СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА Российский патент 1998 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в кардиологии и терапии.

Известен способ прогнозирования течения ИБС по состоянию перекисного окисления липидов (ПОЛ) тромбоцитов (Кардиология. 1989. N 2. с.45-49). Описан также способ прогнозирования течения ИБС по уровню липидов крови ("Дислипопротеинемии и ИБС", глава 14.с. 228-237; "Атеросклероз". 1994. N 1. Т. 108. с. 103-110). Однако указанные выше способы не позволяют прогнозировать с достаточной точностью течение ИБС.

Известен также способ определения эффективности терапии и прогнозирования течения ИБС путем определения концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови (В. З. Данкин, А.Н.Закирова, В.Х.Ахметова и др. "перекиси липидов и атеросклероз". "Кардиология". 1980. N 7.с.96-98). Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату. Однако указанный способ недостаточно точен и эффективен, так как не позволяет определять резервную мощность общей антиоксидантной активности (АОА) крови до и после терапии ИБС.

Целью предлагаемого изобретения является повышение эффективности и точности прогнозирования течения ИБС. Указанная цель достигается техническим решением, представляющим собой определение концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови в динамике наблюдения и дополнительного определения лаг-периода, ХС ЛПВП и при увеличении концентрации МДА крови на начальном этапе лечения ИБС до 0,14-0,61 мкмоль/гОЛ, уровне ХС ЛПВП в пределах 0,92-1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6-9 мин прогноз течения ИБС считают способствующим переходу стенокардии напряжения ФК III-IV в ФК II-I, а при увеличении уровня МДА до 0,62-2,1 мкмоль/гОЛ, уровне ХС ЛПВП 0,61-0,91 ммоль/л, лаг-периоде 2-5,9 мин прогноз течения ИБС считают неблагоприятным.

Поскольку основной антиоксидант крови альфа-токоферол содержится в значительной концентрации в ЛПВП, резервная мощность АОА крови в значительной степени зависит от концентрации в крови ЛПВП, и, следовательно, только комплексная оценка лаг-периода (периода индукции прироста 2-ТБК активных соединений до и после 18-минутной инкубации пробы в присутствие прооксидантов), ХС ЛПВП позволяют оценить резервную мощность АОА. К 2-ТБК активным соединениям относятся малоновый диальдегид (МДА), образующийся внутриклеточно, и его производные в крови, а также ряд низкомолекулярных соединений, образующих окрашенные комплексы с 2-ТБК. Эту сумму 2-ТБК активных продуктов принято условно называть МДА для удобства изложения материала (Б.И.Рудык, Р.А.Сабадышин "Влияние эмоксипина на состояние ПОЛ у больных с хронической сердечной недостаточностью". Кардиология. 1991, N 11 -с. 52-54). При этом неблагоприятном прогнозе течения ИБС, сопровождающемся активацией процессов ПОЛ, является не только нарастание сердечной недостаточности (см. выше), но и переход стабильной стенокардии в нестабильную (Л.В.Шаталина, Н.О.Быкова, Л. В. Борисенко и др. "Состояние мембран и особенности перекисного окисления липидов тромбоцитов у больных с нестабильной стенокардией". Кардиология. 1989. N 2,с. 45-49).

Новым в данном способе является одновременное определение концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови в динамике наблюдения с дополнительным определением лаг-периода, ХС ЛПВП и при увеличении концентрации МДА крови на начальном этапе лечения ИБС до 0,14-0,61 мкмоль/гОЛ, уровень ХС ЛПВП в пределах 0,92-1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6-9 мин прогноз течения ИБС считают способствующим переходу стенокардии напряжения ФК III-IV в ФК II-I, а при уровне ХС ЛПВП 0,61-0,91 мкмоль/л, увеличении уровня МДА до 0,62-2,1 мкмоль/гОЛ, лаг-периоде 2-5,9 мин прогноз течения ИБС считают неблагоприятным.

Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности и эффективности способа. Отличительные признаки проявили в заявленной совокупности новые свойства. Идентичной совокупности признаков в известных решениях не обнаружено, данный способ можно успешно использовать в клинической практике.

