ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРАЗОЛА ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ Российский патент 1997 года по МПК C07D231/08 C07D401/04 C07D401/06 C07D401/12 C07D403/06 C07D413/04 C07D417/04 A61K31/415 

Изобретение относится к биологически активным пиразолидинонам. Более конкретно, изобретение касается некоторых замещенных пиразолидинонов, которые связываются с рецепторами холецистокинина (ХЦК), например, рецепторами мозга и поджелудочной железы, а также с рецепторами гастрина, например, рецепторами желудка. Соединения являются антагонистами ХЦК и гастрина и находят применение в лечении и предотвращении ХЦК -гастрин опосредованных расстройств желудочно-кишечной, центральной нервной и аппетит-регуляторной систем теплокровных позвоночных, особенно, людей.

Холецистокинин (ХЦК) представляет собой невропептид, обнаруживаемый как в желудочно-кишечной ткани, так и в тканях центральной нервной системы. Полагают, что ХЦК играет важную роль в регуляции аппетита. Среди воздействий холецистокинина можно отметить стимуляцию перистальтики толстой кишки, стимуляцию сокращения желчного пузыря, стимуляцию секреции панкpеотических ферментов и ингибирование желудочного опорожнения. ХЦК осуществляет с допамином в некоторых нейронах среднего мозга и поэтому может также играть роль в функционировании допаминергических системах в мозге. Гастрин представляет собой невропептид, обнаруживаемый в основном в желудочно-кишечном тракте. Он является одним из главных стимуляторов секреции желудочной кислоты. Он также оказывает воздействие стимуляции роста на целый ряд желудочно-кишечных тканей.

Антагонисты ХЦК и гастрина пригодны при лечении и предупреждении ХЦК - гастрин-опосредованных расстройств желудочно-кишечной и центральной нервной систем, а также в модуляции аппетит-регуляторных систем теплокровных позвоночных. Полагают, что ХЦК (гастриновое рецепторное семейство содержит три субтипа рецепторов, для которых расположение pецептоpа-прототипа приведено в скобках: ХЦК-А (поджелудочная железа), ХЦК-В (мозг) и гастрин (дно желудка).

В литературе описаны несколько классов антагонистов ХЦК рецепторов. Один класс включает производные циклических нуклеотидов, например, дибутирил-циклический ГМФ (гуанозин 5' монофосфат). Другой признанный класс антагонистов ХЦК включает С концевые фрагменты и аналоги ХЦК. Другим классом рецепторных антагонистов ХЦК являются аминокислотные производные, включающие проглумид, производное глютарамовой кислоты, и N-ацилтриптофаны,такие как п-хлорбензоил-L-триптофан. Более свежие замещенные аминофениловые соединения описаны в качестве антагонистов ХЦК в опубликованной заявке на Европатент N 0166355. Ввиду широкого круга потенциальных клинических применений ХЦК - связующих соединений интенсивные научно-исследовательские работы осуществляются для определения других соединений, проявляющих свойства связывания с рецепторами ХЦК.

Изобретение направлено на разработку новых соединений пиразолидинона формулы 1, которые проявляют активность антагонистов ХЦК и гастрина. Эти соединения пригодны в лечении и предотвращении ХЦК опосредованных расстройств желудочно-кишечного и центральной нервной систем, а также в качестве модуляторов аппетит-регуляторных систем теплокровных позвоночных, особенно человека. В качестве антагонистов гастрина они особенно полезны в лечении и предотвращении желудочно-кишечных язв и новообразований желудочно-кишечного происхождения.

Изобретение касается соединений формулы:

где L означает С 0 или COR⁴ группу, --- означает необязательную связь, р целое число, равное 0 или 1, R и R¹ самостоятельно обозначают водород, С₁-C₆ алкил, фенил, бензил, нафтил, пиридил или замещенный фенил, имеющий 1, или 2 заместителя, выбранные из группы, состоящей из C₁-C₆ алкокси, гало, трифторметила, циано, карбамила, нитро, амино, -NH (C₁-C₄ алкила или бензила) и N(C₁-C₄ алкила)₂; R² обозначает водород, С₁-C₆ -- алкил, карбоксиметил, С₁-C₄ - алкоксикарбонилметил или группу формулы:

где t равно 1 или 0, А обозначает -СН₂-, -0-, NH- или N(С₁-C₆-алкил)- и Y обозначает фенил или замещенный фенил, как определено выше, R₄ обозначает С₁-C₆-алкил, карбоксиметил или С₁-C₄ алкоксикарбонилметил, R₃ обозначает водород или группу формулы:

где В обозначает 0 или S; Х обозначает галоид; m равно 0, 1 или 2; n равно 0 или 1; Q обозначает -NH-, N(С₁-C₆-алкил) -, -S- или -0-, и R⁵ обозначает группу формулы -/CH(R⁶)/q -(CH₂)_r R⁷, где R⁶ обозначает водород или С₁-C₆ алкил, q равно 0 или 2; r равно 0,1 или 2 и R⁷ обозначает водород, С₁-C₈ алкил, пентафторфенил, пиридил, тетрагидронафтил, индолил, хинолинил, фенил, нафтил или фенил, или нафтил, замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из (С₁-C₆) алкила, (С₁-C₆) алкокси, (С₁-C₆) алкилтио, галоида, трифторметила, фенила, фенокси, фенил (С₁-C₄) алкокси, (С₁-C₆) алканоила, нитро, (С₁-C₆) алкокси, карбонила, метилендиокси, (С₃-C₆ алкилена, амино, ди(С₁-C₄ алкамино, или группа Q_nR⁵ означает 2-тетра-гидроизохинолинил, а также их фармацевтически приемлемые соли, при условии, что, по крайней мере, одна из групп R или R¹ обозначает иное, нежели водород или С₁-C₆- алкил, и при другом условии, что по крайней мере, одна из групп R² и R³ обозначает иное, нежели водород, а когда R³ обозначает группу формулы -

тогда R² обозначает иное, нежели группу формулы

а также при условии, что когда L означает группу С 0, тогда р равно 1 и когда L означает группу COR⁴, тогда р равно 0 и. обозначает связь.

Таким образом, специалисту легко понять, что когда L представляет С 0, соединение формулы I будет иметь следующую структуру

и когда L представляет группу COR⁴, соединение формулы I будет иметь следующую структуру:

В соединениях формулы I группы R и R¹ могут находиться в любой цис- или транс-конфигурации относительно плоскости кольца пиразолидинона. Транс-конфигурация, предпочтительная в соответствии с изобретением, показана как термодинамически предпочтительная форма.

Используемый в описании термин гало относится к фтору, хлору или брому. Термин C₁-C₆ алкил включает как прямоцепочечный, так и разветвленный алкил и циклоалкил, и включает в себя метил, этил, пропил, циклопропил, изопропил, бутил, метилциклопропил, циклобутил, изобутил, трет-бутил, пентил, циклопентил, неопентил, гексил, циклогексил, 2-метил-пентил и так далее. В заместителях С₁-C₆ алкокси алкильная часть представляет собой описанный выше С₁-C₆ алкил.

Термин фармацевтически приемлемые соли охватывает те соли, которые образуют стандартными кислотно-основными реакциями с основными группами (такими, как аминогруппы) и кислотными группами, в частности, группами, в частности, группами карбоновых кислот, в отношении соединений формулы I. Так, фармацевтически приемлемые соли изобретения могут быть получены традиционными химическими способами из соединений формулы I, которые содержат основную или кислотную часть. Как правило, соли получают путем взаимодействия свободного основания или кислоты со стехиометрическим количеством или с избытком желаемой солеобразующей кислоты или основания в пригодном растворителе или в комбинации растворителей. Пригодные солеобразующие кислоты включают неорганические кислоты, такие как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, сульфаминовая, фосфорная, азотная и так далее, органические кислоты, такие как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, лимонная, яблочная, винная, аскорбиновая, памовая, малеиновая, оксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфокислота, метансульфокислота, этандисульфокислота, щавелевая, бензол-сульфокислота, пикриновая, коричная и аналогичные кислоты. Основаниями, которые находят применение для получения солей соединений формулы I, имеющих кислотную часть, являются гидроксиды щелочных или щелочно-земельных металлов, такие, как гидроксиды натрия, калия, лития, кальция или магния, аммиак или органические основания, такие, как бензиамин, дибензиламин, дибензилэтилендиамин, триэтиламин, триметиламин, пиперидин, пирролидин, 2-гидроксиэтиламин, бис (2-гидроксиэтил) амин, фенилэтилбензиламин и аналогичные органические амины.

