АНТРАЦИКЛИНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ И ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ КИСЛОТНО-АДДИТИВНЫЕ СОЛИ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ДИИОДОПРОМЕЖУТОЧНОЕ СОЕДИНЕНИЕ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1997 года по МПК C07H15/252 C07C43/174 

Описание патента на изобретение RU2100366C1

Изобретение относится к антрациклиновым гликозидам, способам их получения и фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения.

Изобретение обеспечивает новые антрациклиновые гликозиды общей формулы A

в которой 3'-атом азота включен в 2-алкокси-4-морфолиниловое кольцо;
X линейная или разветвленная C1-C6-алкильную группа или бензильный радикал -CH2C6H5;
2" -углеродный атом, имеющий (S)- или (R)-конфигурацию, а также фармацевтически приемлемые кислые соли присоединения на их основе. Предпочтительной солью является соль хлористоводородной кислоты гидрохлорид.

Морфолино-антрациклины являются хорошо известными соединениями, проявившими на экспериментальных опухолях мышей обнадеживающую противоопухолевую активность (Acton E.W. Bioactive Molecules. I.W.Lown Elveiser. 1988, т.6, с. 55-101). Среди них 2"-метокси-4-морфолинилантрациклины (X=OCH3) уже были заявлены (патент США A-4, 672057, кл. A 61 K 31/70). Эти соединения были получены согласно способу восстановительного алкилирования с использованием хирального диальдегида. Согласно способу настоящего изобретения замещенные морфолиниловые кольца получают путем бис-алкилирования 3-аминогруппы антрациклинов новыми хиральными 1,5-дииодо-2-алкокси- или бензилоксипроизводными, включенными в рамки изобретения.

Предпочтительные антрациклиновые гликозиды общей формулы A включают: A 1: -3'-деамино-3-(2")(S)(бензилокси-4"-морфолинил)-доксорубицин (X=CH2C6H5); A 2: -3'-деамино-3'=(2")(S)-(этокси-4"-морфолинил)-доксорубицин (X=C2H5); A 3: -3'-деамино-3'-(2")(R)-(изопропилокси-4"-морфолинил) доксорубицин (X= CH(CH3)2); A 4: -3'-деамино-3'-(2")(S)-(метокси-4"-морфолинил)доксорубицин (X= CH3); A 5:-3'-деамино-3'-(2")(R-метокси-4"-морфолинил)-доксорубицин (X= CH3) и хлористоводородные соли на их основе. Соединения могут иметь (S) или (R) конфигурацию у атома углерода C-2" морфолинового кольца.

Новые антибиотики на основе антрациклиновых гликозидов настоящего изобретения, т. е. те, которые представлены общей формулой A, получают путем создания замещенного морфолинилового кольца на сахарной группировке антрациклинового гликозида доксорубицина общей формулы(B)

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает способ получения антрациклинового гликозида формулы (A) или фармацевтически приемлемой кислой соли присоединения на его основе, который включает следующие стадии: (i) взаимодействие доксорубицина или кислой соли присоединения на его основе, например, гидрохлорида с дииодосодержащим соединением общей формулы (C)

в которой X определен выше; и (ii) если в этом есть необходимость, превращение антрациклинового гликозида формулы (A) в фармацевтически приемлемую кислую соль присоединения на его основе.

Алкилирование C-3'-аминогруппы доксорубицина или соли доксорубицина обычно проводят в стадии (i) в полярном апротонном растворителе и в присутствии сухого органического основания, такого как триэтиламин. Реакцию обычно проводят при комнатной температуре в течение 8 24 ч. Атом углерода C-2, несущий OX- группу, в дииодосодержащем соединении может иметь (S)- или (R)-конфигурацию. В предпочтительном варианте, доксорубицин или гидрохлорид доксорубицина, растворенный в полярном апротонном растворителе, взаимодействует при комнатной температуре и в присутствии сухого органического основания с дийодосодержащим соединением общей формулы (C), образуя соответствующее морфолинилдоксорубициновое производное формулы (A). После очистки на колонке из силикагеля с использованием в качестве элюирующего растворителя смеси метиленхлорид-метанол, взятой в объемном соотношении 97:5, его выделяют в виде гидрохлорида, обработав метанольным раствором сухого хлористого водорода. Чистый 2"/R/-[(C1-C6)алкокси или бензилокси]-антрациклиновый гликозид формулы (A) либо его соль, или чистый 2''/S/-[(C1-C6)алкокси или бензилокси] -антрациклиновый гликозид формулы (A) либо его соль могут быть обеспечены таким образом согласно способу настоящего изобретения.

Изобретение также обеспечивает способ получения оптически чистого дийодосодержащего соединения формулы (C), исходя из предшественника сахара общей формулы (S), полученного из L-арабинозы

в которой X имеет значения, определенные выше.

Этот способ включает (a) подвержение периодатному окислению соединения формулы (S')

в которой X определен выше; (b) восстановление полученного таким образом соединения формулы (D')

в которой X определен выше; (c) сульфирование полученного таким образом дигидроксипроизводного формулы (E)

в которой X определен выше; и (d) иодирование сульфированного производного, полученного таким образом.

