценность приобрело определение иммуноглобулина Е (I₉E) в сыворотке крови больного, после того как было обнаружено, что реагиновые антитела (I₉E) являются пусковым механизмом аллергических заболеваний (К.Ishizaka, T.Ishizaka, 1967). Вместе с тем концентрация I₉E в сыворотке крови как здоровых, так и больных людей отличается высокой вариабельностью. У здоровых по всем показателям людей количество I₉E может варьировать от крайне низких (менее 7,5 МЕ) до очень высоких (более 1000 МЕ) значений. Более того, уровень сывороточного I₉E не во всех случаях соответствует концентрации этих антител на клетках мишенях (базофилах и тучных клетках). Вследствие этого часто встречаются больные, у которых имеются расхождения между уровнями I₉E антител в сыворотке и клинической манифестацией процесса. Есть также сообщения о том, что инициировать аллергические реакции могут и другие иммуноглобулины (С.Ксен, П.А.Уорд, Р. Т. Мак-Класки, 1983). Все это побуждает к поиску новых более углубленных методов диагностики аллергических заболеваний.

Исследования, направленные на изучение процессов, происходящих на клеточном уровне, проведенные в последние годы, показали, что при патологических состояниях, в частности атопиях, наблюдается изменение вязкости мембран клеток и, как следствие, нарушение процесса сборки рецепторов (Болдыров, 1987).

В связи с этим авторами предлагается новый способ диагностики аллергических заболеваний.

Цель изобретения - улучшение диагностики аллергических заболеваний на основе изучения процесса сборки иммуноглобулиновых рецепторов (I₉P) B-лимфоцитов.

Авторами было обследовано 13 здоровых новорожденных (пуповинная кровь), 8 детей с хроническими и острыми воспалительными заболеваниями, 2 детей с болезнью Русси-Леви, 20 детей с риноконъюнктивальными и смешанными формами поллинозов (в динамике), 20 - с синдромом мальабсорбции, 1 - с экзогенным аллергическим альвеолитом.

Иммунологическое обследование предусматривало определение I₉E, постановку аллергических проб (у больных поллинозами), изучение процесса сборки I₉P В-лимфоцитов, включающее регистрацию различных фазовых состояний рецепторов: "ринг" - равномерное свечение внешней оболочки клетки; "петч" - гранулярное свечение по всей внешней оболочке; "кэп" - свечение одного из полюсов клетки (с учетом особенностей - О-образный, грушеобразный кэп); "петч+эндоцитоз" - гранулярное свечение внешней оболочки с отдельными свечениями внутри клетки; "эндоцитоз" - светящиеся включения внутри клетки (цитоплазме) при отсутствии свечения внешней оболочки с последующим вычислением суммарного коэффициента (К). Коэффициент (К) отражает отношение максимального значения параметра "петч+эндоцитоз" к максимальным значениям остальных показателей состояния рецепторного аппарата клетки.

Установлено, что у здоровых детей коэффициент в среднем составил 18,6 ед. (14,0-26,5), в то время как у больных с аллергическими процессами его средние значения были равны 6,5 ед., не превышая 13 ед. Значения К у детей с воспалительными заболеваниями неаллергической природы не имели значений, отличных от К здоровых детей.

Клинический пример. Ребенок Д., 5 лет, история болезни N 3994/1990 г. поступил с жалобами на периодическое затруднение дефекации, сменяющееся недержанием кала. Диагноз при поступлении: синдром раздраженной кишки.

При объективном обследовании видимых отклонений со стороны кожных покровов, костно-мышечной системы, паренхиматозных органов не выявлено. Со стороны нервно-психического статуса наблюдалась незначительная расторможенность, возбудимость, навязчивость в поведении. Ребенок от переношенной беременности, родов путем "кесарева сечения". Рос и развивался удовлетворительно до трех лет, когда с мая - июня месяца появились признаки дизритмии кишечника.

Обследование ребенка продемонстрировало наличие зозинофилии периферической крови (до 9%), содержание I₉E в сыворотке крови составило 92 МЕ. Данные эзофагогастродуоденоеюноскопии в виде субатрофического гастродуоденоеюнита свидетельствовали об отсутствии выраженных морфологических изменений слизистой, характерных для мальабсорбции. По данным рентгенографического исследования черепа, эхо-энцефалоскопии установлено наличие небольшой внутричерепной гипертензии, укладывающейся вместе с поведенческими особенностями в синдром минимальной мозговой дисфункции, как следствие гипоксии в родах, однако не могущей явиться самостоятельной причиной возникновения столь выраженной дизритмии кишечника.

При исследовании процесса сборки I₉P B-лимфоцитов у данного ребенка выявлено резкое снижение суммарного коэффициента - 4,62. Эти данные побудили к дополнительному, более тщательному выяснению анамнеза, из которого было установлено, что первые признакии дизритмии кишечника у ребенка в трехлетнем возрасте сочетались с явлениями ринита и конъюнктивита. Мать ребенка страдает поллинозом, по линии отца какой-либо патологии выявить не удалось. Кроме того, были проведены аллергологические скарификационные пробы, которые показали у ребенка повышенную чувствительность к пыльцевым аллергенам березы, орешника, райграсса, ольхи.

В связи с этим, был сделан вывод об участии аллергического воспаления слизистой кишечника в реализации его дизритмии. Учитывая также четкую связь первичного возникновения симптоматики заболевания с периодом пыления релевантных аллергенов, был поставлен следующий диагноз: поллиноз, риноконъюнктивальная форма. Синдром раздраженной толстой кишки, как следствие минимальной мозговой дисфункции, реализованной на фоне аллергического колита.

Использование: медицина, аллергология, для диагностики заболеваний аллергического генеза. Цель изобретения - повышение точности способа. Сущность изобретения: исследуют процесс сборки иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов с помощью люминесцентных антиглобулиновых сывороток, регистрируют 5 фазовых состояний рецепторов клетки - " ринг ", "петч ", "кип", "петч + эндоцитоз ", "эндоцитоз " и вычисляют суммарный коэффициент. Коэффициент отражает отношение максимального значения основного параметра - " петч + эндоцитоз " - к максимальным значениям остальных параметров состояния рецепторного аппарата клетки. У здоровых детей коэффициент в среднем составил 18,6 ед, в то время как у больных с аллергическими процессами его среднее значение равно 6,5 ед, не превышая 13 ед. Способ показал четкую взаимосвязь протекающего в организме аллергического процесса и низких значений суммарного коэффициента. Его использование во всех случаях помогает установлению патогинеза заболевания, что способствует своевременному назначению адекватной терапии.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ГЕНЕЗА У ДЕТЕЙ, включающий исследование крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, исследуют процесс сборки иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов, при этом регистрируются фазовые состояния рецепторов, рассчитывают диагностический показатель, как отношение максимального значения показателя, характеризующего "петч + эндоцитоз" к максимальным значениям остальных показателей состояния рецепторного аппарата клетки и при его значениях ниже 13 единиц диагностируют заболевание аллергического генеза.