Таким образом, данное решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "практическая применимость", "изобретательский уровень".

Активация процессов ПОЛ при ИБС связана со снижением общей АОА крови. При этом образуются наиболее атерогенные модифицированные формы липопротеинов крови. Поэтому оценка резервной мощности общей АОА крови при ИБС важна для прогнозирования течения заболевания. Верхняя граница резервной мощности АОА является пределом нормы для здорового человека, нижняя свидетельствует о возможности перехода ИБС в нестабильную стенокардию и острый инфаркт миокарда. В настоящее время в клинической лабораторной практике отсутствуют достаточно надежные критерии оценки эффективности терапии ИБС. Указанный способ позволяет дополнительно к определению 2-ТБК активных соединений оценивать резервную мощность общей АОА крови до и после лечения и позволяет оценить эффективность лечения ИБС.

Способ осуществляют следующим образом: в сыворотке крови определяют концентрацию 2-ТБК активных соединений, условно называемых малоновым диальдегидом (МДА), а именно к трем пробам по 0,17 мл сыворотки крови добавляют инкубационную смесь следующего состава: 30 мМ Трис-HCl (pH 7,4), 145 мМ NaCl, 0,67 мМ аскорбиновой кислоты. Реакцию инициируют добавлением раствора Fe₂SO₄ до его конечной концентрации 25 мкМ. Общий объем смеси составил 2,0 мл. Инкубация длится 5, 10 и 15 минут при 37^oC. Малоновый диальдегит (МДА) в пробе определяют путем добавления 1,0 мл 0,73% раствора 2-тиобарбитуровой кислоты (2-ТБК). Коагулированный белок отделяют центрифугированием при 6000 об/мин, супернатант спектрофотометрируют при λ 532 нм. Исходный уровень 2-ТБК активных соединений (МДА) в анализируемой сыворотке крови определяют без предварительной инкубации в присутствии прооксидантов.

До инкубации оценивается только уровень МДА, который составил в группе контроля (n= 10) 0,0112±0,011 мкмоль/гОЛ (общих липидов) и в группе больных ИБС до лечения 0,15±0,011 мкмоль/гОЛ. Уровень ХС ЛПВП в процессе инкубации пробы не изменялся, лаг-период оценивается в динамике инкубации пробы.

ХС ЛПВП определяют после осаждения ЛПНП и ЛПЮНП марганец-гепариновой смесью стандартизованным методом с использованием контрольных сывороток (методические рекомендации АЗ РФ "Методы клинической химии в кардиологии", 1987, с. 26).

Приводим суммарную кинетическую кривую и схему ее обсчета в контроле и при ИБС до и после лечения. Функция по виду напоминает экспоненциальную. Для удобства расчета каждую кривую апроксимировали двумя отрезками прямых (двумя касательными), и в точке их пересечения находили значение лаг-периода.

Для контрольной прямой решением уравнения: в группе контроля (n=10) уравнение прямой E₁= +0,03+0,025 • T; уравнение второй прямой E₂ -2,4+0,65 • T. Если уровень ХСЛПВП у больных ИБС составлял 0,92-1,39 ммоль/лиспользовались уравнения: E₁ 0,045+0,19 • T; E₂ -3,6+0,95 • T
Если уровень ХС ЛПВП при ИБС составлял 0,61-0,91 ммоль/л, использовались уравнения:
E₁=0,03+0,25 • T
E₂=-1,3+0,33 • T
Приводим среднестатистические данные по группам (контроль и больные ИБС до и после лечения).

Контроль: уровень МДА до инкубации пробы 0,0112±0,001 мкмоль/ гОЛ
уровень МДА после инкубации пробы 0,0117±0,001 мкмоль/гОЛ
ХСЛПВП 1,52±0,12 ммоль/л (верхняя граница популяционной нормы г. Томска 1,7 ммоль/л);
лаг-период 9,3±0,6 мин.

Больные ИБС первой группы (n 34) до лечения:
уровень МДА до инкубации пробы 0,15±01 мкмоль/гОЛ;
уровень МДА после инкубации пробы 0,31±0,02 мкмоль/гОЛ;
ХС ЛПВП 1,0±0,07 ммоль/л;
лаг-период 6,3±0,6 мин.

