СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЛИЧИНЫ УСАДКИ ТКАНЕЙ ПРИ ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКЕ Российский патент 1996 года по МПК A61B10/00 

Описание патента на изобретение RU2070403C1

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, касается гистологической техники и может быть использовано в лабораторной практике при обработке гистологического материала.

Известен способ определения усадки ткани по уменьшению объема кусочка после этапа обработки материала: фиксации, дегидрации, заливки и окраски. При невозможности определения объема обрабатываемого кусочка, для расчета линейного, плоскостного и объемного коэффициентов усадки используют результаты линейных измерений до и после каждого этапа обработки (Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М. Медицина, 1990, с. 233 235).

Недостатками данного способа являются, во-первых, его многоступенчатость, что оказывает отрицательное влияние на качество обработки материала и повышает вероятность ошибки измерения, во-вторых, его использование возможно только для объектов доступных для макроскопического измерения, в-третьих, ограниченный диапазон определения усадки ткани только компактных органов (поджелудочная железа, печень, лимфоузлы и т.п.), в-четвертых, при его использовании не учитывается известный факт разной степени сжатия эпителиальной, соединительной, мышечной и нервной тканей. Все это приводит к значительным ограничениям применения данного метода (в доступной литературе имеются единичные факты его применения) и снижает его точность.

Технический эффект заключается в расширении диапазона морфологических исследований и повышении точности определения усадки тканей за счет исследования гистологических срезов только на конечном этапе.

Сущность заключается в том, что в способе определения величины усадки ткани при гистологической обработке путем иссечения ткани, фиксации, дегидратации, заливки и окраски, с последующим определением степени ее усадки, сравнивают линейные и поверхностные показатели двух гистологических срезов, один из которых получен по общепринятой методике, а второй в криостате и окрашен толуидиновым синим.

Пример. У телок в разные стадии полового цикла необходимо определить диаметр маточных желез и сравнить, в дальнейшем, эти данные с аналогичными показателями у новорожденных телят и коров. Количество материала и его размеры ограничены, т.к. он будет получен прижизненно с помощью биопсии.

Для этого определяли величину усадки тканей следующим образом. Часть биоптата фиксировали в жидком азоте, помещали в криостат при температуре 20-25oС, монтировали на блок-держатель и получали срезы. Последние помещали на предметное стекло, извлекали из криостата и окрашивали толуидиновым синим. С помощью окуляр-микрометра измеряли диаметр маточных желез. Получали следующие показатели 60 мкм, 65 мкм, 61 мкм, 63 мкм, 64 мкм, 61 мкм, 62 мкм, 64 мкм, 63 мкм, 62 мкм. Находили среднюю арифметическую, которая равнялась 62,5 мкм.

Вторую часть кусочка фиксировали в жидкости Карнуа (1 час), обезвоживали в 96o спирте (2 часа) и в абсолютном спирте (2 часа). Заливали в парафин по следующей схеме: спирт-хлороформ (2 часа), хлороформ (2 часа), хлороформ-парафин (2 часа при температуре 37oС), две порции парафина (по 1 часу при температуре 54oС). На микротоме получали срезы, наклеивали их на стекла и окрашивали гематоксилином-аозином (Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. М. Медицина, 1969, 423 с.). Измеряли диаметр маточных желез и получали ряд цифр: 53 мкм, 52 мкм, 54 мкм, 53 мкм, 54 мкм, 55 мкм, 52 мкм, 55 мкм, 53 мкм, 55 мкм. Находили среднюю арифметическую, которая была равна 53,6 мкм. Таким образом, линейный коэффициент усадки будет равен 62,5 мкм: 53,6 мкм 1,17.

В дальнейшем, материал от других животных, заливается в парафин так, как описано выше, и используется уже найденный коэффициент. Аналогичным образом можно рассчитать и другие коэффициенты (поверхностный, объемный, плотности расположения структур).

Величину поверхностного коэффициента усадки рассчитывают по формуле:
ПКУ П1:П2
где: П1 площадь структуры на криостатном срезе, П2 площадь структуры на срезе обработанным обычным способом.

Величину объемного коэффициента усадки определяют по линейному коэффициенту возведя его в куб:
ОКУ ЛКУ3
Коэффициент плотности расположения структур определяют по формуле:
КПС ПЛ1:ПЛ2
где: ПЛ1 плотность расположения структур в криостатном срезе, ПЛ2 - плотность расположения структур в срезе обработанном обычным образом.