Соединения изобретения связываются с рецепторами ХЦК и гастрина в мозговых и/или периферических сайтах, такие как поджелудочная железа, желчный пузырь, желудок и подвздошная кишка. Их способность антагонизировать ХЦК и гастрин делает эти соединения пригодными в качестве фармацевтических средств для лечения и предотвращения болезненных состояний, в которые могут быть вовлечены ХЦК и гастрин, например, желудочно-кишечных расстройств, таких как слизистый колит, язвы, избыточная панкреатическая или желудочная секреция, острый панкреатит, нарушения сократительной способности, новообразования желудочно-кишечного происхождения; нарушений центральной нервной системы, включающих взаимодействие ХЦК с допамином, таких как нейролептические расстройства, поздняя дискинезия, болезнь Паркинсона, психоз или синдром Жилль де ла Туретта, других нарушений центральной нервной системы, в которых причинным фактором является, как полагают ХЦК, таких как панические приступы и другие формы беспокойства, а также в модулировании аппетит-регуляторных систем.

Предпочтительными соединениями, связанными с рецепторами ХЦК и гастрина, в соответствии с изобретением являются пиразолидиноны формулы I, в которых L
группа С 0 и р равно 1 и особенно те, в которых R и R¹ находятся в трансконфигурации относительно плоскости кольца пиразолидинона. Предпочтительно, R и R¹ обозначают фенил и замещенный фенил. Предпочтительными группами указанных соединений являются те, в которых Z обозначает водород и R³ обозначает группу формулы:

Одним рядом таких предпочтительных соединений изобретения являются те соединения, в которых В обозначает серу, n равно 1, Q обозначает -NH и R⁵ обозначает фенил или замещенный фенил.

Другой предпочтительной группой соединений, проявляющих значительное связывание с рецепторами ХЦК и гастрина, являются соединения формулы I, в которых L- группа СО, р 1, Z обозначает водород и R³ обозначает часть, определенную группой -CONH / CH (R⁶)_q - (CH₂)_r R⁷. Особенно предпочтительными соединениями этой группы являются те, в которых q и r равны 0 и R⁷ обозначает фенил, замещенный фонил, 2-нафтил или 3-хинолинил, R и R¹ обозначает фенил, нафтил или замещенный фенил в транс-конфигурации относительно плоскости кольца пиразолидинона. Когда R⁷ означает замещенный фенил, предпочтительными заместителями являются гало, более конкретно, хлоро, бромо или иодо, трифторметил, С₁-C₄ алкил, С₃-C₄-алкилен, бензилокси и метилтио.

Соединения изобретения можно легко получить из соответствующих соединений формулы (III)

Промежуточные 3-пиразолидиноны легко получаются путем взаимодействия гидразина с соответствующими α,β-ненасыщенными сложными эфирами формулы R¹-CH C (R)-COOR', где R и R¹ имеют вышеприведенные значения и R¹ обозначает сложный эфиробразующую группу, обычно С₁-C₆-алкил. Соединения изобретения как правило получают ацилированием или алкилированием 3- пиразолидинонов формулы III при нейтральных или основных условиях с использованием ацилирующих или алкилирующих агентов, выбранных с целью получения искомых соединений изобретения.

В другом варианте изобретения раскрываются фармацевтические составы, содержащие в качестве активного компонента эффективное количество соединения формулы I, а также фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель. Такие составы могут быть получены для перорального или парентерального введения при лечении и предотвращения расстройств желудочно-кишечной, центральной нервной и аппетитной систем теплокровных беспозвоночных, особенно человека.

Для перорального введения антагониста ХЦК или гастрина выбранное соединение можно использовать, например, в форме таблеток или капсул, а также водного раствора или суспензии. В случае применения таблеток обычные наполнители включают связующие агенты, например, сироп, аравийскую камедь, желатину, сорбит, трагакант, поливинилпирролидин (Повидон), метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, сахарозу и крахмал, наполнители и носители, например, кукурузный крахмал, желатину, лактозу, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, каолин, маннит, дикальцийфосфат, хлорид натрия и альгиновую кислоту, смазывающие вещества, такие как стеарат магния, дезинтегранты, такие как кроскармелоза, микрокристаллическая целлюлоза, кукурузный крахмал, альгиновая кислота, а также пригодные увлажняющие средства, такие как лаурилсульфат. Для перорального введения в капсульной форме пригодные разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Если для перорального введения желательны водные суспензии, активный компонент можно объединять с эмульгирующими и суспендирующими средствами, например, сорбитом, метилцеллюлозой, глюкоза сахарным сиропом, желатиной, гидроксиэтилцеллюзой, карбоксиметилцеллюлозой, гелем алюминиевого стеарата или гидрогенизированными съедобными маслами, например, миндальным маслом, фракционированным кокосовым маслом, сложными маслянистыми эфирами, пропиленгликолем или этиловым спиртом, ароматизаторами, такими как мята перечная, масло грушанки, вишневый корригент и так далее, и консервантами, такими как метил или пропил п-гидроксибензоаты или аскорбиновая кислота.

Фармацевтические составы в соответствии с изобретением также могут составляться для парентерального введения. Такие составы обычно принимают форму стерильных изотонических растворов активного компонента в соответствии со стандартной технологией приготовления лекарственных средств.

Подходящая доза соединения изобретения для использования в качестве антагониста ХЦК или гастрина у людей будет варьироваться в зависимости от возраста, массы тела и реакции отдельного пациента, а также от сложности симптомов пациента и природы заболевания, подлежащего лечению. Так, предпочтительная суточная доза обычно определяется лечащим врачом. Однако в большинстве случаев эффективные суточные дозы соединений изобретения составляют от 0,05 дозы соединений изобретения составляют от 0,05 до 50 мг/кг, приблизительно, и предпочтительно около 0,5-20 мг/кг, в однократных или общих дозах.

Следующие примеры предназначены для дополнительного описания соединений изобретения и способов их получения. Тетрагидрофуран (ТГФ) сушат перегонкой из натрия/бензофенона. Реакции и стадии обработки осуществляют при комнатной температуре, если не указано что-либо иное. Растворители удаляют с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Хроматографию осуществляют на обычно-фазовых колонках кремнезема. Титрования осуществляют с использованием 2:1 ДМФ Н₂O в качестве растворителя.

Пример 1.

1-(4-Хлоро-3-трифторметилфенил) аминокарбонил/-4,5- дифенил-3-пиразолидинон (Способ А).

4,5 Дифенил-3-пиралидинон (3,00 г, 12,6 ммоль) растворяют в 40 мл ТГФ под азотом, после чего в течение 2 мин прибавляют раствор 4-хлоро-3-трифторметилфенилизоцианата (2,87 г, 13,0 моль, 1,03 экв) в 10 мл ТГФ. Через 2,3 ч растворитель удаляют в вакууме и остаток порошкуют с использованием 25 мл толуола. Полученное твердое тело измельчают, дважды промываюттолуолом и сушат в вакууме при 65^oС с получением 4,94 г. (85%) твердого тела белого цвета.

¹Н ЯМР (d₆ ДМСО) d 3,81 (шир.с, 1Н), 5,56 (шир. с, 1Н), 7,26 7,50 (м, 1ОН), 7,62 (д, J 9 Гц, 1Н), 7,89 (дд, J 3,9 Гц, 1Н) 8,13 (шир. с, 1Н), 9,64 (шир.с, 1Н), 10,90 (шир.с, 1Н); масс-спектры (МС) 460 (М+1⁺).

Анализ для С₂₃H₁₇СlF₃ N₃O₂:
Вычислено, С 60,07; Н 3,73; N 9,14.

Найдено, С 59,99; Н 36,60; N 8,89.

Пример 2.

1-/(4-N, N-Диметиламинофенил) аминокарбонил / 4,5 дифенил 3 - пиразолидинон (Способ В).