Больные ИБС первой группы после лечения: (n34)
уровень МДА до инкубации пробы 0,11±0,001 мкмоль/гОЛ;
уровень МДА после инкубации пробы 0,22±0,02 мкмоль/гОЛ:
ХС ЛПВП 1,26±0,0,08 ммоль/л;
лаг-период 7,7±0,6 мин.

Больные ИБС второй группы (n= 28) до лечения:
уровень МДА до инкубации пробы 0,18±0,01 мкмоль/гОЛ;
уровень МДА после инкубации пробы 0,69±0,04 мкмоль/гОЛ;
ХС ЛПВП 0,8±0,7 моль/л:
лаг-период 4,0±0,4.

Больные ИБС второй группы после курсовой (24 дня) дифференцированной патогенетически обоснованной терапии ИБС:
уровень МДА до инкубации пробы 0,19±0,01 мкмоль/гОЛ:
уровень МДА после инкубации пробы 0,53±0,05 мкмоль/гОЛ;
ХС ЛПВП 0,90±0,08 ммоль/л (нижняя граница популяционной нормы г. Томска 0,91 ммоль/л);
лаг-период 4,7±0,4 мин.

Больным ИБС II группы рекомендовано лечение с включением антиоксидантов.

На чертеже приведены примеры суммарных кинетических кривых трех групп (контроль, ИБС первая группа до и после лечения и ИБС вторая группа до и после лечения).

Использование предлагаемого способа позволило в первой группе больных ИБС выявить благоприятный прогноз течения ИБС (n=34); во второй группе только у 7 патентов наблюдалось увеличение ХС ЛПВП и лаг-периода на 18 процентов при таком же снижении концентрации 2-ТБК активных соединений, что было расценено нами как кратковременное улучшение состояния больных ИБС. Всем пациентам стой группы была назначена дополнительная терапия с включением антиоксидантов, так как в целом прогноз течения ИБС у стой группы пациентов был неблагоприятный. У этих больных нарастала одышка, снизилась работоспособность. У 9 пациентов был констатирован переход стенокардии напряжения в нестабильную стенокардию, то есть был выявлен неблагоприятный прогноз течения ИБС.

Ложноположительных и ложноотрицательных случаев нами не выявлено, так как оценивались только объективные критерии эффективности проводимой терапии: результаты велоэргометрии, частота приступов стенокардии и соответственно доза принятого нитроглицерина, результаты лабораторного обследования.

Клинические параметры.

Пример 1. Пациент И. 41 год, N истории болезни 283, поступил в отделение реабилитации ННИК ТНЦ СО РАМН с диагнозом: ИБС, стенокардия напряжения, ФК III.

Результаты лабораторного исследования:
при поступлении: прирост МДА в пробе крови 0,6 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 7 мин;
ХС ЛПВП 0,93 ммоль/л.

Результаты повторного лабораторного исследования после 24 суток терапии ИБС:
уровень МДА 0,4 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 9,0 мин;
ХС ЛПВП 1,3 ммоль/л.

Диагноз при выписке: ИБС, стенокардия напряжения, ФК II.

Пример 2. Пациент Г. 46 лет, N истории болезни 804, поступил в отделение реабилитации НИИК ТНЦ СО РАМН с диагнозом: ИБС, стенокардия напряжения, ФК III.

Результаты лабораторного исследования при поступлении:
прирост МДА в пробе крови 0,5 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 6 мин;
ХС ЛПВП 0,95 ммоль/л.

Результаты повторного лабораторного обследования при выписке после 28 суток терапии ИБС:
уровень МДА 0,3 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 8 мин;
ХС ЛПВП 1,4 ммоль/л.

Диагноз при выписке: ИБС, стенокардия напряжения, ФК II.

Пример 3. Пациент Д. 38 лет, N истории болезни 171, поступил в отделение реабилитации НИИК ТНЦ СО РАМН с диагнозом: ИБС, стенокардия напряжения, ФК III.