Для получения дииодосодержащих соединений формулы (C) 1-замещенные сахара S', полученные в соответствии со стандартными методиками (Methods Carbohydrate Chemistry. Acad. Press. Т. 1. 1962), сначала преобразуются в диальдегидные производные D'. Обычно в качестве исходного материала используют L-арабинозу. Она подвергается взаимодействию со спиртом X-OH, образуя при этом соединение формулы (S'): диальдегид-производные могут быть получены путем периодатного окисления водных растворов с последующим восстановлением в 1,5-дигидрокси-2-алкокси-или бензилокси-3-оксапентан E1, используя в качестве восстановителя такие вещества, как борогидрид натрия или цианоборогидрид натрия при pH 6,5 и проводя восстановление в смеси воды и метанола.

Полученные в результате дигидросоединения E1 сульфируют в положении 1- и 5-гидроксильных групп, используя для этих целей обычно применяемый раствор пара-толуолсульфохлорида в пиридине, сульфирование проводят при 4oC, при этом образуются сульфониловые эфиры формулы F, из которых получают дииодопроизводные C после обработки йодидом калия или натрия в апротонном растворителе, таком как метилэтилкетон, при 85oC в течение 1-2 дней. Последовательность этих реакций не влияет на хиральность в положении C-2 дииодопроизводных C, которая совпадает с хиральностью исходных сахаров - S.

Предпочтительный вариант способа, осуществленного согласно настоящему изобретению, проиллюстрирован реакционной схемой (см. в конце текста).

Из соединений, согласно изобретению, могут приготавливаться фармацевтические композиции, включающие фармацевтически приемлемые носители или разбавители и в качестве активного ингредиента антрациклиновый гликозид формулы (A) либо его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль. Могут быть использованы стандартные носители или разбавители. Композиция может готовиться и вводиться, например, внутривенно, согласно традиционным методам.

Антрациклиновые гликозиды формулы (A) и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли являются противоопухолевыми средствами. Они могут быть использованы для лечения больных с опухолями путем введения их терапевтически активного количества. Соединения могут быть использованы для ингибирования роста опухолей, и в терапевтических дозах эти соединения нетоксичны.

Пример 1. Получение 1,5-ди(пара-толуолсульфонил)окси-2(S)-бензилокси-3-окса-пентана (F1). L-Арабинозу (3 г, 0,22 моль) и бензиловый спирт (15 мл) нагревали при перемешивании в присутствии кислой формы Dowex 50W х 2 (2 г). Через 4 ч смесь охладили и отфильтровали. Растворитель отгоняли при пониженном давлении, и из ацетона выделили 3,5 г 1-бензил-β-L-арабино-пиранозида S'.

Провели тонкослойную хроматографию на пластинке из Кизельгура F254 (Merck), в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метилен-хлорид(метанол) вода 120/20/2, Rf 0,4 [α]D+215o (с=1% воды).

1-Бензил-β-L-арабинопиранозид S1 (3,48 г, 0,0145 моль) растворили в воде (100 мл) и обработали периодатом натрия (5,6 г, 0,026 моль), реакцию проводили при 0oC в течение 2 ч. Затем добавили хлорид бария и добавлением карбоната бария довели pH смеси до 7, отфильтровали и промыли смесь водой. Водную фракцию сконцентрировали при пониженном давлении до сиропообразного состояния и проэкстрагировали ацетонитрилом (50 мл). Органическую фазу разбавили смесью метанола (20 мл) и воды (10 мл), обработали натрий цианоборогидридом (0,3 г), растворенным в воде (5 мл). Через 15 мин pH смеси довели до 7, добавляя Dowex 50 W х 2, и отфильтровали. Растворители удалили при пониженном давлении и получили 1,5-дигидрокси-2-(S)-бензилокси-3-оксапентан E1 (2,6 г, выход 85%).

Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура F254 (Merck), в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метилен-хлорид/метанол 10/1. Rf 0,28. Соединение E1 (2,6 г) растворили в сухом пиридине и добавили пара-толуолсульфохлорид (6,67 г). Смесь оставили на ночь при 0oC, затем вылили в ледяную воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промыли водой, отделили, высушили над безводным сульфатом натрия и отфильтровали. Растворитель отогнали при пониженном давлении и получили в результате 1,5-ди(пара-толуолсульфонил)окси-2(S)бензилокси-3-окса-пентан F1 (4,3 г, выход 68%).

Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура F254 (Merck), в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метиленхлорид/ацетон 98/2, Rf 0,55.

Параметры ЯМР-спектра (CDCl3, 400 мГц) d: 2,42 (s, 6Н, два CH Tc); 3,69 3,65 (два dt, J=4,7, 11,7 Гц, 2Н, Tc-OHC2CH2O); 3,94 (два, dd, J=5,3, 10 Гц, 2Н, OCH-CH2-OTc); 4,08 (t, J=4,7 Гц, 2Н, Tc-O-CH2CH2-O); 4,46, 4,56 (два d, J= 11,7 Гц, 2Н, OCH2-Фен); 4,72 (t, J=5,3 Гц, 1Н, O-CH-CH2-OTc); 7,2-7,8 (m, 13Н, ароматика).

