АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1997 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для лечения и профилактики болезней животных.

Известны комбинированные лекарственные препараты: трициллин, мастицид, мастисан, мастисан А, мастисан Б, мастисан Е, мастин, дипасфен, оксикан, ФД илкоциллин, дипель N 1, дипель N 2, неофур, эндомицин, калиокс, сульфобиотик, биосулфаксан, экзутер, септиметрин, лефуран и др. состоящие из антибиотиков, сульфаниламидов, нитрофуранов. Их выпускают в форме порошков, таблеток, масляных растворов, суспензий, многие из них перед применением растворяют, смешивают.

Комплексные препараты имеют преимущества перед монопрепаратами, особенно при лечении полиэтиологичных болезней.

Зарубежные фармацевтические фирмы, в последние 7-10 лет и отечественная фарминдустрия в создании лекарственных форм антибактериальных и других средств используют с целью стабилизации, пролонгации, неводные органические растворители и полимерные наполнители, позволяющие повысить стабильность лекарственных препаратов.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному предложению является препарат антибактериальный "Левоэритроциклин". Это комплексный препарат, содержащий три антибиотика широкого спектра действия левомицетин, эритромицин, тетрациклин, поливинилпирролидон, аскорбиновая кислота и пропиленгликоль -растворитель. ( 1 ).

Способ получения антибактериального препарата "Левоэритроциклин" включает растворение в многоатомном алифатическом спирте антибиотиков, поливинилпирролидона и аскорбиновой кислоты, отличающийся тем, что в качестве алифатического спирта используют пропиленгликоль, который перед растворением в нем компонентов препарата предварительно стерилизуют и при температуре 90-95^oC в нем вначале растворяют поливинилпирролидон и антибиотик левомицетин, а затем температуру пропиленгликоля снижают до 70-75^oC и растворяют антибиотики эритромицин, тетрациклин и аскорбиновую кислоту. Левоэритроциклин выпускают в форме раствора, содержащего в 1 мл: левомицетина 40 мг, эритромицина 40 мг, тетрациклина 20 мг, аскорбиновой кислоты 1 мг, поливинилпирролидона 40 мг, пропиленгликоля до 1 мл. Препарат применяют с лечебной и лечебно-профилактической целью при болезнях животных.

Один компонент, используемый для изготовления эритромицина, приобретали по импорту. Был предложен аналог-заменитель. Эритромицин, изготовленный с использованием отечественного компонента заменителя в составе левоэритроциклина оказался недостаточно стабильным и левоэритроциклин не выдерживал 12-месячный срок годности, согласно ТУ.

Цель изобретения обеспечение более стабильного и эффективного препарата.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве растворителя компонентов используют димексид, а в качестве стабилизатора антибиотиков синтетический высокомолекулярный полиэтиленоксид.

Препарат получают в форме гидрофильно-адсорбционного сплава путем последовательного растворения компонентов в горячем димексиде при снижающемся температурном режиме: поливинилпирролидон и полиэтиленоксид при 110.100^oC, новокаин или другое анестезирующее средство и левомицетин- 95.90^oC, тетрациклин или другой антибиотик тетрациклиновой группы - 65.62^oC, эритромицин основание 62.60^oC.

Отличие от прототипа.

1). Растворитель компонентов димексид (ДМСО) вместо пропиленгликоля.

2). Стабилизатор антибиотиков эритромицина-синтетический высокомолекулярный полиэтиленоксид вместо аскорбиновой кислоты.

3). Препарат в форме гидроксильно-адсорбционного сплава при температуре 10. 15^oC меняет агрегатное состояние переходит из жидкого в полутвердое /мазеподобное/, которое по мере снижения температуры уплотняется, при этом снижается физико-химическое взаимодействие компонентов продлевается стабильность эритромицина.

Соотношение компонентов, мас.

Поливинилпирролидон 2-6
Полиэтиленоксид 10-20
Новокаин или другое анестезирующее средство 0,5 1,5
Левомицетин 2-6
Окситетрациклин или другой тетрациклиновый антибиотик 1-3
Эритромицин основание 2 6
Димексид До 100
Примеры на соотношение компонентов в препарате приведены в табл.1 3.

