ГЕМОСТИМУЛЯТОР Российский патент 1997 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к медицине, конкретно к клинической гематологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции нарушений в кроветворной ткани, вызываемых противоопухолевыми препаратами.

Гемодепрессии, возникающие в процессе лечения онкологических больных цитостатическими препаратами, являются в настоящее время одной из основных причин, ограничивающих возможности химиотерапии. Арсенал лекарственных средств, применяемых с целью коррекции указанных нарушений, включает такие распространенные препараты, как пентоксил, нуклеинат натрия, метацил, витамины C, B₁, B₆, а также ряд иммуномодуляторов бактериального (зимозан, продигиозан) и растительного (элеутерококк) происхождения [2]
Однако, перечисленные препараты не обладают специфической гемопоэзстимулирующей активностью и недостаточно эффективны при лечении тяжелых гипопластических состояний системы крови.

Высокоэффективные в данном отношении, современные препараты, относящиеся к классу цитокинов (колониестимулирующие факторы, интерлейкины) не получили пока распространения в отечественной клинической практике в связи с их высокой стоимостью и рядом нежелательных побочных эффектов.

Таким образом, лекарственное средство, предлагаемое нами, не имеет адекватных аналогов.

Целью изобретения является снижение токсического действия противоопухолевых препаратов на кроветворную систему за счет стимуляции регенерации гемопоэза.

Цель достигается тем, что в качестве средства, стимулирующего восстановление кроветворной ткани, используется глицирам.

Глицирам, обладающий гемостимулирующими свойствами, получают из измельченных корней и корневищ солодки голой и солодки уральской после предварительной очистки от смолистых и фенольных соединений путем экстракции подкисленным (3% азотной кислоты) ацетоном, осаждения из извлечения аммиаком и кристаллизацией из уксусной кислоты [1]
Известно применение глицирама при заболевании верхних дыхательных путей, при бронхиальной астме, аллергических дерматитах, экземе. Препарат оказывает противовоспалительное действие, связанное с умеренным стимулирующим влиянием на кору надпочечников.

Применение глицирама по новому назначению стало возможным благодаря выявленному нами новому свойству.

Впервые показано, что глицирам приводит в стимуляции регенераторных процессов в кроветворной ткани при гемодепрессии, вызванной введением цитостатика. Это позволяет получить неизвестный ранее положительный эффект, заключающийся в уменьшении повреждающего действия цитостатика на систему крови.

Свойство глицирама стимулировать восстановление как эритропоэза, так и гнанулоцитопоэза при гемодепрессии, вызванной применением цитостатика, в литературе не описано. Механизм действия на гемопоэтические клетки неизвестны.

Исследования были проведены на 200 мышах линии CBA массой 18-20 г. Животным опытной группы вводили внутрибрюшинно 5-фторурацил (цитостатик, относящийся к антиметаболитам пиримидинового ряда) в максимально переносимой дозе (228 мг/кг) и затем пятикратно глицирам. Последний вводили peros по 50 мг/кг 1 раз в сутки ежедневно. Контрольные мыши получали после цитостатика воду: пятикратно, в эквивалентном объеме (0,2 мл). Животных забивали на 2-14 и 16 сутки после введения 5-фторурацила методом дислокации шейных позвонков. В периферической крови экспериментальных мышей определяли содержание эритроцитов, ретикулоцитов, общее количество лейкоцитов и содержание их отдельных форм. Подсчитывали общее количество миелокариоцитов в костном мозге и изучали на мазках их качественный состав. Методом клонирования in vitro в метилцеллюлозе определяли содержание в костном мозге ткани коммитированных клеток-предшественников эритропоэза (КОЕ-Э) и грануломоноцитопоэза (КОЕ-ГМ). Тестирование колониестимулирующей и эритропоэзтической активностей клеток костного мозга проводили по методу Metcalf, 1977.

Проведенные исследования позволили выявить выраженное стимулирующее действие глицирама на процессы восстановления костномозгового кроветворения, подавленного 5-фторурацилом (табл.1). Так, уже на 7 сутки эксперимента общее количество миелкариоцитов в костном мозге мышей, получавших после цитостатика глицирам, достоверно превышало таковое и у контрольных животных. Максимальная разница величин данного показателя была отмечена на 8 сутки, когда общая клеточность костного мозга у мышей с глицирамом уже практически восстановилась до уровня фона и составила 14,6±1,68 млн/бедро, а у животных с одним цитостатиком оставалась достоверно ниже исходных значений и в два раза ниже контрольных величин (7,0±1,30 млн/бедро). Значительная разница между контрольными и опытными животными по данному показателю наблюдалась и в другие сроки эксперимента.