Пример 2. Получение 1,5-дийодо-2(S)-бензилокси-3-окса-пентана (C1). Соединение F1 (4,3 г, 8,3 ммоль), полученного в примере 1, было растворено в метилэтилкетоне (50 мл) с добавлением йодил натрия (7,4 г, 49 ммоль). Смесь выдержали при 95oC в течение 24 ч. После этого растворитель удалили при пониженном давлении, а остаток проэкстрагировали н-гексаном. Органический слой сконцентрировали до сиропообразного состояния и получили соединение C1 (3,5 г, выход 90%).

Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура F254 (Merck), в качестве элюирующего растворителя использовали смесь н-гексан/этилацетат 10/0,5, Rf=0,34.

Параметры ЯМР-спектра (CDCl3, 400 Мгц) d: 3,27 (t, J=6,8 Гц, 2Н, J= CH2-CH2-O); 3,30 (d, J= 5,5 Гц, 2Н, O-CH-CH2-J); 3,84 (m, 2Н, J-CH2CH2O); 4,64, 4,74 (два d, J=11,7 Гц, 2Н, O-CH2-фен); 4,81 (t, J=5,5 Гц, 1Н, O-CH-CH2-J); 7,3-7,5 (m, 5Н, ароматика).

Пример 3. Получение 3'-деамино-3'[2-(S)-бензилокси-4-морфолинил]доксорубицина (A1). К раствору гидрохлорида доксорубицина (0,5 г, 0,86 ммоль) в сухом диметилформамиде (20 мл) добавили 1,5-дийодо-2(S)-бензилокси-3-окса-пентан (C1) (3,5 г, 7,54 ммоль) и сухой триэтиламин (3,6 мл, 2,6 ммоль). Смесь выдержали при комнатной температуре в течение 36 ч, а затем вылили в воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. После стандартной обработки сырой продукт очистили на колонке из кремневой кислоты, использовав в качестве элюирующего растворителя смесь метиленхлорид/метанол 97/5, получили после обработки безводным хлористым водородом в метаноле 0,3 г (выход 46%) соединения A1 в виде хлористоводородной соли.

Прохроматографировали на пластине из Кизельгура F254 (Merck), используя в качестве элюирующей системы смесь метиленхлорид/метанол 10/1, Rf=0,6; ПА-МС: м/е 756 (M+).

Параметры ЯМР-спектра свободного основания (CDCl3, 200 МГц) d: 1,37 (d, J= 6,6 Гц, 3Н, 5'=CH3); 1,76 (m, 2Н, 2'-CH2); 2,14 (dd, J=3,9, 14,8 Гц, 1Н, 8ах-H); 2,2-2,7 (m, 6Н, CH2-N-CH2, q-H, 3'-H); 3,00 (d, J=18,8 Гц, 1Н, 10ах-H); 3,55, 4,00 (два m, 2Н, O-CH2-CH2N); 3,68 (s, 1Н, 4'-H); 3,94 (q, J= 6,6 Гц, 1Н, 5'-H); 4,08 (s, 3Н, OCH3); 4,51, 4,77 (два d, J=12,1 Гц, 2Н, OCH2-Фен); 4,65 (dd, J=2,6, 4,0 Гц, 1Н, OCH, OCH2Фен (CH2N); 4,71 (s, 1Н, COCH2OH); 5,28 (dd, J=2,4, 3,8 Гц, 1Н, 7-H); 5,54 (m, 1Н, 1'-H); 7,2-8,1 (m, 8Н, ароматические Н); 13,22 (s, 1Н, 11-OH); 13,95 (s, 1Н, 6-OH).

Пример 4. Получение 1,5-дийодо-2(S)-этокси-3-окса-пента(C2). Соединение C2 получили, использовав в качестве исходного материала 2 г L-арабинозы, которую подвергли ряду последовательных операций, описанных в примерах 1 и 2.

1-Этил-a-L-арабинопиранозид (S2): [α]D+233,5o (с=1% воды); 1,5-дигидрокси-2(S)-этокси-3-оксапентан(E2).

Тонкослойная хроматография на пластине из Кизельгура F254 (Merck), элюирующий растворитель метиленхлорид/метанол 10/1 Rf=0,33.

1,5-Ди-(пара-толуолсульфонил)окси-2(S)-этокси-3-оксапентан(F2): ТСХ на пластине из Кизельгура F254 (Merck), элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 98/2, Rf 0,56.

Данные ЯМР-спектра (CDCl3, 200 Мгц) δ: 1,11 (t, J=0,7 Гц, 3Н, OCH2CH3); 2,43 (s, 6Н, два CH3-Tc); 3,44, 3,58 (два dg, J=7,0 9,4 Гц, 2Н, OCH2CH3); 3,68 (m, 2Н, O-CH2-CH2-OTc); 3,89 (d, J=5,4, 2Н, O-CH-CH2 Tc); 4,10 (t, J= 4,8 Гц, 2Н, OCH-CH2OTc); 4,61 (t, J=5,4 Гц, 1Н, O-CH-CH2OTc); 7,3-7,8 (m, 8Н, ароматические Н).

1,5-Дийодо-2(S)-этокси-3-окса-пента (C2).

ТСХ на пластине из Кизельгура F254 (Merck), элюирующий растворитель н-гексан/этилацетат 10/0,5 Rf 0,37.