В последующей работе не требуется каждый раз получать срезы на криостате, а используются уже полученные ранее коэффициенты, при условии, что проводится исследование аналогичного материала той же методикой.

По сравнению с известными решениями предлагаемый способ позволяет расширить диапазон морфологических исследований за счет возможности изучения любого органа и кусочков небольшого размера, а также сократить время и повысить точность определения усадки ткани за счет исследования гистологических срезов только на конечном этапе гистологической обработки.

Похожие патенты RU2070403C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ КОЖНЫХ РУБЦОВ 2002
  • Логвинов С.В.
  • Арий Е.Г.
RU2225041C1
СПОСОБ ГИСТОХИМИЧЕСКОГО ВЫЯВЛЕНИЯ МЕЛАТОНИНА 1996
  • Герасимов А.В.
  • Радченко Д.В.
RU2099706C1
Средство для фиксации легкого 1990
  • Добровольский Геннадий Александрович
SU1755102A1
СПОСОБ САНАЦИИ РАН ПРИ ОТКРЫТЫХ ПЕРЕЛОМАХ КОСТЕЙ ДИСТАЛЬНОЙ ЧАСТИ КОНЕЧНОСТЕЙ 1994
  • Атясов Н.И.
  • Болванович А.Е.
  • Беляков А.А.
RU2089119C1
СПОСОБ ПОСМЕРТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОТРАВЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ 2011
  • Породенко Валерий Анатольевич
  • Корхмазов Валерий Тамазович
  • Корхмазова Светлана Анатольевна
RU2461001C1
СПОСОБ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОГО ОКРАШИВАНИЯ КРИОСТАТНЫХ СРЕЗОВ ТКАНЕЙ В УСЛОВИЯХ ИНТРАОПЕРАЦИОННОЙ ДИАГНОСТИКИ 2009
  • Медведева Лариса Афанасьевна
  • Медведев Александр Владимирович
RU2419798C1
СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИЗОСОМНЫХ КАТИОННЫХ БЕЛКОВ ГРАНУЛОЦИТОВ И ДНК, РНК ЛИМФОЦИТОВ НА ОДНОМ ПРЕПАРАТЕ В ТКАНЯХ 2000
  • Пигаревский П.В.
  • Нагорнев В.А.
  • Загольская В.Н.
RU2180104C1
СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ОБРАЗЦОВ КОСТНОЙ ТКАНИ С ИМПЛАНТИРОВАННЫМ МЕТАЛЛОМ ДЛЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 2022
  • Сирак Сергей Владимирович
  • Сирак Екатерина Сергеевна
  • Перикова Мария Григорьевна
  • Сирак Алла Григорьевна
  • Дилекова Ольга Владимировна
  • Сирак Александр Сергеевич
  • Арутюнова Алина Павловна
  • Кобылкина Татьяна Леонидовна
  • Еникеев Амир Маратович
RU2797125C1
УПРАВЛЯЕМЫЙ ФОРМИРОВАТЕЛЬ ГАРМОНИК 1990
  • Кузьмичев Н.Д.
  • Славкин В.В.
RU2013857C1
Способ окраски нервной ткани на гистологическом препарате 1983
  • Хижняк Михаил Георгиевич
SU1273769A1

Реферат патента 1996 года СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЛИЧИНЫ УСАДКИ ТКАНЕЙ ПРИ ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКЕ

Использование: медицина и ветеринария. Сущность изобретения: для определения величины усадки ткани при гистологической обработке осуществляют иссечение ткани, фиксацию, дегидратацию, заливку и окраску, с последующим определением степени ее усадки. Сравнивают линейные и поверхностные показатели двух гистологических срезов, один из которых получен по общепринятой методике, а второй - в криостате и окрашен толуидиновым синим.

Формула изобретения RU 2 070 403 C1

Способ определения величины усадки ткани при гистологической обработке путем иссечения, фиксации, дегидратации и окраски ткани с последующим определением линейных и поверхностных показателей, отличающийся тем, что сравнивают линейные и поверхностные показатели двух гистологических срезов, один из которых получен по общепринятой методике, а второй в криостате и окрашен толуидиновым синим на стекле.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1996 года RU2070403C1

Меркулов Г.А
Курс патогистологической техники.- М.: Медицина, 1969, с.423
Автандилов Г.Г
Медицинская морфометрия.- М.: Медицина, 1990, с.233 - 235.

RU 2 070 403 C1

Авторы

Сковородин Е.Н.

Мартьянов В.В.

Даты

1996-12-20Публикация

1995-01-11Подача