Пример 1: минимальный вариант.

Пример 2: оптимальный вариант.

Пример 3: максимальный вариант.

Исходным сырьем для изготовления антибактериального препарата служат антибиотики в форме порошка: левомицетин, эритромицин основание, тетрациклиновые антибиотики окситетрациклин или: тетрациклин гидрохлорид, тетрациклин основание, хлортетрациклин гидрохлорид и др. а также поливинилпирролидон медицинский мол.м. 1.14 тыс. полиэтиленоксид марок от 1000 до 6000 (мол. 950 до 7000), новокаин или другое анестезирующее средство (целновокаин, тримекаин, лидокаин, анестезин), выпускаемое фармацевтической промышленностью. В спецификациях заводов-изготовителей указаны активность, безвредность и другие показатели, предусмотренные Государственной фармакопеей СССР изд. X, XI и другой нормативно-технической документацией.

Антибиотики, полимер, димексид и другие лекарственные вещества, необходимые для изготовления препарата, хранятся в сухом помещении в соответствии с условиями, сроками годности, указанными в паспорте завода-изготовителя.

Технология препарата состоит из следующих операций: подготовка помещения для работы, подготовка инструментов и посуды, подготовка составных компонентов, приготовление препарата, фасовка препарата и его контроль.

Левоэритроциклин готовят в специальном помещении или боксе, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, обеспечивающей подачу стерильного воздуха. Для обеззараживания воздуха в боксах включают бактерицидные лампы БУВ 15 или БУВ 30 на 2 ч в соответствии с инструкцией по их эксплуатации. По окончании работ в помещении производят влажную уборку. Пол, стены, столы протирают дезраствором 2%-ным водным раствором хлорамина. Бактериологический контроль воздуха в помещении проводят не реже одного раза в неделю. Один раз в месяц помещение и боксы обрабатывают формалином из расчета 50 мл 40%-ного формальдегида на 1 м³ объема. Формалин вливают в кюветы и подогревают до испарения. Пары формалина нейтрализуют 5% -ным водным раствором аммиака, который наливают в бактериологические чашки из расчета 10 мл на 1 м³ помещения.

Подготовка оборудования, инструментов и посуды проводят с соблюдением требований регламента. Реакторы стерилизуют при 120^oC в течение 1 ч в день приготовления препарата или не ранее чем за 24 ч.

Флаконы для розлива препарата (емкость согласно ТУ) укладывают в биксы или металлические кассеты горлышком вниз. Кассеты закрывают марлей, медицинской клеенкой и закрепляют их шнуром из пеньки или синтетического материала. Флаконы стерилизуют в автоклаве при 120^oC или в сушильном шкафу при 160-180^oC в течение 1 ч.

Резиновые пробки для флаконов и металлические колпачки укладывают в коробки и стерилизуют в автоклаве в том же режиме, что и флаконы. Пинцеты, воронки, халаты, колпаки, маски, рукавицы, чехлы для обуви завертывают в пергаментную бумагу и автоклавируют при одной атмосфере 1 ч. Резиновые перчатки обрабатывают 2-4%-ным раствором хлорамина. Весь простерилизованный инвентарь вносят в бокс за 12-24 ч до розлива готового препарата и включают бактерицидные лампы на 1 ч. Персонал, занятый приготовлением препарата, перед работой тщательно моет руки водой с мылом, вытирает полотенцем, протирает спиртом, надевает стерильную спецодежду.

Подготовка составных компонентов. Для приготовления левоэритроциклина-2 отвешивают необходимое количество компонентов в полиэтиленовые мешочки. При расчете массы тетрациклиновых антибиотиков, эритромицина основания учитывают их фактическую миллиграммовую активность, которая указана в паспорте завода-изготовителя.

Например, на 40 л готовой продукции (для реактора объемом 50 л) требуется окситетрациклина гидрохлорида с товарной активностью 860 мкг/мг- 930 г /800000 г: 860= 930/ вместо 863 г при теоретической активности 927 мкг/мг / 800000: 927= 863. Или тетрациклина гидрохлорида с товарной активностью 975 мкг/мг-820 г /800000:975=820/ вместо 739 при теоретической активности 1082 мкг/мг /800000:1082=739/; эритромицина основания с товарной активностью 910 ЕД/мг-1758 г /1600000910=1758/ вместо 1600 г при теоретической активности 1000 ЕД/мг /1600000:1000=1600/.