Параметры ЯМР-спектра (CDCl3, 200 МГц) d: 1,24 (t, 7,0 Гц, 3Н, OCH2CH3); 3,23 (d, J=5,6 Гц, 2Н, J-CH2CH-O); 3,27 (t, J=6,8 Гц, 2Н, J-CH2CH2-O); 3,58, 3,77 (два dq, J=7,0, 9,3 Гц, 2Н, OCH2CH3); 3,78, 3,87 (два dt, J=6,8, 10,6 Гц, 2Н, J-CH2-CH2-O); 4,70 (t, J=5,6 Гц, 1Н, O-CH-CH2-J).

Пример 5. Получение 3'-деамино-3'[2(S)-этокси-4-морфолинил]доксорубицина-(A2). 0,5 г гидрохлорида доксорубицина запустили в реакцию с соединением C2 (3 г) согласно той же реакционной схеме, которая была представлена в примере 3. В результате получили 0,28 г соединения A2 в виде хлористоводородной соли.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель-метиленхлорид/метанол 10/1, Rf=0,58, ПА-МС: м/е 694 (M+).

Параметры ЯМР-спектра свободного основания (CDCl3, 200 МГц) d: 1,16 (t, J= 7,0 Гц, 3Н, OCH2CH3); 1,36 (d, J=6,4 Гц, 3Н, 5'-CH3); 1,7-1,8 (m, 2Н, 2'-CH2); 2,16 (dd, J=4,1, 14,7 Гц, 1Н, 8ax-H); 2,3-2,6 (m, 6Н, CH2-N-CH2); 8eq-H, 3'-H); 3,02 (d, J=18,8 Гц, 1Н, 10ax-H); 3,26 (dd, 1,9, 18,8 Гц, 1Н, 10eq-H); 3,46, 3,78 (два dq, J=7,0, 9,8 Гц, 2Н, OCH2CH3); 3,53, 3,93 (два m, 2Н, OCH2CH2); 3,68 (s, 1Н, 4'-H); 3,93 (q, J=6,4 Гц, 1Н, 5'-H); 4,08 (s, 3Н, OCH3); 4,56 (dd, J=2,3, 4,7 Гц, 1Н, OCH/OCH2CH3)CH2N); 4,72 (s, 1Н, 9-OH); 4,74 (s, 2Н, COCH2OH); 5,30 (m, 1Н, 7-H); 5,55 (m, 1Н, 1'-H); 7,3-8,1 (m, 3Н, ароматические Н); 13,25 (s, 1Н, 11-OH); 13,97 (s, 1Н, 6-OH).

Пример 6. Получение 1,6-дийодо-2(R)изопропилокси-3-окса-пента(C3). Озаглавленное соединение G3 получили, используя в качестве исходного материала 3 г L-арабинозы в той же последовательности реакций, которые описаны в примерах 1 и 2.

1-Изопропил-b-L-арабинопиранозид (S3): [α]D+225o (вода); 1,5-дигидрокси-2(R)-изопропилокси-3-оксапентан (E3).

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 10/1, Rf 0,36.

1,5-Ди-(пара-толуолсульфонил)окси-2(R)-изопропилокси-3-окса-пентан (F3).

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 98/2, Rf 0,55.

Параметры ЯМР-спектра (CDCl3, 200 МГц) δ: 1,05, 1,10 (два d, J=6,2 Гц, 6E, CH(CH3)2); 2,42 (два s, 6Н, CH3-Tc); 3,64 (два m, 2H, Tc-O-CH2CH2-O); 3,76 (m, 1H, CH(CH3)2); 3,84 (m, 2H, O-CH-CH2-OTc); 4,08 (t, J=5,6 Гц, 2Н, Tc-O-CH2-CH2-O); 7,3-7,8 (m, 8Н, ароматические Н).

1,5-Дийодо-2(R)-изопропилокси-3-окса-пентан (C3).

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель - н-гексан/этилацетат 10/0,5, Rf 0,40.

Параметры ЯМР-спектра (CDCl3, 200 МГц) d: 1,20, 1,22 (два d, J=6,4 Гц, 6Н, CH(CH3)2); 3,24 (d, J=5,6 Гц, 2Н, O-CH-CH2-J); 3,28 (t, J=6,7 Гц, 2Н, J-CH2CH2-O); 3,6-3,8 (m, 2H, J-CH2-CH2-O); 3,94 (m, 1H, CH(CH3)2); 4,76 (t, J=5,6 Гц, 1H, O-CH-CH2-J).

Пример 7. Получение 3'-деамино-3'-[2(R)-изопропилокси-4-морфолинил] доксорубицина A3. 0,5 г доксорубицина запустили в реакцию с соединением C3 согласно процедуре, изложенной в примере 3, в результате получили 0,21 г озаглавленного соединения A3 в виде хлористоводородной соли.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель метиленхлорид/метанол 10/1, Rf=0,55; ПА-МС: м/е 708 (M+).