4-N, N- Диметиламиноанилин (2,00 г, 14,68 ммоль) и триэтиламин (3,63 г, 35,87 ммоль, 244 экв. ) растворяют в 50 мл толуола под азотом, после чего прибавляют трифосген (1,45 г, 4,89 ммоль, 0,333 экв), в виде чистого твердого тела. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 2,5 ч, охлаждают, затем быстро фильтруют, собранные твердые тела промывают дважды толуолом и объединенные фильтраты упаривают в вакууме с получением неочищенного 4 -N, N диметиламинофенил -изоцианата в виде 2,57 г коричневого масла, которое повторно растворяют в 50 мл ТГФ с последующим прибавлением раствора 4,5 - дифенил -3-пиразолидинона (3,50 г, 14,69 ммоль, 1,00 экв.) в 50 мл ТГФ в течение 3 мин. Через 20,7 ч растворитель упаривают в вакууме и продукт выделяют хроматографией (препаративная ВЭЖХ, 0-50% градиента Еt ОАс толуол) в виде 1,73 г желтого масла, которое медленно кристаллизуется. Перекристаллизация из толуола приводит к получению 744 мг (13%) белого кристаллического твердого тела.

¹Н-ЯМР (d₆ ДМСО) 2,84 (с, 6Н), 3,71 (с, 1Н), 5,55 (с, 1Н), 6,67 (д, J 8 Гц, 2Н), 7,12 7,52 (м, 12Н), 8,86 (шир. с. 1Н), 10,70, (шир. с. 1Н) МС 400 (М⁺; рК_a титрования 4,0, 7,9.

Анализ для С₂₄H₂₄N₄O₂:
Вычислено, С 71,98; Н 6,04; N 13,99;
Найдено, C 72,08; Н 6,06; N 14,06.

Пример 3.

1-/(4-Бензилоксифенил) аминокарбонил/- 4,5 дифенил-3-пиразолидинон (Способ С).

4-Бензилоксибензойную кислоту (2,0 г, 8,8 ммоль) суспендируют в 50 мл толуола с оксалилхлоридом (5 мл) и нагревают до температуры перегонки в течение 15 мин. Растворитель удаляют в вакууме, остаток повторно растворяют в 30 мл ацетона и водный раствор Na N₃ (1,16 г, 17,6 ммоль, 2,0 экв.) в 10 мл Н₂О прибавляют по каплям с наружным охлаждением с помощью водяной бани. Смесь перемешивают в течение 1 ч, разбавляют водой, дважды экстрагируют толуолом, после чего объединенные экстракты промывают водой и сушат в присутствии сульфата натрия. Этот раствор ацилазида обрабатывают 4,5- дифенил-3-пиразолидиноном (1,6 г, 6,8 ммоль, 0,76 экв.), нагревают в течение 30 мин. После ночного перемешивания при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме и продукт выделяют хроматографией (0 30% градиент ЕtОА гексан) в виде 1,6 г (52%) белого твердого тела, температура плавления 127 - 130^oС.

¹Н ЯМР(СDCl₃) d 3,95 (д, J 6 Гц, 1Н), 5,0 (с, 2Н), 5,55(д, J 6 Гц, 1Н), 6,8 (д, J 10 Гц, 2Н), 6,86 7,46 (м, 10Н), 7,05 (д, J 10 Гц, 2Н) 8,95 (с, 1Н); МС 463 (М⁺); рК_a титрования 7,7.

Анализ для C₂₉H₂₅N₃O₃:
Вычислено, С 75,14; Н 5,44; N 9,07;
Найдено, С 75,15; H 5,49; N 9,14.

Пример 4.

1-/(2-/1,2,3,4 Тетрагидронафтил) /аминокарбонил/ 4,5 дифенил 3 - пиразолидинон (Способ D).

1,2,3,4- Тетрагидро-2-нафтойную кислоту (639 мг, 3,63 ммоль) растворяют в 80 мл бензола под азотом, азеотропно сушат путем перегонки небольшой части растворителя, затем прибавляют дифенилфосфорилазид (1,12 г, 4,08 ммоль, 1,1 экв.) и Et₃N (0,41 г, 4,02 ммоль, 1,1 экв.) и полученную смесь нагревают при обратном охлаждении в течение 1 ч. Растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в сухом ТГД под азотом, после чего прибавляют 4,5-дифенил-3-пиразолидинон (784 мг, 3,29 ммоль, 0,91 экв.) и смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель удаляют в вакууме и продукт выделяют хроматографией (25 50% градиент EtOAc: гексан) в виде 0,92 г. (68%) белой пены. Перекристаллизация пробы 120 мг из i- Pr₂: i-PrOH позволяет получить 94 кг белого твердого тела, содержащего смесь 1:1 двух диастереомеров при ЯМР, температура плавления 82-95^o.

¹Н-ЯМР (СDCl₃) 1,46 1,66 (м, 1Н), 1,79 1,97 (м, 1Н), 2,30 2,84 (м, 2Н), 2,95 (кажущийся триплет дуплета, J 6,16 Гц, 1Н), 3,87 (кажущийся д, J 6 Гц, 1Н), 4,09 (м, 1Н), 5,12 (м, 1Н), 5,34 (кажущийся дуплет дуплета, J 6,14 Гц, 1Н), 6,86 7,40 (м, 14Н), 9,0 (оч.шир. с. 1Н); МС 411 (М⁺).

Анализ для С₂₆H₂₅N₃O₂:
Вычислено, С 75,89; H 6,12; N 10,21;
Найдено, C 75,75; Н 6,32; N 9,72.

Пример 5.

1-/(3-Трифторметилбензоил/ 4,5 дифенил-3-пиразолидинон (Способ Е).

Раствор 4,5-дифенил-3-пиразолидинона (2,0 г, 8,4 ммоль) в 50 мл СН₂Cl₂ и 5 мл пиридина обрабатывают по каплям раствором 3-трифторметилбензоилхлорида (1,4 г, 8,4 ммоль) в 25 мл СН₂Сl₂ и перемешивают в течение ночи. Смесь нагревают 1 н. раствором НСl, сушат в присутствии сульфата натрия, упаривают и продукт выделяют хроматографией (препаративная ВЭЖХ) в виде 840 мг 24) пены фиолетового цвета.

¹Н-ЯМР (СDCl₃)d 3,83 (с, 1Н), 5,16 (с, 1Н), 7,2 7,64 (м, 15Н); МС 410 (M⁺; рК_a титрования 7,15.

Анализ для С₂₃H₁₇F₃N₂O₂:
Вычислено, С 67,31; Н 4,18; N 6,83;
Найдено, С 67,52; Н 4,16; N 6,66.

Пример 6.

1-(4-Хлорфенил) оксикарбонил/- 4,5 дифенил-3-пиразолидинон (Способ F).

Раствор 4,5 дифенил-3-пиразолидинона 1,25 г, 5,26 ммоль) в 50 мл СНСl₃ обрабатывают раствором 4-хлорфенилхлорформиата (1,0 г, 5,26 ммоль) в 10 мл CHC₃ и перемешивают в течение ночи. Растворитель удаляют в вакууме и остаток перекристаллизовывают из EtOAc: гексана с получением 1,6 г (58%) твердого тела белого цвета, температура плавления 175 177^oС.

¹Н-ЯМР (СDCl₃)d 3,93 (д, j 6 Гц, 1Н), 5,62 (д, J 6 Гц, 1Н), 6,8 7,5 (м, 15Н); МС 392 (M⁺; рК_a титрования 7,8.

Анализ для С₂₂H₁₇ClN₂O₃:
Вычислено, С 67,26; Н 4,36; N 7,13;
Найдено, С 67,49; Н 4,54; N 7,17.

Пример 7.

1-/(3,4-Дихлорбензил) аминокарбонил/-4,5-дифенил-3-пиразолидинон (Способ М).

Раствор 1-/(4-нитрофенил) оксакарбонил/-4,5-дифенил-3-пиразолидинона (1,00 г, 2,48 ммоль) и 3,4 -дихлорбензиламина (5 мл) в 50 мл абсолютного EtOH нагревают до температуры перегонки в течение 8 ч. Растворитель удаляют в вакууме, остаток берут в СН₂Cl₂, промывают дважды 1 н. раствором НСl и один раз буферным раствором, рН 7,0 и сушат в присутствии сульфата натрия. После удаления растворителя в вакууме продукт очищают хроматографией (0-35% градиент ЕtOAc: гексан) с получением 250 мг (23%) твердого тела.

