1-БЕНЗИЛ-2-ОКСОТРИПТАМИН ГИДРОХЛОРИД И ЕГО ПРОИЗВОДНЫЕ, ОБЛАДАЮЩИЕ ГЕПАТОЗАЩИТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 1997 года по МПК C07D209/12 C07D209/16 C07D403/02 A61K31/40 

Изобретение относится к области новых биологически активных соединений, в частности к 1-бензил-2-оксотриптамин гидрохлориду и его производным, обладающим гепатозащитной активностью, которые могут найти применение как потенциальные лекарственные препараты в медицинской практике.

Известно, что заболевания гепатобилиарной системы занимают большой удельный вес в группе нозологических форм, относящихся к патологии пищеварительной системы. На высоком уровне сохраняется заболеваемость населения вирусными гепатитами, многообразными стали токсические, лекарственные и аллергические поражения печени.

В последнее десятилетие потребность в лекарственных средствах в терапии и профилактике больных острыми и хроническими патологиями печени возрасла почти в два раза, однако арсенал этиотропных средств чрезвычайно мал.

В медицине известно применение отечественного препарата силибора, содержащего сумму флавоноидов из плодов расторопши пятнистой, при лечении гепатитов и цирроза печени /1/. Широко применяется при хронических гепатитах, при дистрофии и циррозе печени препарат "Эссенциале" (Германия), представляющий собой комплекс эссенциальных (необходимых) фосфолипидом, ненасыщенных жирных кислот и витаминов /1/. Использование в медицинской практике препаратов, родственных по структуре к заявляемому объекту, неизвестно.

Силибор и эссенциале, применяемые в клинической практике, имею ряд недостатков, а именно обладают кожными аллергическими реакциями, сравнительной низкой эффективностью, развитием жировой дистрофии при хроническом применении, кариолизисом отдельных клеток печени и высоким морфометрическим показателем поражения печени, низкой гепатозащитной активностью при остром токсическом гепатите.

В связи с этим очевидна все более возрастающая актуальность поиска эффективных лекарственных препаратов, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний печени.

Целью изобретения является синтез новых химических соединений, обладающих высокой гепатозащитной активностью.

Поставленная цель достигается синтезом 1-бензил-2-оксотриптамина гидрохлорида и его производных общей формулы:

где
Соединения формулы Iа, б получены по схеме 1 перегруппировкой N-ариламинопирролидонов-2 (VI а, б) в условиях реакции Коста в присутствии избытка хлорокиси фосфора с последующим кислотным гидролизом промежуточно образующихся пирроло-[2,3b]-индолов (Б). Взаимодействие гидрохлоридов 1-бензил-2-оксотриптаминов (I а, б) с кетонами в этаноле приводит к образованию гидрохлоридов 2-оксоиндолин-3-спиро-3'-пирролидинов II V:

Пример 1. Получение 1-бензил-2-оксотриптамин гидрохлорид (Iа).

К раствору 2,66 г (0,01 моль) N,N-бензилфениламинопирролидона (VIа) в 20 мл абсолютного диоксана приливают 1,85 мл (0,02 моль) хлорокиси фосфора и нагревают реакционную массу при 55-60^oC в течение 6 ч. По окончании реакции смесь упаривают в вакууме, к остатку прибавляют 10 мл сухого толуола и упаривают еще раз досуха. Остаток разбавляют 5 10 мл воды, присыпают 0,3 г активированного угля марки "А" и нагревают 20 мин при 50 60^oC. Уголь отфильтровывают, промывают на фильтре 2 мл горячей воды, фильтрат упаривают в вакууме. К остатку порциями добавляют этанол и растирают массу до образования кристаллов. Выпавшие кристаллы 1-бензил-2-оксотриптамина гидрохлорида отфильтровывают, перекристаллизовывают из этанола. Получают 2,46 г (81%) соединения Iа, т. пл. 222 224^oC. Найдено, C 67,40; H 6,51; N 9,31; Cl 11,74. C₁₇H₁₈N₂O•HCl. Вычислено, C 67,43; H 6,32; N 9,25; Cl 11,70
ИК-спектр: 3150 2500; 1710 см ^-1 .

Пример 2. Получение 1-бензил-5-метил-2-оксотриптамин гидрохлорида (Iб).

Получают аналогично примеру 1 из 2,8 г (0,01 моль) N,N-бензил-п-толил-аминопирролидона (VIб) и 1,83 г (0,02 моль) хлорокиси фосфора. Выход 2,28 г (72%) соединения Iб, т.пл. 225 227^oC.

Haйдено, C 68,18; H 6,70; N 8,74; Cl 11,25. C₁₈H₂₀N₂O•HCl.

Вычислено, C 68,23; H 6,68; N 8,84; Cl 11,19.

ИК-спектр: 3150 2500, 1700 см^-1.