Активность товарных серий левомицетина близка к 1000 мкг/мг /от 985 до 1000 мкг/мг/ пересчет по этому антибиотику не производят. В табл. 4 масса тетрациклиновых антибиотиков и эритромицина основания пересчитана на среднюю активность товарных серий.

Стерилизация растворителя. Димексид, поливинилпирролидон и полиэтиленоксид в рассчитанном количестве (см. табл. 4) вносят в реактор, нагревают при включенной мешалке (60. 70^oC) до растворения полимеров и стерилизуют при 120^oС 1 ч. Если реактор не подключен к парообразователю, димексид с добавленными в него полимерами стерилизуют в закрытых десятилитровых бидонах в автоклаве при том же режиме. Бидоны закрывают пергаментом, металлическими крышками и сверху закрывают медицинской клеенкой, которую закрепляют шнуром.

Растворение компонентов. Препарат готовят в реакторе объемом от 20 до 200 л, с тем, чтобы обеспечить лучшее перемешивание и растворение компонентов, в реакторе готовят в один прием соответственно его объема на 10-15% меньше.

В табл. 4 указаны потребность в составных компонентах левоэритроциклина-2, последовательность внесения их в реактор и температурный режим растворения каждого из них.

После стерилизации растворителя /димексид с растворенными в нем поливинилпирролидоном и полиэтиленоксидом/ через рубашку реактора пропускают холодную воду при включенной мешалке, снижают температуру растворителя до 95^oC и в реактор через большую воронку с широким выходным отверстием вносят небольшими порциями составные компоненты в той последовательности, как они перечислены в таблице. Каждый компонент вносят после растворения предыдущего. Растворимость их контролируют визуально путем взятия пробы в стерильный химический стакан или в мензурку в объеме 300-500 мл. При наличии в пробе нерастворимых компонентов, соблюдая стерильность, пробу выливают в реактор и продолжают размешивать. Указанное в табл. 4 время, необходимое для растворения каждого компонента, колеблется в зависимости от объема серии: при большем объеме серии требуется больше времени для растворения. Розлив препарата проводят при включенной мешалке при температуре 60.55^oC.

Фасовка препарата. Готовый левоэритроциклин, соблюдая стерильность, с помощью дозатора разливают в стерильные флаконы. Первые порции препарата (3-5 л) разливают через лавсановый фильтр (при отсутствии лавсана используют марлю медицинскую). С этой целью на канюлю дозатора после обработки ее спиртовым факелом, резиновым кольцом закрепляют стерильную четырехслойную лавсановую ткань. Флаконы закрывают с помощью пинцета в пламени горелки стерильными резиновыми пробками и закатывают металлическими колпачками и ставят на донышко (не кантовать). Допускается погрешность при расфасовке ±5.

а). Стабильность физико-химических свойств препарата. Определяли однородность, цветность, прозрачность, появление неразбивающегося /при Т^o 40.50^oC/ при встряхивании осадка, разложение на фракции /при Т^o 20.50^oC/. Критерии оценки физико-химических свойств сравнивали с исходными через 1, 6, 12 мес. В табл. 5 приведены результаты: в пределах срока годности препарат стабильный.

б). Безвредность (токсичность) проверяли в соответствии со статьей "Испытание на токсичность" по ГФХ1, с. 182, а также по методу Кербера. На мышах устанавливали: максимально переносимую дозу, ЛД₅₀, ЛД₁₀₀ препарат вводили подкожно в области спины. В дозе 0,05 мл левоэритроциклина-2, разбавленного стерильным изотоническим раствором (0,9%) натрия хлорида до объема 0,5 мл, токсического действия не установлено. Тест-доза левоэритроциклина-2 0,05 мл 5 тыс.мкг /мышь/. При разработке НТД на левоэритроциклин: ТУ, регламента на изготовление и наставления по применению следует учитывать результаты испытания на токсичность. Данные приведены в табл. 6.