¹Н-ЯМР (CD Cl₃) d 3,93 (д, j 6 Гц, 1Н), 4,28 (дАВ кв, J 7,15 (JAB) Гц, ^Dv= 48 Гц, 2Н), 5,50 (д, J 6 Гц, 1Н), 6,56 (шир. т. J 7 Гц, 1Н), 6,92 7,44 (м, 13Н), 8,73 (шир.с. 1Н); МС 439 (M⁺); рК_a титрования 8,4.

Анализ для С₂₃H₁₉Cl₂N₃O₂:
Вычислено, С 62,74; Н 4,35; N 9,54;
Найдено, С 62,49; Н 4,53; N 9,25.

Пример 8.

2-/(4-Хлоро-3-трифторметилфенил) аминокарбонил/ 4,5 - дифенил-3-пиразолидинон (Способ N)
1-/(4-Хлоро-3-трифторметилфенил) аминокарбонил/ 4,5 - дифенил-3-пиразолидинон (2,00 г, 4,35 ммоль) в 100 мл толуола, нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч. После удаления растворителя в вакууме продукт выделяют хроматографией (СН₂Cl₂), затем перекристаллизовывают из i-Pr₂O: гексан с получением 300 мг (15) твердого тела белого цвета, температура плавления 72 74^oС.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ 4,22 (д, j 12 Гц, 1Н), 4,82 (дд, j 9,12 Гц, 1Н), 5,44 (д, j 9 Гц, 1Н), 7,20 (м, 2Н), 7,32 7,42 (м, 8Н), 7,46 (д, j 9 Гц, 1Н), 7,72 (дд, j 3,9 Гц, 1Н), 7,87 (д, J 3 Гц, 1Н), 10,56 (шир. с. 1Н); МС 459 (М⁺.

Анализ для С₂₃H₁₇Cl F₃N₃O₂:
Вычислено, С 60,07; Н 3,73; N 9,14;
Найдено, С 59,95; Н 3,92; N 8,88.

Пример 9.

1-/6-Хлоро-2-бензотиазолил/-4,5-дифенил-3 пиразолидинон (Способ 0).

Реакцию осуществляют в атмосфере сухого азота. Суспензию 4,5- дифенил-3-пиразолидинона (1,19 г, 5,00 ммоль) в 35 мл толуола обрабатывают 0,40 г NaH (60% в минеральном масле; содержание гидрида 0,24 г, 10,0 ммоль, 2,00 экв. ) и смесь перемешивают при 45^oС в течение 2 ч. Прибавляют 2,6 - дихлорбензотиазол (1,02 г, 5,00 ммоль, 1,00 экв) и перемешивание продолжают при 80^oС в течение 20 ч. После охлаждения реакционную смесь вливают в 30 мл охлажденного на льду 5 н. раствора НСl, экстрагируют ЕtOAc и выделенную органическую фазу дважды промывают солевым раствором, сушат в присутствии сульфата натрия и растворитель упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из Еt₂O: гексан с получением 1,46 г (72%) кристаллов желтовато-коричневого цвета, температура плавления 170,5 - 172,5^oС.

¹Н-ЯМР (СD Cl₃) d 4,07 (шир. д. J 6 Гц, 1Н), 5,24 (шир. д. J 6 Гц, 1Н), 7,16 7,58 (м, 14Н); МС 405 (М⁺; рК_a титрования 6,6.

Анализ для С₂₂H₁₆ClN₃OS:
Вычислено, С 65,10; Н 3,97; N 10,35;
Найдено, С 64,85; Н 4,13; N 10,12.

Пример 10.

1-/(4-Аминофенил) аминокарбонил/-4,5-дифенил-2-пиразолидинон
1-/(4-Нитрофенил) аминокарбонил/-4,5-дифенил-3-пиразолидинон (500 мг, 1,24 ммоль) растворяют в 50 мл EtOH и гидрогенизируют 5 палладированным углем (500 мг) под давлением водорода 60 фунтов/ кв.дюйм (4,219 кг/см²) в течение ночи при комнатной температуре. Смесь фильтруют для удаления катализатора, растворитель удаляют в вакууме и продукт выделяют хроматографией (0-50% градиент EtOAc: гексана) в виде 125 кг (27%) твердого тела.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) d 3,97 (д, J 6 Гц, 1Н), 5,50 (д, J 6 Гц, 1Н), 6,58 (д, J 10 Гц, 2Н), 6,58 (д, J 10 Гц, 2Н), 6,96 (д, J 10 Гц, 2Н), 7,2 7,5 (м, 10Н); МС 372 (М⁺); рК_a титрования 4,5, 8,1.

Анализ для С₂₂H₂₀N₄O₂:
Вычислено, СН 70,95; Н 5,41; N 15,04;
Найдено, С 70,65; Н 5,42; N 14,75.

Пример 11.

1-/(4-Бромфенил)аминокарбоил/2-(0-трет-бутилкарбоксиметил)-4,5-дифенил-3-пиразолидинон и 1-/(4-бромфенил)-аминокарбонил/3-(0-трет-бутилкарбоксиметилокси)-4,5-дифенил-2-пиразолин.

К суспензии 1-/(4-бромфенил) аминокарбонил/- 4,5-дифенил-3-пиразолидинона (2,0 г, 4,6 ммоль) в 30 мл абсолютного EtOН прибавляют раствор КОН (1,1 экв. ) в абсолютном EtOH и трет-бутилбромацетата (5 мл). После перемешивания в течение 3 дн. появляется осадок КBr. Смесь разбавляют водой, экстрагируют Et₂O, затем слой Et₂O промывают водой и солевым раствором, сушат в присутствии сульфата натрия и упаривают в вакууме. Неразделяемую смесь двух продуктов выделяют хроматографией (0-25% градиент EtOAc: гексан) в виде 1,3 г (52% ) пены, содержащей отношение 3:2 N-алкилированных к 0-алкилированным продуктам (первый и второй указанный в заголовке продукт, соответственно).

¹Н-ЯМР (CDCl₃)N-алкилированный: d 1,53 (с. 96), 3,96 (д, J 19 Гц, 1Н), 4,06 (с. 1Н), 4,65 (д. J 10 Гц, 1Н), 5,95 (с, 1Н), 7,23 - 7,46 (м, 14Н), 9.70 (с, 1Н), 0 алкилированный: d 1,53 (с, 9Н), 4,18 (д. J 7 Гц, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 5,40 (д, J 7 Гц, 1Н), 7,23 7,46 (м, 14Н), 7,74 (с, 1Н); МС 549, 551 (М⁺ для Br изотопов).

Анализ для С₂₈H₂₈BrN₃O₄:
Вычислено, С 61,10; Н 5,13; N 7,63;
Найдено, С 60,94; Н 4,93; N 7,85.

Пример 12.

1-/(4-Бромфенил) аминокарбонил /2-карбоксиметил/-4,5 -дифенил-3-пиразолидинони 1-/4-бромофенил) аминокарбонил/-3-карбоксиметил - 4,5 дифенил-2-пиразолин
Региоизомерную смесь сложных трет-бутиловых эфиров из примера 11 /смесь 3: 2 N- к 0-алкилированным/ (500 мг, 0,91 ммоль) растворяют в 30 мл СН₂Cl₂ и 5 мл трифторуксусной кислоты. Через 4 ч проведения тонкослойной хроматографии (СН₂Cl₂) происходит исчезновение исходных веществ. Растворитель удаляют в вакууме и смесь двух продуктов выделяют хроматографией (0-100% градиент Et OAc: гексан) в виде 180 мг (40%) пены, содержащей отношение 4:3 N-алкилированных к 0-алкилированным соединениям /первое и второе соединения, соответственно, указанные в заголовке/ при проведении ЯМР.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) N-алкилированный: d 4,09 (д, J 2 Гц, 1Н), 4,10 (д, J 19 Гц, 1Н), 4,68 (д, J 19 Гц, 1Н), 5,83 (д, J 2 Гц, 1Н), 7,20 7,50 (м, 14Н), 9,08 (с, 1Н); 0 алкилированный: d 4,19 (д, J 5 Гц, 1Н), 4,83 (АВ кв, J 16 Гц, ^Dv 30 Гц, 2Н), 5,46 (д, J 5 Гц, 1Н), 7,20-7,50 (м, 14Н) 7,75 (с, 1Н), МС 493, 495 (М⁺) для Br изотопов); рК_a титрования 4,8.