При изучении морфологического состава костного мозга оказалось, что стимуляция восстановления клеточности кроветворной ткани во многом обусловлена эффектом глицирама в отношении гранулоцитарного ростка гемопоэза. Так, мы зарегистрировали 3-х кратное превышение содержания незрелых форм нейтрофильных гранулоцитов в костном мозге мышей, получавших цитостатик с глицирамом по сравнению с животными, которым вводили только 5-фторурацил, на 6-е сутки исследования. Достоверная разница величин данного показателя в опытной и контрольной группах была зафиксирована также на 7-е и 8-е сутки (табл.1). Необходимо отметить, что начиная с 6-х суток и до окончания периода наблюдения уровень незрелых нейтрофильных гранулоцитов у мышей с глицирамом статистически значимо превышал таковой у интактных животных.

В меньшей степени глицирам стимулировал восстановление эозинофильного и лимфоидного ростков кроветворения (достоверная разница между опытными и контрольными животными соответственно на 5 и 8 сутки эксперимента) (табл.1). В ходе эксперимента наблюдалась также значительно более интенсивная регенерация костномозгового эритропоэза под действием глицирама после применения 5-фторурацила (табл.1). Однако, достоверным различие в содержании эритрокариоцитов у опытных и контрольных животных оказалось только на 6-е сутки исследования. Стимулирующее действие глицирама в отношении эритропоэза отражалось и на картине периферической крови. В частности, содержание ретикулоцитов у мышей опытной группы достоверно превышало контрольные значения в последние сроки наблюдения. Величины данного показателя составили на 12-е сутки соответственно 28,33±2,09 и 14,33±0,49% а на 14-е сутки - 43,00±2,19 и 31,83±2,09%
При изучении механизмов гемостимулирующего эффекта глицирама оказалось, что его применение после 5-фторурацила приводит к более раннему накоплению в кроветворной ткани коммитированных клеток-предшественников грануломоноцитопоэза (4-7 сутки) и эритропоэза (5-7 сутки эксперимента) по сравнению с таковым показателем у мышей, получавших только 5-фторурацил (табл.2). Максимальные различия содержания предшественников отмечались на 6-е сутки наблюдения, когда на 100 тысяч миелокариоцитов приходилось 5,79±0,15 грануломоноцитарных предшественников у опытных и лишь 3,5±0,46 у контрольных животных. Для эритроидных прекурсоров в аэот срок аналогичные показатели составляли соответственно 14,55 ±0,47 и 8,77±0,63 клеток.

Дальнейшие исследования позволили выявить ряд регулярных изменений в кроветворной системе, возникающих при сочетанном применении глицирама с цитостатиком. Так, клетки гемопоэзиндуцирующего микроокружения (ГИМ), как прилипающей, так и неприлипающей фракций, начинали секретировать максимальные количества гуморальных веществ, обладающих эритропоэзтической активностью, на 5-е сутки эксперимента, то есть на 2-4 суток раньше, чем соответствующие элементы ГИМ у мышей, получавших только 5-фторурацил (табл. 3). Колониестимулирующая активность прилипающих клеток ГИМ у опытных мышей также возрастала значительно раньше (3-и сутки) по сравнению с таковой в контроле (максимум наблюдали на 7-8-е сутки) (табл.3).

Таким образом, опережающее возрастание секреторной активности элементов ГИМ после применения цитостатика с глицирамом обеспечивало более ранее накопление кроветворных клеток-предшественников в костном мозге мышей данной серии экспериментов по сравнению с животными, получавшими один только 5-фторурацил. Это, в свою очередь, приводило к более раннему восстановлению в опытной группе общего количества миелокариоцитов и их отдельных морфологических форм.

Полученные результаты позволяют сделать заключение о наличии у глицирама способности стимулировать процессы регенерации кроветворения, подавленного 5-фторурацилом.

Изобретение относится к медицине, в частности, к клинической гематологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции нарушений в системе крови, вызванных цитостатиками. Цель изобретения - снижение токсического действия цитостатиков на гемопоэз за счет стимуляции его регенерации. Сущность способа заключается в применении известного лекарственного препарата глицирама, полученного из корня солодки голой glyeyrrhiza glabra L. по новому назначению в качестве средства, стимулирующего восстановление кроветворения при цитостатических гемодепрессиях. 3 табл.

Применение глицирама в качестве средства, стимулирующего восстановление кроветворения, подавленного цитостатиком.