Параметры ЯМР-спектра свободного основания (CDCl3, 200 МГц) d: 1,09, 1,016 (два d, J=6,0 Гц, 6Н, CH(CH3)2); 1,36 (d, J=6,6 Гц, 3Н, 5-CH3); 1,86 (m, 2H, 2'-CH2); 2,15 (dd, J= 4,0, 14,9 Гц, 1Н, 8ax-H); 2,3-2,8 (m, 6H, CH2NCH2, 8eq-H 3'-H); 2,97 (d, J=28,8 Гц, 1Н, 10ax-H); 3,26 (d, J=18,8 Гц, 1Н, 10eq -H); 3,54 (m, 1H, O-CH/H/CH2N); 3,74 (s, 1H, 4-H); 3,81-4,1 (m, 3H, OCH(H)CH2N 5'-H, OCH(CH3)2); 4,08 (s, 3H, OCH3); 4,66 (c, 1H, 9-OH); 4,68 (dd, J= 2 Гц, 4,9 Гц, 1H, OCH[OCH(CH3)2]CH2N); 4,75 (s, 2H, COCH2OH); 5,28 (m, 1H, 7-H); 5,55 (m, 1H, 1'-H); 7,3-7,8 (m, 3H, ароматические Н); 13,24 (s, 1H, 11-OH); 13,97 (s, 1H, 6-OH)
Пример 8. 1,5-Дигидрокси-2(S)-метокси-3-окса-пентан (E4). 1,5-Диоксо-2(S)-метокси-3-окса-пентан(D4) (1,5 г, 11 ммоль), полученный согласно методике (Methods Carbohydrate Chemistry. -Acad.Press. 1962, т.1, с.445), растворили в смеси воды (10 мл) и метанола (10 мл), обработали натрийборогидридом (0,1 г), растворенным в 2 мл воды. Через 20 мин pH раствора довели до pH 7, добавив кислую форму смолы Dowex 50 Wх2, отфильтровали и растворитель удалили при пониженном давлении, в результате получили 1,4 г (выход 93%) озаглавленного соединения.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель метиленхлорид/метанол 10: 1, коричневое пятно при Rf 0,24 после нагревания пластины с хроматограммой, предварительно обработанной (опрысканной) серной кислотой.

Параметры ЯМР-спектра (200 МГц, ДМСО-d5) d: 3,26 (s, 3H, OCH3); 3,4-3,6 (m, 6H, -CH2-CH2-O-CH-CH2-); 4,37 (t, J=5,4 Гц, 1H, O-CH-O); 4,40 (bm, 2H, HO-CH2-CH2-CH-CH2-OH).

Пример 9. 1,5-Ди(пара-толуолсульфонил)окси-2(S)-метокси-3-окса-пентан (F4). 1,5-Дигидрокси-2(S)-метокси-3-окса-пентан (E4) (1,4 г, 10,3 ммоль), полученного в соответствии с описанием примера 8, растворили в сухом пиридине (10 мл) и обработали при 0oC паратолуолсульфонил-хлоридом (6,4 г, 0,034 ммоль). Смесь выдержали при 4oC в течение ночи, затем вылили ее в смесь воды и льда и, наконец, проэкстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промыли водой, отделили, высушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали. Растворитель удалили при пониженном давлении. Сырой продукт прохроматографировали на колонке, заполненной кремниевой кислотой, используя метиленхлорид в качестве элюирующего средства, получив 2,8 г (выход 62%) чистого производного, название которого дано в заголовке.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель метиленхлорид/ацетон 95:5, коричневое пятно при Rf 0,55 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой.

Параметры ЯМР-спектра (200 МГц, CDCl3) d: 2,44 (s, 6H, CH3-Фен); 3,27 (s, 3H, OCH3); 3,69 (m, 2H, SO2OCH2CH2O); 3,90 (m, 2H, SO2OCH2-CH-O); 4,11 (m, 2H, SO2OCH2CH2-O); 4,56 (t, J=5,3 Гц, 1H, -O-CH-CH2); 7,3-7,8 (m, 8H, ароматические H).

Пример 10. Получение 1,5-дийодо-2(S)-метокси-3-окса-пентана C4 (1,6 г, 3,6 ммоль). 1,5-Ди(пара-толуолсульфонил)окси-2(S)-метокси-3-окса-пентана F4, полученного в описанном примере 9, растворили в метилэтилкетоне (30 мл) и обработали йодидом натрия (3,04 г, 20,2 ммоль) при 85oC в течение двух дней. После этого растворитель отогнали в вакууме, остаток разбавили н-гексаном (50 мл) и водой. Органический слой отделили, высушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали. Растворитель отогнали при пониженном давлении, в результате получили 1,5-дийодо-2(S)-метокси-3-окса-пентан C4 (1,2 г, выход 86%).

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель-метиленхлорид, коричневое при Rf 0,54, после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно обработанной серной кислотой.

Данные ЯМР-спектра (200 МГц, CDCl3) d: 3,15 (m, 4H, J-CH2-CH2-OCH-CH2-J); 3,40 (s, 3H, OCH3); 3,80 (m, 2H, J-CH2CH2-O), 4,62 (t, J=5,6 Гц, 1H, O-CH-CH2).

Пример 11. Получение 3'-деамино-[2"(S)-метокси-4"-морфолинил]-доксорубицина A4. К раствору гидрохлорида доксорубицина (80 мг, 0,138 ммоль) в сухом диметилформамиде (4 мл) добавили 1,5-дийодо-2(S)-метокси-3-оксапентан (C4, 0,8 г, 2,0, ммоль) и триэтиламин (0,056 мл, 0,388 ммоль). Реакционную смесь выдержали при комнатной температуре при перемешивании в течение 36 ч, затем смесь вылили в воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. После стандартной обработки сырой продукт очистили на колонке из кремниевой кислоты, используя в качестве элюирующего растворителя смесь метиленхлорид/метанол 97,5/2,5, в результате получили после обработки метанольным раствором безводного хлористого водорода 40 мг (выход 45%) озаглавленного соединения в виде хлористоводородной соли.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), использовав в качестве элюирующей системы метиленхлорид/метанол 19/1, Rf 0,15.