Результаты лабораторного обследования при поступлении:
прирост МДА в пробе крови 0,4 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 6 мин;
ХС ЛПВП 0,95 ммоль/л.

Результаты повторного лабораторного обследования при выписке после 28 суток терапии ИБС:
прирост МДА в пробе крови 0,2 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 8 мин;
ХС ЛПВП 1,3 ммоль/л.

Диагноз при выписке: ИБС, стенокардия напряжения, ФК II.

Пример 4. Пациент Д. 60 лет, N истории болезни 737, поступил в отделение ИБС и атеросклероза НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН с жалобами на периодические ноющие, давящие боли в области сердца при физической нагрузке и эмоциональной нагрузке в покое. Боли купируются 1-2 таблетками нитроглицерина. Пульс в покое 74 уд/мин, АД 200/90 мм рт. ст.

Результаты лабораторного исследования:
холестерин 4,16 ммоль/л;
холестерин-ЛПВП 0,80 ммоль/л;
триглицериды 1,02 ммоль/л
прирост МДА за период инкубации пробы 0,86 ммоль/гОЛ;
лаг-период 5 мин;
Диагноз: ИБС, стенокардия напряжения, ФК III. Гипертоническая болезнь II стадии, атеросклероз аорты, мозговых и венозных артерий.

Результаты повторного лабораторного обследования при выписке после 30 суток терапии ИБС:
прирост МДА 0,8 мкмоль/гОЛ;
лаг-период 4 мин;
ХС ЛПВП 0,9 ммоль/л;
Диагноз при выписке: ИБС, нестабильная стенокардия, АГ II стадии, атеросклероз аорты и магистральных артерий.

Способ применен у 72 пациентов, в том числе у 10 доноров крови. При выявлении на начальном этапе лечения ИБС уровня МДА в пределах 0,14-0,61 мкмоль/гОЛ, уровне ХС ЛПВП в пределах 0,92- 1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6-9 мин прогноз течения ИБС был благоприятным, о чем свидетельствует изменение функционального класса (ФК) стенокардии напряжения в сторону его снижения, а при выявлении на начальном этапе лечения ИБС уровня МДА 0,62-2,1 мкмоль/гОЛ, уровня ХС ЛПВП 0,61-0,91 ммоль/л, лаг-периоде 2-6,9 мин был установлен неблагоприятный прогноз течения ИБС (переход стабильного течения стенокардии напряжения в нестабильную форму течения заболевания).

Применение известного способа-прототипа позволяет оценить интенсивность прироста МДА в крови, но не позволяет прогнозировать течение ИБС. Нами выявлено 9 ложноположительных случаев прогнозирования течения ИБС, проведенных с учетом уровня МДА крови (в соответствии со способом-прототипом), чего не наблюдалось при использовании предлагаемого нами способа.

При этом предлагаемый способ прост в исполнении и интерпретации полученных результатов.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, терапии. Цель изобретения -повышение точности и эффективности способа. Указанная цель достигается техническим решением, представляющим собой одновременное исследование концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови в динамике наблюдения с дополнительной оценкой резервной мощности антиоксидантной системы (АОА), что позволяет оценивать течение стенокардии напряжения как благоприятное или угрожающее осложнениями. Новым в данном способе является одновременное определение 2-ТБК активных соединений, лаг-периода, индукции накопления МДА в пробе в процессе инкубации и уровня ХС ЛПВП, что позволило повысить точность и эффективность прогнозирования течения стенокардии напряжения. 1 ил.

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца (ИБС) путем определения концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови в динамике, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности и точности, способ дополнительно определяют лаг-период, ХС ЛПВП и при увеличении концентрации МДА крови на начальном этапе лечения ИБС до 0,14 0,61 мкм • моль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП в пределах 0,92 1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6 9 мин прогноз течения ИБС считают способствующим переходу стенокардии напряжения ФК III-IV в ФК I-II, а при увеличении уровня МДА до 0,62 2,1 мкм • моль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП 0,61 0,91 ммоль/л, лаг-периоде 2 5,9 мин прогноз течения ИБС считают неблагоприятным.