Пример 3. Получение 1-бензил-2',2'-диметил-2-оксоиндолин-3- спиро-3'-пирролидин гидрохлорида (II).

Смесь 1,82 г (6 ммоль) гидрохлорида 1-бензил-2-оксотриптамина (Iа) 30 мл ацетона и 50 мл этанола кипятят в течение 7 ч до исчезновения по ТСХ исходного соединения. Реакционную массу упаривают в вакууме, остаток растирают в эфире, отфильтровывают, перекристаллизовывают из этанола. Получают 1,55 г (75% ) соединения II, т. пл. 219 220^oС Найдено, C 69,62; H 7,12; N 7,84; Cl 10,12.

C₂₀H₂₂N₂O•HCl. Вычислено, C 70,06; H 6,76; N 8,17; Cl 10,34.

ИК-спектр 3400, 2600, 1700, 1610 см ^-1.

Пример 4. Получение 1-бензил-2',2',5-триметил-2- оксоиндолин-3-спиро-3'-пирролидин гидрохлорида (III).

Получают аналогично примеру 3 из 1,90 г (6 ммоль) гидрохлорида 1-бензил-5-метил-2-оксотриптамина (Iб), 30 мл ацетона и 50 мл этанола. Выход 1,56 г (73% ) соединения III, т. пл. 234 235^oC (из этанола). Найдено, C 70,92; H 7,39; N 7,75; Cl 10,20.

C₂₁H₂₄N₂O•HCl. Вычислено, C 70,67; H 7,06; N 7,85; Cl 9,93
ИК-спектр: 3450, 3190, 2380, 1680, 1610 см^-1.

Пример 5. Получение 1-бензил-2'- метил-2'-метил-этил-2-оксоиндолин-3-спиро-3'-пирролидин гидрохлорида (IV).

Получают аналогично примеру 3 из 1,82 г (6 ммоль) гидрохлорида 1-бензил-2-оксотриптамина (Ia), 30 мл метилэтилкетона и 50 мл н-бутанола. Выход 1,63 г (76%) соединения IV, т.пл. 213 214^o (из этанола). Найдено, C 70,70; H 6,70; N 7,61; Cl 9,80. C₂₁H₂₄N₂O•HCl. Вычислено, C 70,67; H 7,06; N 7,85; Cl 9,93. ИК-спектр: 3400, 2640, 1710, 1615 см^-1.

Пример 6. Получение 1-бензил-2',2'- пентаметилен-2-оксоиндолин-3-спиро-3'-пирролидин гидрохлорида (V).

Получают аналогично примеру 3 из 2,42 г (8 ммоль) гидрохлорида 1-бензил-2-оксотриптамина (1a), 1,7 мл (16 ммоль) циклогексана и 100 мл этанола. Получают 2,05 г (67%) соединения V, т.пл. 212 214^oС (из водного этанола). Найдено, C 71,90; H 6,90; N 6,90; Cl 8,81. C₂₃H₂₆N₂O•HCl. Вычислено, C 72,14; H 7,11; N 7,311; Cl 9,26. ИК-спектр: 3400, 2625, 1705, 1610 см^-1.

Полученные соединения обладают гепатопротекторной активностью. Оценку гепатозащитного эффекта проводили на модели острого токсического гепатита на мышах-самцах и модели хронического токсического активного гепатита у крыс. В качестве препаратов сравнения использовали отечественный гепатопротектор силибор и эссенциале (ФРГ). Испытуемые соединения и препараты сравнения вводили в крахмальной слизи.

Оценка гепатозащитной активности на модели острого токсического гепатита.

Испытания химических соединений проводили на беспородных мышах-самцах массой 20 22 г на модели острого токсического гепатита, который вызывали однократным внутрибрюшинным введением четыреххлористого углерода (CCl₄) в дозе 1,5 ДЛ₅₀ в виде 50% раствора на вазелиновом масле.

Испытуемые химические соединения вводили однократно внутрибрюшинно за 1 ч до введения CCl₄ в дозе 50 мг/кг. Гепатозащитный эффект оценивали по выживаемости мышей в течение 3 4 суток. Степень гепатозащитного эффекта выражали в процентах и определяли отношением числа выживших к общему числу использованных животных.

В результате исследований было выявлено, что все испытанные химические соединения по сравнению с препаратами эссенциале и силибор повышают выживаемость мышей при отравлении четыреххлористым углеродом (таблица 1). Наибольшая степень выживаемости (70%) наблюдалась при использовании химических соединений Ia и IV. Несколько ниже выживаемость мышей при использовании химических соединений II, III, V, однако и в этом случае гепатозащитная активность в 2 раза превосходит препараты сравнения силибор и эссенциале, применяемые в клинической практике.

Оценка гепатозащитной активности на модели хронического токсического гепатита у крыс.