Параметры ЯМР-спектра (400 МГц, CDCl3) свободного основания d: 13,98 (s, 1H, 6-OH); 13,27 (s, 1H, 11-OH); 8,03 (dd, J=1,1, 7,7 Гц, 1H, 1-H); 7,78 (dd, J= 7,7, 8,6 Гц, 1H, 2-H); 7,39 (dd, J=1,1, 8,6 Гц, 1H, 3-H); 5,55 (m, 1H, 1'-H); 5,30 (dd, J=2,1, 4,1 Гц, 1H, 7-H); 4,74 (d, J=4,5, 14-CH2-OH); 4,74 (s, 1H, 9-OH); 4,49 [dd, J=2,6, 4,1 Гц, 1H, NCH2-CH/OCH3/O] 4,08 (s, 3H, 4-OCH3); 3,94 (q, J=6,6 Гц, 1H, 5'-H); 3,93 [m, 1H, NCH2CH/H/O] 3,67 (m, 1H, 4'-H); 3,54 (m, 1H, NCH2CH/H/O); 3,38 (s, 3H, NCH2CH-OCH3); 3,27 (dd, J= 19,18.8 Гц, 1H, 10-H-eq); 3,04 (d, J=18,8 Гц, 1H, 10-Hax); 3,00 (t, J=4,5 Гц, 1H, CH2OH); 2,60 (dd, J=4,1, 11,4 Гц, 1H NCH/H/CHOCH3); 2,6-2,5 (m, 3H, NCH/H/CHOCH3, NCH2CH2O); 2,4-2,3 (m, 2H, 8-Heq, 3'-H); 2,15 (dd, J=4,1, 14,7 Гц, 8-Hax); 1,76 (m, 2H, 2'-CH2); 1,26 (d, J=6,6 Гц, 3H, 5'-CH3).

Пример 12. Получение 1,5-дигидрокси-2(R)-метокси-3-окса-пентата E5. Озаглавленное соединение было получено в соответствии с процедурой, описанной в примере 8, с использованием в качестве исходного материала 1,5-диоксо-2(R)-метокси-3-окса-пентана D5, который в свою очередь может быть получен в соответствии с методиками (Methods Carbohydrate Chemistry. - Acad.Press. 1962, т.1, с. 44).

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель -метиленхлорид/метанол, коричневое пятно при Rf 0,24 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой.

Пример 13. Получение 1,5-ди-(пара-толуолсульфонил)окси-2(R)-метокси-3-окса-пентана F5. 1,5-Дигидрокси-2(R)-метокси-3-окса-пентан E5, полученный в соответствии с процедурой, описанной в примере 12, был переведен в озаглавленное соединение F5 согласно процедуре, описанной в примере 9.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель -метиленхлорид/ацетон 95/5, коричневое пятно при Rf 0,55 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно обработанной (опрысканной) серной кислотой.

Пример 14. Получение 1,5-дийодо-2(R)-метокси-3-окса-пентана C5. 1,5-Ди(пара-толуолсульфонил)окси-2(R)-метокси-3-окса-пентан F5, полученный в соответствии с примером 13, был превращен в дийодопроизводное C5 в соответствии с процедурой, описанной в примере 10.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель - метиленхлорид, коричневое пятно при Rf 0,54 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой.

Пример 15. Получение 3'-деамино-[2"(R)-метокси-4"-морфолинил]-доксорубицина A5. Озаглавленное соединение было получено путем конденсации гидрохлорида доксорубицина с 1,5-дийодо-2(R)-метокси-3-окса-пентаном C5, полученным как описано выше в соответствии с процедурой примера 11.

ТСХ на Кизельгуре F254 (Merck), элюирующий растворитель -метиленхлорид/метанол 19/1, Rf 0,13.

Параметры ЯМР-спектра свободного основания (400 МГц CDCl3) d: 13,97 (s, 1H, 6-OH); 13,25 (s, 1H, 11-OH); 8, 03 (dd, J=1,1, 7,7 Гц, 1H, 1-H); 7,78 (dd, J=7,6, 7,7 Гц, 1H, 2-H); 7,39 (dd, J=1,1, 7,6 Гц, 1H, 3-H); 5,53 (d, J= 3,4 Гц, 1H, 1'-H); 5,29 (dd, J=2,5, 4,1 Гц, 1H, 7-H); 4,75 (s, 2H, 14-CH2OH); 4,71 (s, 1H, 9-OH); 4,46 (dd, J=2,6, 4,7 Гц, 1H, NCH2-CH(OCH3(O); 4,08 (s, 3H, 4-OCH3); 3,93 (q, J=6,6 Гц, 1H, 5'-H); 3,92 (m, 1H, NCH2CH/H/O); 3,70 (m, 1H, 4'-H); 3,56 (m, 1H, NCH2CH/H/O); 3,40 (s, 3H, NCH2CH-OCH3); 3,26 (dd, J=19, 19,9 Гц, 1H, 10-Heq); 3,03 (d, J=19,9 Гц, 1H, 10-Hax); 2,66 (dd, J=2,6, 11,4 Гц, 1H, NCH/H/CHOCH3); 2,53 (m, 1H, NCH/H/CH2O); 2,5-2,3 (m, 4H, NCH/H/CH2O, NCH/H/CHOCH3, 8-H-eq, 3'-H); 2,15 (dd, J=4,1, 14,7 Гц, 8-Hax); 1,8-1,7 (m, 2H, 2'-CH2); 1,36 (d, J=6,6 Гц 3H, 5'-CH3).