Анализ для С₂₄H₂₀BrN₃O₄:
Вычислено, С 58,3; Н 4,08; N 8,50; Найдено, С 58,59; Н 4,03; N 8,24.

N- и 0 алкилированные продукты разделяют хроматографией на общефазовой колонке Уотерс С₁₈ с использованием смеси 30 40% СН₃CN: Н₂O, забуференной с применением 0,3 0,5% NH₄O А.с. Ведущие фракции из первого погона упаривают, лиофилизуют, затем берут в СН₂Cl₂, промывают дважды 1 н. раствором НСl, после чего растворитель удаляют в вакууме с после чего растворитель удаляют в вакууме с получением 28 мг. 0-алкилированного продукта:
¹Н-ЯМР (CDCl₃): δ 4,19 (д, J 7 Гц, 1Н), 4,84 (АВкв, J 17 Гц, ^Dv 25 Гц, 2Н), 5,45 (д, J 7 Гц, 1Н), 6,39 (шир. с, 1Н), 7,20 - 7,40 (м, 14Н), 7,70 (с. 1Н).

Последние фракции дважды перехроматографируют, затем перерабатывают аналогичным образом с получением 8 мг алкилированного продукта:
¹Н-ЯМР (CDCl₃): δ CDCl₃ 4,05 (с, 1Н), 4,08 (шир. д, J 18 Гц, 1Н), 4,70 (шир. д, J 18 Гц, 1Н), 5,82 (с, 1Н), 7,21 7,50 (м, 14Н), 9,0 (шир. С, 1Н).

Пример 13.

1-/(4-Трифторметилфенил) аминокарбонил/-3-метокси- 4,5 - дифенил-2-пиразолин
Раствор 1/(4-трифторметилфенил) аминокарбонил/ -4,5 -дифенил-3-пиразолидинона (740 мг, 1,74 ммоль) и КОН (122 мг, 88% чистота, 1,1 экв.) в 30 мл абсолютного EtOH обрабатывают йодометаном (5 мл) и перемешивают в течение ночи. Смесь разбавляют водой, дважды экстрагируют СН₂Cl₂ и объединенные экстракты промывают водой, сушат в присутствии сульфата натрия и упаривают в вакууме. Продукт выделяют хроматографией (0 15% градиент EtOAc: гексан) в виде 61 мг (8%) твердого тела.

¹Н-ЯМР (CDCl₃): d 4,0 (с, 3Н), 4,11 (д, J 6 Гц, 1Н), 5,48 (д, J 6 Гц, 1Н), 7,2-7,74 м. (м, 14Н), 8,09 (с, 1Н) МС 439 (М⁺.

Также выделяют 1-/(4-трифторметилфенил) аминокарбонил/-2 метил-4,5-дифенил-3-пиразолидинон соответственно продукту, полученному способом примера 1, из 2-метил-4,5-дифенил-3-пиразолидинона и 4-трифторметилфенилизоцианата.

Пример 14.

1-(Индол-2-карбонил)-4,5-дифенил-3-пиразолидинон
Индол-2-карбоновую кислоту (1,35 г, 8,38 ммоль) оксалил-хлорид (4 мл) и ДМФ (3 капли) прибавляют в данном порядке к 50 мл толуола и перемешивают до выделения газа и получения гомогенного раствора (20 мин). Растворитель удаляют в вакууме, остаток берут в СH₂Cl₂ и прибавляют к раствору 4,5 - дифенил-3-пиразолидинона (2,0 г, 8,40 ммоль, 1,00 экв.) в 50 мл СH₂Cl₂ и 5 мл пиридина. После перемешивания в течение ночи раствор промывают в 1 н. раствором НСl, сушат в присутствии сульфата натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаточное твердое тело перемешивают с СH₂Cl₂, фильтруют и перекристаллизовывают из ДМФ: Н₂O с получением 1,42 г (44%) твердого тела белого цвета, температура плавления 248-250^oС.

¹Н-ЯМР (d₆ ДМСО): d 3,82 (с, 1Н), 5,86 (с, 1Н), 6,95 - 7,6 (м, 10Н), 11,84 (шир. с. 1Н), МС 381 (M⁺); рК_a титрования 6,75.

Анализ для С₂₄H₁₉N₃O₂:
Вычислено, С 75,57; Н 5,02; N 11,02; Найдено, С 75,38; Н 5,21; N 10,99.

Примеры 15 135 суммированы ниже в табл. 1. Соединение каждого примера идентифицируют со ссылкой на структурную формулу, предвосхищающую каждую группу примеров. Способ получения каждого соединения указан с отсылкой на способы А 0, которые приведены в вышеописанных примерах 1 9. Фенильные группы на кольце пиразолидонона соединений примеров 1 67 и 74 109 находятся в транс-положении.

Примечание к таблицам:
а) включает другие способы очистки такие как хроматография (chrom), порошкование и преципитация, как указано. Если даны растворители, соединение очищали перекристаллизацией из этих растворителей. Для других способов очистки используемые растворители указаны в круглых скобках;
b) после перекристаллизации из EtOAc: гексана;
с) очищено экстракцией в 1н. раствор NaOH с последующим подкислением 1н. раствором СНl и экстракцией в органический растворитель (Et₂O или ЕtOAc). Упаривание растворителя позволяет получить материал, гомогенный при ТСХ и имеющий удовлетворительную чистоту;
d) получено с использованием S-(-)-a-метилбензилиизоцианата;
e) все приведенные картины расщепления т.е. которые очевидны после визуального рассмотрения графика, и отражают комбинацию истинных протонпротонных магнитных связей, а также мультиплетность, благодаря наличию смеси двух диастереомеров;
f) получено с использованием R-(+)-a-метилбензилизоцианата;
g) получено с использованием (±-4-бромо-a-метилбензилизоцианата;
h) получено с использованием (R)-(-)-1-(1-нафтил)-этилизоцианата.

Пример 138.

1-[2(2-нафтил) аминотиокарбонил]-4,5-дифенил-3-пиразолидинон(Способ G).

2-Аминонафталин (2,95 г, 20,6 ммоль) растворяют в 230 мл СНСl₃ в атмосфере азота. Добавляют триэтиламин 11,5 мл, 8,35 г, 82,5 ммоль, 4,00 экв.) и смесь охлаждают на ледяной бане. Добавляют тиофосген (3,30 мл, 43,3 ммоль, 2 экв. ), растворенный в 90 мл СНCl₃, медленно в течение ч. Перемешивание продолжают в течение 2 ч при комнатной температуре, затем смесь разделяют на водную (Н₂O) и органическую (CHCl₃) фазы. Органическую фазу отделяют, промывают водой и два раза 1 н, НСl, затем пропускают по каплям через Na₂SO₄ для удаления воды и выпаривают в вакууме с получением 4,29 г.

(> 100%) коричневого масла, которое затвердело. ЯМР показывает желаемый 2-нафтилизотиоцианат и примеси, ¹Н ЯМР (CDCl₃) 7,30 7,85 (м, 7Н).

4,5 Дифенил-3-пиразолидинон (1,00 г, 4,20 ммоль) растворяют в 10 мл ТГФ в атмосфере азота и добавляют раствор сырого 2-нафтилизотиоцианата (полученного выше: 0,93 г, 5,0 ммоль, 1,2 экв.) в 10 мл, ТГФ. После перемешивания в течение ночи ТСХ показала непрореагировавший пиразолидинон, был добавлен еще 2-нафтилизотиоцианат (0,39 г, 0,50 экв.) в ТГФ. После перемешивания еще 1 ч, ТСХ все еще показывала некоторое количество пиразолидинона. После удаления растворителя в вакууме остаток был частично очищен на двух последовательных силикагелевых колонках (EtOAc: гексан с 0,5% НОАс). Полученный продукт растворяют в СНСl₃ и экстрагируют три раза буферным раствором рН 10. Объединенные водные экстракты подкисляют 1,0 н. НСl и затем экстрагируют три раза с использование Et₂O. Органические экстракты объединяют, пропускают по каплям через Na₂SO₄ для удаления воды и упаривают в вакууме с получением 0,60 г продукта, который согласно ТСХ все еще содержит примеси. Затем полностью процедуру экстракции повторяют (с использованием везде CH₂Cl₂) в качестве органической фазы) с получением 311 мг (17) бледно-желтого пенистого продукта:
¹Н ЯМР (CDCl₃) d 4,11 (д. J 5Hz, 1Н, 5,73 (д, J 5Hz, 1Н), 7,26 7,56 (м, 13), 7,67 7,82 (м, 4Н), MS 423 (М⁺) титрование рК_a 5,8.