Исследования проводили на беспородных крысах-самцах массой 180 200 г. Гепатозащитное действие испытуемых химических соединений оценивали на модели хронического токсического активного гепатита (ХТАГ). Для моделирования ХТАГ животным внутрибрюшинно вводили ежедневно в течение 4 дней CCl₄ в дозе 0,2 мл 40% раствора на вазелиновом масле на 100 г массы тела животного. Испытуемые химические соединения вводили в зависимости от ДЛ₅₀ внутрибрюшинно ежедневно за 1 ч до введения гепатотоксина в течение 6 дней. Забой животных осуществляли через 24 ч после последнего введения испытуемого химического соединения. После забоя животных извлекали печень и проводили гистологическую обработку материала стандартными методами с окраской гематоксилин-эозином. На гистологических препаратах оценивали в баллах (от 0 до 2) степень альтерации ткани печени. Основное внимание обращали на степень жировой и белковой дистрофии гепатоцитов, состояние микроциркулярного русла печени, активность воспалительного процесса паренхимы.

Препаратами сравнения служили эссенциале и силибор, которые вводили по указанной выше схеме. На 8 сутки забоя у нелеченных животных после гистологического изучения паренхимы печени в ткани печени наблюдались выраженные признаки токсического поражения: центролобулярная резко выраженная вакуольнокапельная жировая дистрофия, занимающая большую часть дольки, белковая дистрофия, потеря балочной структуры, карполизис отдельных гепатоцитов, в портальных полях крупно и мелкоочаговые воспалительные инфильтраты, состоящие из лимфоцитов, расширение центральных вен и синусоидов. Морфологический показатель поражения печени (ИПп) был равен 1,03±0,22.

У группы животных, получавших препарат сравнения эссенциале или силибор (25 мг/кг), состояние паренхимы печени визуально было несколько сохраннее. Однако во всех случаях на препаратах были видны отдельные клетки или группы клеток с вакуольно-капельной дистрофией, расширение центральных вен и синусоидов, диффузная дистрофия, карполизис отдельных клеток печени. Морфометрический показатель поражения печени был равен для эссенциале 0,97±0,27 и для силибора 1,03±0,14.

Таким образом, гепатозащитный эффект препаратов сравнения эссенциале и силибор, применяемых в настоящее время в клинике был малозаметным или практически отсутствовал.

Изучение гепатозащитной активности производных 1-бензил-2-оксотриптамина показало высокий гепатозащитный эффект при курсовом применении в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно химических соединений I, II и III (табл. 2 3).

Так, индекс поражения печени при использовании химического соединения 1a равен 0,08±0,002, что соответствует терапевтическому индексу эффективной дозы равному 100 (ЕД₁₀₀). При использовании соединения II ИПп был равен 0,21±0,03 и соответствовал ЕД₈₀. Индекс поражения печени соединения 111 был равен 0,42±0,06, что соответствует ЕД₆₀.

Визуально на гистологических препаратах паренхимы печени леченых животных жировая дистрофия была слабо выражена, центролобулярно встречались мелкокапельные жировые включения у отдельных гепатоцитов. Границы клеток были четкими, балочная структура сохранной, отсутствовал отек паренхимы, слабая инфильтрация клетками РЭС отмечалась близ портальных полей.

Таким образом, как следует из представленных результатов исследования гепатозащитной активности, изученные соединения-1-бензил-2-оксотриптамин гидрохлорид (N гос. регистрации 7909187); 1-бензил-2',2'- диметил-оксоиндолин-3-спиро-3'-пирролидин гидрохлорид (N гос. регистрации 7909487) и 1-бензил-2', 2', 5-триметил-2-оксоиндолин-3- спиро-3'-пирролидин гидрохлорид (N гос. регистрации 7909587) обладают высокой гепатозащитной активностью, значительно превышающей препараты сравнения и могут рассматриваться как перспективные гепатозащитные средства.

Использование: в медицине. Сущность: продукт-1-бензил-2-оксотриптамин гидрохлорид и его производные ф-лы I при соответствующих значениях радикалов, обладающие генатозащитной активностью. Б.Ф. C₁₇ H₁₈ N₂O•HCl, C₁₈ H₂ N₂O•HCl, C₂O H₂₂N₂O•HCl, C₂₁ H₂₄ N₂O•HCl, C₂₁ H₂₄ N₂O•HCl, C₂₃ H₂₆ N₂O•HCl. Реагент 1: N-ариламинопирролидон-2. Реагент 2: POCl₃. Условия реакции: в среде диоксана с последующим гидролизом. 3 табл.

1-Бензил-2-оксотриптамин гидрохлорид и его производные общей формулы

где

R H, CH₃;
R¹ CH₃;
R² CH₃, C₂H₅;
R¹ + R² -(CH₂)₅-,
обладающие гепатозащитной активностью.