Биологическая активность 3'-деамино-[2"-(S)-метокси-4"-морфолинил доксорубицина A4 и 3'-деамино-[2"(R)-метокси-4"-морфолинил]доксорубицина A5.

Эти соединения были исследованы в отдельно взятой экспериментальной системе с целью определения их цитотоксичности и противоопухолевой активности на экспериментальных животных в сравнении с родственным препаратом Доксорубицином. Новые антрациклины оказались более цитотоксичными, чем родственный лекарственный препарат в отношении LoVo и LoVo доксорубицин-устойчивых клеточных линий (LoVo/Dx) (табл.1) и активны in vivo в отношении доксорубицин-устойчивых линий клеток.

Первоначальный скрининг in vivo был проведен на мышах BDF1, пораженных P388 Доксорубицин-устойчивой лейкемией Johnsen's (P388/Dx 105 клеток/мышь). Лекарство вводили внутривенно в первый день после инокуляции опухоли. Результаты приведены в табл.2. Оба соединения были активны и более действенны чем Доксорубицин.

Соединение A4 было также проверено на доксорубицин-устойчивых клетках P388 Schabel in vitro (табл. 3. ) и in vivo на мышах (BDF1/105 клеток на мышь). Лечение проводили путем внутривенного введения препарата в первый день после инокуляции опухоли (табл.4). Наконец, соединение 1-а было изучено на однородной опухоли, такой как опухоль молочной железы мышей/крыс и карциноме (Мх1) человека при пероральном и внутривенном введении препарата (табл. 5 и 6).

Похожие патенты RU2100366C1

название год авторы номер документа
КОНЪЮГАТЫ АНТРАЦИКЛИНА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ 1992
  • Франческо Анджелуччи[It]
  • Даниэла Руджери[It]
  • Стефаниа Стефанелли[It]
  • Антонио Суарато[It]
  • Лаура Берсани[It]
RU2107690C1
СВЯЗУЮЩИЙ АГЕНТ ДЛЯ БИОАКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ 1991
  • Франческо Анджелуччи
  • Лаура Берсани
  • Микеле Карузо
  • Марина Рипамонти
  • Даниэла Руджери
  • Антонино Суарато
RU2116087C1
АНТРАЦИКЛИНОВЫЙ ГЛИКОЗИД, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ 1992
  • Альберто Барджотти
  • Микеле Карузо
  • Даниэла Файарди
  • Антонино Суарато
  • Никола Монджелли
RU2118328C1
ПРОИЗВОДНЫЕ 3'-АЗИРИДИНО-АНТРАЦИКЛИНА, СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ 1994
  • Барджотти Альберто
  • Карузо Микеле
  • Гранди Мария
  • Рипамонти Марина
  • Суарато Антонио
RU2149163C1
АНТРАЦИКЛИН ГЛИКОЗИД И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 1992
  • Антонио Суарато[It]
  • Франческо Анджелуччи[It]
  • Альберто Барджотти[It]
  • Мария Гранди[It]
  • Габриэлла Пеццони[It]
RU2081878C1
ПРОИЗВОДНЫЕ АЗА-АНТРАЦИКЛИНОНА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ 1996
  • Микеле Карузо
  • Даниела Фьярди
  • Тициано Бандьера
  • Жаклин Лансен
  • Антонио Суарато
RU2159245C2
АНТРАЦИКЛИН ГЛИКОЗИДЫ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМИ СВОЙСТВАМИ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 1990
  • Антонино Суарато[It]
  • Франческо Анджелуччи[It]
  • Альберто Барджотти[It]
  • Мария Гранди[It]
  • Габриэлла Пеццони[It]
RU2043360C1
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ПОЛИМЕРСВЯЗАННЫЕ АНТРАЦИКЛИНЫ, ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ 1994
  • Франческо Ангелуччи
  • Мария Гранди
  • Антонино Сюарато
RU2145965C1
АНТРАЦИКЛИНОВЫЙ ГЛИКОЗИД И СПОСОБЫ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 1990
  • Франческо Ангелуччи[It]
  • Альберто Барджотти[It]
  • Даньела Файарди[It]
  • Стефаниа Стефанелли[It]
  • Антонио Суарато[It]
RU2073681C1
ПРОИЗВОДНЫЕ АНТРАЦИКЛИНОНА И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРИ АМИЛОИДОЗЕ 1995
  • Антонино Суарато
  • Жаклин Лансен
  • Микеле Карузо
  • Дарио Баллинари
  • Тициано Бандьера
RU2167661C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 100 366 C1