В). Стерильность. Контролировали на бактерийную и грибную контаминацию в соответствии с требованиями ГФХ1, с. 187 "Испытание на стерильность" путем высева на МПБ, МПА и среду Сабуро. В табл. 7 приведены результаты, свидетельствующие о стерильности левоэритроциклина-2.

Тетрациклиновые антибиотики контролировали микробиологическим методом диффузии в агар с тест-культурой Бациллюс субтилис Л₂ (споры) по общепринятой методике (ГФХ1, в 2, с. 187 "Методы микробиологического контроля лекарственных средств". Массовую долю (содержание и стабильность) левомицетина контролировали методом нитритометрии (ГФХ1, с. ). Содержание эритромицина в левоэритроциклине-2 определяли микробиологическим методом диффузии в агар- с тест-культурой Бациллюс субтилис Л₂. Метод основан на сравнении величин зон угнетения роста тест-культуры, определенными разведениями левоэритроциклина-2 и аналогичными концентрациями стандарта эритромицина.

Результаты испытания приведены в табл. 8.

Предлагаемый антибактериальный препарат и способ его получения позволяет продлить срок использования препарата до 12 мес без снижения его эффективности по сравнению с прототипом Ветеринарная практика снова имеет возможность использовать высокоэффективный антибактериальный препарат при многих болезнях сельхоз. животных.

Использование: в ветеринарии. Сущность изобретения: препарат состоит из поливинилпирролидона медицинского, полиэтиленоксида синтетического высокомолекулярного, анестезиружего средства, например новокаина, левомицетина, антибиотика тетрациклиновой группы и эритромицина основания, растворителя димексида, скомплексованных в форме гидрофильно-адсорбционного сплава при следующем соотношении компонентов, мас.%: поливинилпирролидон 2-6, полиэтиленоксид 10-20, новокаин или другое анестезирующее средство 0,5-1,5, левомицетин 2-6, окситетрациклин или другой тетрациклиновый антибиотик 1-З, эритромицин основание 2-6 и димексид до 100. Препарат получают в реакторе или другом пригодном аппарате путем растворения компонентов в горячем димексиде последовательно: поливинилпирролидон, полиэтиленоксид, анестетик, левомицетин, тетрациклин гидрохлорид /или другой тетрациклиновый антибиотик/, эритромицин основание. Растворение ведут при снижающемся температурном режиме. 2 с.п. ф-лы, 8 табл.

1. Актибактериальный препарат, содержащий левомицетин, эритромицин, антибиотик тетрациклинового ряда, поливинилпирролидон и растворитель, отличающийся тем, что в качестве растворителя препарат содержит димексид и дополнительно полиэтиленоксид с молекулярной массой 3000 6000 и новокаин или другое анестезирующее средство при следующем соотношении компонентов, мас.

Поливинлпирролидон 2 6
Полиэтиленоксид с молекулярной массой 3000 6000 10 20
Новокаин или другое анестезирующее средство 0,5 1,5
Левомицетин 2 6
Окситетрациклин или другой тетрациклиновый антибиотик 1 3
Эритромицин 2 6
Димексид До 100
2. Способ получения антибактериального препарата путем растворения левомицетина, эритромицина, антибиотика, тетрациклинового ряда и поливинилпирролидона в растворителе, отличающийся тем, что в качестве растворителя используют димексид и дополнительно полиэтиленоксид и новокаин или другое анестезирующее средство при следующем соотношении компонентов, мас.

Поливинилпирролидон 2 6
Полиэтиленоксид 10 20
Новокаин или другое анестезирующее средство 2 6
Левомицетин 2 6
Окситетрациклин или другой антибиотик тетрациклинового ряда 1 3
Эритромицин 2 6
Димексид До 100
причем сначала в димексиде растворяют поливинилпирролидон и полиэтиленоксид и стерилизуют паровым методом, а затем последовательно растворяют при температуре 90 95^oС новокаин или другое анестезирующее средство и левомицетин, а затем при снижении температуры до 62 65^oС - окситетрациклин или другой антибиотик тетрациклинового ряда, при температуре 60 62^oС эритромицин.