Анализ для С₂₆H₂₁N₃OS: Вычислено, С 73,73; Н 5,00; N 9,92; Найдено, С 73,75; Н 5,13; N 9,97.

Препаративный пример 1
(R)-a-Метилбензилфенилкарбонат. (R)-a-Метилбензиловый спирт (4,34 г, 35,5 ммоль) растворяют в 120 мл CH₂Cl₂ в атмосфере азота и добавляют пиридин (4,31 мл, 1,5 экв.). Смесь охлаждают на ледяной бане и медленно добавляют раствор фенил-хлорформиата в 30 мл CH₂Cl₂. После этого удаляют ледяную баню и перемешивание продолжают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь распределяют между CH₂Cl₂ и 1,0 н. НCl, затем органический слой отделяют, пропускают по каплям через Na₂SO₄ для удаления воды и растворитель удаляют в вакууме с получением 8,34 г масла, которое используют без дальнейшей очистки (97% выход сырого продукта), ¹Н ЯМР (CDCl₃) d 1,69 (д. J 7 Hz, 3H), 5,83 (кв. J 7 Нz, 1Н), 7,14 7,46 (м, 10Н), MS 242 (M⁺), [α]_D=+119,6^o, [α]₃₈₅ +428,8^o (с 1,02, МеОН).

Анализ для C₁₅H₁₄O₃:
Вычислено, С 74,36; Н 5,82;
Найдено, С 74,06; Н 5,98.

Пример 139А/139В.

Диастереомеры А и В 1-[((R)-α-Метилбензил) оксикарбонил]-транс-4,5-дифенил-3-пиразолидинона.

(±)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидинон (8,13 г, 34,2 ммол.) растворяют в 150 мл ТГФ в атмосфере азота, охлаждают на ледяной бане и добавляют 1,43 г NaН (60% в минеральном масле, содержание гидрида 0,86 г, 35,7 ммоль, 1,05 экв.). Смесь перемешивают в течение 15 мин при температуре ледяной бани и 30 мин при комнатной температуре. Раствор (R)-a-метилбензилфенилкарбоната (из препаративного примера 1) (8,25 г, 34,4 ммоль, 1,00 экв.) в ТГФ затем добавляют в течение 10 мин и смесь перемешивают еще 40 мин. После разделения между Et₂O и 1,0 н. НCl органическую фазу отделяют и водную фазу экстрагируют второй раз с помощью Et₂O. Органические экстракты собирают, пропускают прикапыванием через Na₂SO₄ для удаления воды и выпаривают с получением 17,45 г сырой смеси продукта, приведенного в заглавии примера. Предварительную очистку (без разделения диастереомеров) ведут на двух последовательных силикагелевых колонках (EtOAc: гексан). Окончательную очистку и разделение диастереомеров А и В завершают посредством ВЭЖХ (Waters RCM 1,2,3 система 3, упакованных металлической стружкой колонки, Nova С 18, каждая 40х100 мм, 6 μм частицы, скорость пропускания 45 мл/мин (1100 p.s.i.)), УФ обнаружение при ф 245 нм/1,0, элюент 64 МеОН: Н₂O с 2,5% НОАс, загрузка 50 60 мг/инжекцию). Собирают три фракции: первая с высоким содержанием диастереомера А, вторая представляет смесь А и В (которую рециклизуют),и третья с высоким содержанием диастереомера В. Первые фракции нескольких опытов объединяют, выпаривают и остаток лиофилизуют с получением диастереомера А. Обрабатывая третьи фракции различных опытов подобным образом, получают диастереомер В. Чистота диастереомеров А и В определялись на аналитической ВЭЖХ (колонка Nova С 18, элюент 70% МеОН•Н₂O с 10 НОАс при 1500 psi, УФ обнаружение при 254 нм и обычно находилась в пределах 95 100% Диастереомер А:
¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,48 (д, J 8 Hz, 3Н), 3,88 (д, J 6 Hz, 1Н), 5,34 (д, J 6 Hz, 1H), 5,81 (кв, J 8 Hz, 1H), 7,03 (м, 1Н), 7,15 - 7,42 (м, 14Н) 8,08 (ш. с. 1Н), MS 386 (М+), титрование pK_a 8,7 [α]_D -23,1^o δ₃₈₅ -71,0^o (с 0,99, МеОН).

Анализ для С₂₄H₂₂N₂O₃:
Вычислено, С 74,59; Н 5,74; N 7,25;
Найдено, С 74,52; Н 5,97; N 7,24.

Диастереомер В:
¹Н ЯМР (CDCl₃)[α]_D: 1,42 (д, J 7 Hz, 3Н); 3,88 (д, J 5Hz, 1Н), 5,34 (с, 1Н), 5,80 (кв, J 7 Hz, 1Н), 7,14 7,43 (м, 15Н), 8,30 (ш. с. 1Н), MS (M⁺), титрование рК_a 8,6, [α]₃₈₅ -18,7^o α -122,2^o (с 1,01 МеОН).

Анализ для С₂₄H₂₂N₂O₃:
Вычислено, С 74,59; Н 5,74; N 7,25;
Найдено, С 74,79; Н 5,84; N 7,22.

Препаративный пример 2.

(+)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидинон. В тонкостенную стеклянную трубку для гидрирования загружают диастереомер В 1-[(R)-mг-метилбензил) оксикарбонил] -транс-4,5-дифенил-3-пиразолидинона (из примера 139А/139В) (2,26 мг, 0,587 ммоль), 15,0 мл ТГФ и 5% катализатора Pd/C (112 мг) и встряхивают в аппарате Парра при давлении водорода 50 psi в течение 15,5 ч. Катализатор отфильтровывают, используя Целит, и промывают ТГФ. Фильтрат выпаривают в вакууме и получают 134 мг (96%) белого пенистого продукта:
¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 3,99 (д, J 11Нz, 1Н), 4,66 (ш.с. 1Н), 4,74 (д, J 11Hz, 1H), 7,20 7,39 (м, 10Н), 8,63 (ш. с. 1Н).

Препаративный пример 3.

(-)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидинон. Диастереомер А 1 -[((R)a-метилбензил) оксикарбонил] -транс-4,5-дифенил-3-пиразолидинона (из примера 139А/139В) (2,61 мг, 0,0677 ммоль) подвергают гидрогенолизу (17 мл ТГФ, 128 мг 5% Р оVC) и обрабатывают аналогично препаративному примеру 2 и получают 154 мг (96) белого пенистого продукта:
¹Н ЯМР (CDCl₃) d: 4,01 (д, J 11 Hz, 1H), 4,38 (шир. с. 1Н), 5,81 (шир. с. 1Н), 7,1841 (м, 10Н), [α]_D= -76^o, [α]₃₈₅ 278^o (с 1,08 СНCl₃).

Пример 140.

(-)-транс-1-[(14-Бромфенил) аминокарбонил]-4,5- дифенил-3-пиразолидинон.

(-)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидион (из препаративного примера 2) 7,07 мг, 0,297 ммол) растворяют в 1,0 мл ТГФ в атмосфере азота обрабатывают раствором 4-бромфенилизоцианата (67,9 мг, 0,343 ммоль, 1,15 экв.) в 1,0 мд ТГФ. Смесь перемешивают в течение 45 мин. затем растворитель удаляют в вакууме. Продукт первоначально очищают хроматографированием (EtOAc: толуол) и получают 90,4 мг продукта, в котором еще, по данным ЯМР, присутствуют примеси. Продукт растворяют в толуоле и добавляют гексан до тех пор, пока не появится осадок. Растворители были тщательно удалены пипеткой и оставшийся твердый продукт высушен на вакуум-насосе с получением 77,3 мг (60%) белого твердого продукта:
¹Н ЯМР (CDCl₃), δ 4,01 (д, J 7Hz, 1Н), 5,52 (д, J 7Нz, 1Н), 6,90 7,50 (м, 15Н), 8,60 (шир. с. 1Н), MS 436 437 (М+) для Br изотопов) [α]_D= -38^o, [α]₃₆₅-293^o (с 1,26, CHCl₃).