Реферат патента 1997 года АНТРАЦИКЛИНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ И ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ КИСЛОТНО-АДДИТИВНЫЕ СОЛИ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ДИИОДОПРОМЕЖУТОЧНОЕ СОЕДИНЕНИЕ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

Использование: в фармацевтической промышленности. Сущность изобретения: антрациклиновые гликозиды общей формулы A

где X - прямая или разветвленная C1-6 алкильная или бензильная группа; имеющие (S)- или (R)-конфигурацию при 2II - углеродном атоме, и дийдосоединение общей формулы C

где X - имеет указанное выше значение. Соединение A получают взаимодействием доксирубицина с дийодосоединением C, которое получают взаимодействием арабинозы со спиртом X-OH с последующим периодатным окислением полученного продукта; полученное диальдегидное производное формулы

восстанавливают в соответствующее дигидроксипроизводное с последующим сульфонированием и йодированием полученного сульфонированного производного. 2 с. и 5 з.п. ф-лы, 6 табл.

Формула изобретения RU 2 100 366 C1

1. Антрациклиновые гликозиды общей формулы А

где Х прямая или разветвленная С1 С6-алкильная или бензильная группа, которые имеют (S) или (R) конфигурацию при 2''-углеродном атоме,
и их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли.
2. Соединение по п. 1, где Х метил. 3. Соединение по п. 1, где Х С2 С6-алкил. 4. Соединение по п. 1, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений: 3'-дезамино-3'-[2''(S)-метокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его хлоргидрат, 3'-дезамино-3'-[2''(S) -бензилокси-4''-морфолинил]-доксорубицин и его хлоргидрат, 3'-дезамино-3'-[2''(S)-этокси-4''-морфолинил]-доксорубицин и его хлоргидрат, 3'-дезамино-3'-[2''(R)-изопропилокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его хлоргидрат и 3'-дезамино-3'-[2''(R) -метокси-4''-морфолинил]-доксорубицин и его хлоргидрат. 5. Способ получения антрациклиновых гликозидов общей формулы А по п. 1 или их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что доксорубицин или его кислотно-аддитивную соль подвергают взаимодействию с дииодосоединением формулы С

где Х прямая или разветвленная С1 С6-алкильная или бензильная группа,
и полученное основание антрациклингликозида формулы А, в случае необходимости, превращают в его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что процесс осуществляют в полярном апротонном растворителе при комнатной температуре и в присутствии сухого органического основания, полученное соответствующее морфолинил-доксорубициновое основание очищают на силикагельной колонке с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорид-метанол (97 5 об./об) и последнее превращают в его соль хлористо-водородной кислоты с помощью обработки метанольным безводным хлористым водородом. 7. Производные 1,6-дииодо-3-окса-пентана формулы

где Х прямой или разветвленный С1 С6-алкил или бензил.
8. Способ получения производных 1,6-дииодо-3-окса-пентана по п. 7, отличающийся тем, что арабинозу подвергают взаимодействию со спиртом
Х ОН,
где Х имеет указанные значения,
полученное при этом соединение общей формулы

где Х имеет указанные значения,
подвергают периодатному окислению с получением диальдегидного производного общей формулы

где Х имеет указанные значения,
которое подвергают восстановлению с получением дигидроксипроизводного общей формулы

где Х имеет указанные значения,
которое подвергают сульфонированию с последующим иодированием полученного сульфонированного производного.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют L-арабинозу, которую подвергают реакции со спиртом
Х ОН
где Х имеет значения, определенные в п. 8,
с получением таким образом соединения формулы

10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что дигидроксипроизводное сульфонируют п-толуолсульфонилхлоридом.

Приоритет по пунктам:
19.12.89 по п. 1 формулы, где Х метилрадикал, по пп. 2 и 4 формулы - соединение 3'-дезамино-3'-[2''(S)-метокси-4''-морфолинил]-доксорубицин и его гидрохлорид и 3'-дезамино-3'-[2''(R)-метокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его гидрохлорид, по пп. 5 9 формулы с учетом значения Х метилрадикал;
03.04.90 по п. 1 формулы, где Х прямой или разветвленный С2 - С6-алкил или бензилрадикал, по пп. 3 и 4 формулы соединения: 3'-дезамино-3'-[2''(S) -бензилокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его хлоргидрат, 3'-дезамино-3'-[2''(S)-этокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его хлоргидрат, 3'-дезамино-3'-[2''(R)-изопропилокси-4''-морфолинил] -доксорубицин и его хлоргидрат, по пп. 5 9 формулы для значений Х прямой или разветвленный С2 С6-алкил или бензилрадикал.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1997 года RU2100366C1

GB, патент, 2172594, кл
Способ восстановления хромовой кислоты, в частности для получения хромовых квасцов 1921
  • Ланговой С.П.
  • Рейзнек А.Р.
SU7A1
GB, патент, 2124224, кл
Способ восстановления хромовой кислоты, в частности для получения хромовых квасцов 1921
  • Ланговой С.П.
  • Рейзнек А.Р.
SU7A1
US, патент, 4672057, кл
Устройство для сортировки каменного угля 1921
  • Фоняков А.П.
SU61A1

RU 2 100 366 C1

Авторы

Альберто Барджотти[It]

Мариа Гранди[It]

Антонио Суарато[It]

Даниэла Фаиарди[It]

Даты

1997-12-27Публикация

1991-08-16Подача