Анализ для C₂₂H₁₈BrN₃O₂:
Вычислено, С 60,56; Н 4,16; N 9,63;
Найдено, С 61,43; Н 4,29; N 9,58.

Содержание энантиомера (95,1), по данным анализа ВЭЖХ диастереомерной чистоты диастереомера В из предыдущего примера 139А/139В.

Пример 141.

(+)-транс-1-1-[(4-Бромфенил) аминокарбонил]-4,4-дифенил-3-пиразолидинон.

(+)-транс 4,5-Дифенил-3-пиразолидинон (из препаративного примера 3) (82,9 мг, 0,348 ммол) растворяют в 1,0 мл ТГФ в атмосфере аргона и обрабатывают раствором 4-бромфенилизоцианата (76,8 мг, 0,388 ммоль, 1,11 экв.) в 1 мл ТГФ. Смесь перемешивают в течение 30 мин, затем растворитель удаляют в вакууме. Продукт сначала очищают хроматографированием (33 66% EtOAc: толуол градиент) и получают 51,6 мг продукта в котором, по данным ЯМР, все еще присутствуют примеси. Продукт растирают с гексаном, затем образующуюся твердую массу перекристаллизовываютиз смеси СН₂Cl₂: толуол гексан. Осторожно удаляют пипеткой растворители, высушивают на вакуум-насосе и получают 20,8 мг (14%) белого твердого продукта:
¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 4,02 (д, J 7 Hz, 1H)- 5,52 (д, J 7 Hz, 1Н), 6,90 7,50 (м, 15Н), 8,60 (шир. с. 1Н) MS 435, 437 (М+ для Br изотопов), [α]_d +40^o. [α]₃₈₅ +299^o (с 0,88, НСl₃).

Анализ для С₂₂H₁₈BrN₃O₂:
Вычислено, С 60,56; Н 4,16; N 9,63.

Найдено, С 61,93, Н 4,43, N 9,37.

Содержание энантиомера (100% ) по данным ВЭЖХ, анализа диастереомерной чистоты диастереомера А из предыдущего примера 139А/139В.

Пример 142.

(+)-транс-1-(4-Хлор-3-трифторметилфенил)- аминотиокарбонил/ 4,5-дифенил-3-пиразолидинон.

(+)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидинон (из препаративного примера 2) (134 мг, 0,561 ммоль) растворяют в 8,0 мл ТГФ в атмосфере азота и добавляют раствор 4-хлор-3-трифторметилфенилизотиоцианата (137, мг, 0,58 ммоль, 1,03 экв.) в 2 мл ТГФ. Смесь перемешивают 12 ч и затем растворитель удаляют в вакууме. Остаток сначала очищают на 2-х последовательных силикагелевых колонках (EtOAc: гексан с 0,5% НОАс). Частично очищенный продукт (155 мг) растворяют в СН₂С и экстрагируют три раза буферным раствором рН 10. Водные экстракты объединяют, подкисляют 1,0 н. НСl и экстрагируют три раза СН₂Cl₂. Органические экстракты объединяют, пропускают по каплям через Na₂SO₄ для удаления воды и выпаривают под вакуумом с получением 93,5 г (35%) бледно-желтой пены:
¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 4,10 (д, J 5Hz, 1Н), 5,74 (д, J 5Hz 1Н), 7,35 7,60 (м, 15Н), MS 475 (М⁺). [α]_D= +32^o, [α]₃₈₅ -116^o (с 1,06, СНСl₃.

Анализ для C₂₃H₁₇CF₃N₃OS:
Вычислено, С 58,05; Н 3,60; N 8,83;
Найдено,С: 5,86; Н 3,79; N 8,69.

Энантиомерный выход (98,6%), по данным анализа ВЭЖХ диастереомерной чистоты диастереомера В из предыдущего примера 139А/139В.

Пример 143.

(-)-транс-1[(4-Хлор-3-трифторметилфенил) аминотиокарбонил] -4,5-дифенил-3-пиразолидинон
(-)-транс-4,5-Дифенил-3-пиразолидинон (из препаративного примера 3) (147 мг, 0,617 ммол) растворяют в 8,0 мл ТГФ в атмосфере азота и обрабатывают раствором 4-хлор-3-трифторметилфенилизотиоцианата (160 мг, 0,673 ммоль, 1,09 экв. ) в 3 мл ТГФ. Смесь перемешивают 1,5 ч и растворитель затем удаляют в вакууме. Продукт очищают как в примере 142, за исключением того, что первоначальные стадии хроматографирования были исключены и полная процедура экстракции была выполнена дважды с получением 145 мг (49%) бледно-желтого пенистого продукта.

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 4,14 (д, J 35 Hz, 1H) 5,74 (д, J 5Hz, 1H).

Методики испытаний на связывание с рецепторами ХЦК и гастрина (ИК₅₀)
Связывание с рецептора ХЦК мозга осуществляют с использованием мышиных мембран в соответствии с методом Чанга и Лотти (Proc. Natl. Acad. Sc: 83: 4923 4926, 1986). Мышей СЕ-1 мужского пола весом 23 25 г умерщвляют цервикальной дислокацией, головной мозг извлекают и помещают в охлажденный на льду 50 мМ Трис-буфер, рН 7,4. Ткань гомогенизируют в 100 объемах Трис-буфера с использованием Brinkman Polytron или Tekmar Tissumizer и затем центрифугируют при 40000 g в течение 10 мин. Осадки после центрифугирования ресуспендируют в Трис-буфере, центрифугируют, как описано выше, и затем ресуспендируют в 100 объемах испытательного буферного раствора, рН 6,5 (20 мМ 11 2-гидроксиэтил-пиперазин-N'-2-этансульфокислота (HEPES), 1 мМ этиленгликольбис (2-аминоэтиловый эфир -N,N,N',N'- тетрауксусная кислота) (ЕСТА), 5 мМ MgCl₂, 130 мМ NaCl и 0,25 мг/мл бацитрацина). Анализ на связывание состоит из 50 мкл соединения (или буфена для полного связывания) 50 мкл 125 1-ХЦК-8 сульфата (20 пМ) (Амершам 1М-159), 200 мкл испытательного буферного раствора и 200 мкл гомогената (80 120 мкг белка). Пробы инкубируют при комнатной температуре (25^oС) в течение 2 ч, после чего фильтруют через стекловолокнистые фильтры GF/B (пропитанные в промывочном буфере в течение 2 ч перед использованием) с применением харвестера клеток Брандель, имеющего 48 лунок, который предназначен для рецепторного связывания. Фильтраты промывают два раза 3 мл 50 мМ Трис-буфера, рН 7,4, содержащего 0,01% БСА, и затем осуществляют подсчет на радиоактивностьв пластмассовых трубках с применением автоматического счетчика гамма/квантов Микромедик 10/- 600.

Соединения растворяют в диметилсульфоксиде (ДМСО) при концентрации 10 мМ и затем разбавляют испытательным буферным раствором. Концентрация ДМСО при инкубации составляет 0,1 или менее, и не оказывает влияние на анализ при данном уровне. Значения ИК₅₀ кривых смещения определяют с использованием концентраций соединения и вычисляют с использованием компьютерной программы AL LF ГГ ДеЛина, Мунсона и Родбарда (Am. J Phsiol 235: E97 E102, 1978). Неспецифическое связывание определяют как замещение радиолиганда 100 нМ ХЦК 8 сульфатом.

Поджелудочная железа.

Связывание с периферическими рецепторами ХЦК типа в поджелудочных железах крыс осуществляют в соответствии с методом Чанга и др. (Mol. Pharmacol. 30: 212-217, 1986), используя ³Н-1 364, 718. Поджелудочные железы получают от крыс Sprague-Dawley мужского пола весом 150 200 после декапитации и освобождают от жира и соединительной ткани. Ткань гомогенизируют в 30 объемах 50 мМ Трис-буфера, рН 7,4 и центрифугируют при 40000 g в течение 10 мин. Тканевый осадок промывают ресуспендированием и центрифугированием, как описано выше. Конечный осадок суспендируют в 500 объемах испытательного буферного раствора (50 мМ Трис-буфер, рН 7, 4, 5 мМ MgCl₂, 0,14 мг бацитрацина и 5 мМ дитиотрейтола) с получением концентрации белков, равной 30 60 мкг)- 200 мкл. Объема реагентов для анализа аналогичны тем, которые используют для ХЦК связывания с мозговыми мембранами. Третий меченый L - 364, 718 (Dupont NeN, NET 971) используют как лиганд при концентрации 0,4 - 0,6 мМ. Пробы инкубируют в течение одного часа при комнатной температуре и затем фильтруют, как описано выше для ХЦК мозгового рецептора. Сцинтилляционный коктейль прибавляют в фильтраты, которые подсчитывают на радиоактивность с использованием автоматического жидкостного сцинтилляционного счетчика Микромедик Таурус.

Пробы соединения получают и значения ИК₅₀ определяют, как описано выше для экспериментов с ХЦК мозга. Неспецифическое связывание составляет то количество, которое остается привязанным к фильтрам после прибавления 100 нм L- 364,718.

Слизистая оболочка желудка.

Способ, используемый для гастрин-связывания со слизистыми оболочками желудка морской свинки, аналогичен тому, который описан Такеучи, Спеиром и Джонсоном (Am. J. Phsiol. 237 (3), Е 284-Е294, 199). Дно желудка морской свинки получают от морских свинок Hartley мужского поля весом 300-350 г, и слизистую оболочку соскабливают предметным стеклом. Слизистую оболочку гомогенизируют в 50 мМ Трис-буфера, рН 7,4, содержащего 1 мМ фенилметансульфонилфторид, с использованием стеклянного гомогенизатора Dounce, и суспензию центрифугируют при 40000 g в течение 10 мин. Полученный осадок затем ресуспендируют и центрифугируют еще раз, после чего конечный осадок суспендируют в 100 мл испытательного буферного раствора на желудок одной морской свинки с полученим концентрации белков 200 300 мкг/200 мкл. Испытательный буферный раствор содержит 50 мМ Трис-буфера, рН 7, 4, 5 мМ MgCl₂, 0,14 мг/мл бацитрицина и 1 мкг/мл каждого из лейпептина, химостатина, апротинина и пепстатина. Объемы реагентов для анализа соответствуют тем, которые используют для связывания ХЦК с мозговыми мембранами. Радиоактивным лигандом является 20 nM ¹²⁵1 гастрин 1 из Du Pont NeN (NEX 176). Пробы инкубируют в течение 3 ч при комнатной температуре и фильтруют и подсчитывают, как описано для ХЦК связывания с мозговыми мембранами. Пробы соединений получают и значения ИК₅₀, как описано для рецепторного связывания относительно ХЦК мозга. Неспецифическое связывание определяют с использованием 100 нМ гастрина 1 (человеческого синтетического, полученного из Сигма Кемикал Ко).

В табл. 15 ниже представлены характерные результаты тестов на ХЦК и гастрин связывание для соединений в соответствии с изобретением.

7,35 7,60 (м, 15 Н), MS (M⁺), [α]_D -28^o, [α]₃₆₅ +128 (с 1,15 СНСl₃).

Анализ для С₂₃H₁₇CIF₃N₃O:
Вычислено, С 58,05; Н 36,60; N 8,83;
Найдено, С 57,77; Н 3,67; N 8,64.

Энантиомерный выход 97,2 по данным анализа ВЭЖЗ диастереомерной чистоты диастереомера А из предшествующего примера 139А/139В.

Сравнительные данные биологических испытаний, приведенные в следующей табл. 16.

Из сравнения данных видно, что предложенные соединения являются более активными.

Соединения показывают низкую токсичность.

Использование: в химико-фармацевтической промышленности. Сущность: производные пиразола ф-лы 1, где группа С=0, или COR⁴, необязательная связь, Р= 0-1, R и R независимо друг от друга Н, (C₂-C₆)алкил, замещенный или незамещенный фенил, бензил, нафтил, пиридил, R²-Н,(С₁-C₆алкил, -СН₂CООН, (С₁-C₄) алкокси СОСН₂, С(О)(А)_t-Y, t=1, A-NH,Y - фенил замещенный СF₃ и/или Наl, R⁴ (C₁-C₆)алкил, -СН₂СООН, (С₁-C₄)алкокси СОСН₂-, R³-H, или группа ф-л 2 или 3, где В-0, или S, Х-Hal, m=0-2, n=0-1, Q-NH(C₁-C₆)алкил, S, R₅ группа [CH(R⁶)] _q(СН₂)_r-R, где R⁶, С₁-C₆ алкил, q=0-1, r-0-2, R⁷-H,(C₁-C₈)алкил, пентафторфенил, пиридил, тетрагидронафтил, индолил, хинолинил, замещенный или незамещенный фенил или нафтил, или группа (Q)_n-R₅-2-тетрагидроизохинолинил, или их фармацевтически приемлемые соли. 8 з. п. ф-лы. Структура соединения ф-лы 1, 2, 3: 2 с. и 6 з.п. ф-лы, 16 табл.

1. Производные пиразола общей формулы I

где L группа С=О или COR⁴;
--- необязательная связь;
р 0 или 1;
R и R¹ независимо друг от друга водород, C₁ - C₆-алкил, фенил, бензил, нафтил, пиридил или замещенный фенил, имеющий 1 или 2 заместителя, выбранных из группы, состоящей из С₁ - С₆-алкокси, галоида, трифторметила, циано, карбамила, фенила, нитро, амино, С₁ С₄-моноалкиламина, бензиламина, ди-С₁ - С₄-алкиламина;
R₂ водород, С₁ С₆-алкил, карбоксиметил, С₁ С₄-алкоксикарбонилметил или группа формулы

где t 1;
А -NH;
Y фенил, замещенный трифторметилом и/или галоидом;
R⁴ С₁ С₆-алкил, карбоксиметил или С₁ - С₄-алкоксикарбонилметил;
R³ водород или группа формулы

или

где B О или S;
X галоид;
m 0, 1 или 2;
n 0 или 1;
Q -NH-, -N(С₁ С₆-алкил)-, -S- или -О-;
R⁵ группа формулы
-[CH(R⁶)]q (CH₂)_r R⁷,
где R⁶ водород или С₁ С₆-алкил;
q 0 или 1;
r 0, 1 или 2;
R⁷ водород, С₁ С₈-алкил, пентафторфенил, пиридил, тетрагидронафтил, индолил, хинолинил, фенил, нафтил, или фенил или нафтил, замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из С₁ С₆-алкила, С₁ С₆-алкокси, С₁ - С₆-алкилтио, галоида, трифторметила, фенила, фенокси, фенил-С₁ С₄-алкокси, С₁ С₆-алканоила, нитро, С₁ - С₆-алкокси, карбонила, метилендиокси, С₃ С₆-алкилена, амино, ди-С₁ С₄-алкаламино, или группа -(Q)_n- с R⁵ означает 2-тетрагидроизохиолинил,
или их фармацевтические приемлемые соли, при условии, что по крайней мере одна из групп R или R¹ имеет значение, отличное от водорода или С₁ С₆-алкила, и R или R¹ водород в случае, когда одна из групп R или R¹ фенил, замещенный на фенильную группу, и при условии, что по крайней мере одна из групп R² и R³ имеет значение, отличное от водорода, причем, когда R³ группа формулы

R² имеет значение, отличное от группы формулы

и когда L С 0, то p 1, и когда L COR⁴, то p 0, а ---- означает связь. 2. Соединения по п. 1, отличающиеся тем, что R и R¹ находятся в транс-стереоконфигурации. 3. Соединения по пп.1 и 2, имеющие формулу

где R, R¹, R² и R³ имеют значения, определенные в п. 1. 4. Соединения по пп. 1 3, отличающиеся тем, что R и R¹ фенил или замещенный фенил, определенный в п. 1. 5. Соединения по пп. 1 4, отличающиеся тем, что R² водород. 6. Соединения по пп. 1 6, отличающиеся тем, что В в группе формулы

означает кислород, а X и m имеют указанные значения. 7. Соединения по пп. 1 6, отличающиеся тем, что в группе формулы
[CH(R⁶)]_q(CH₂) R⁷
q и r 0;
R⁷ фенил или фенил, имеющий заместители, определенные в п. 1. 8. Производные пиразола по п. 1 общей формулы I

где L, R, R¹, R², R³ и p имеют значения, определенные в п. 1, обладающие активностью антагонистов холецистоцинина или гастрина у теплокровных позвоночных.