БИОАКТИВНЫЙ ЭКСТРАКТ ИЗ TANACETUM PARTHENIUM И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1998 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к фармацевтическому составу на основе Tanacetum parthenium с сесквитерпен-лактон-партенолидом и партенолидоподобными соединениями. Изобретение также относится к способу получения состава с фармацевтической активностью из тонко измельченного Tanacetum parthenium путем экстракции, а также к лекарственному средству, полученному с помощью состава с фармацевтической активностью.

Для получения экстракта из измельченного растения Tanacetum parthenium в патенте ЕР 0098041 AI описывается, что сесквитерпен-лактон экстрагируют посредством масла из растений. Вообще получение сесквитерпен-лактона из растений производят с помощью неполярного органического растворителя, причем речь идет также о петролейном эфире, гексане или хлороформе. При этом после экстракции с помощью первого неполярного растворителя его испаряют и затем экстракт хроматографируют посредством второго неполярного растворителя в качестве, по меньшей мере, первого элюата.

Из статьи "The Active Principle Feverfew" в "The Lancet" от 7 ноября 1981 г., с. 1054, известно получение экстракта из высушенного растения с помощью петролейного эфира. Последующая хроматография может быть проведена посредством бензоата в качестве аполярного растворителя. В "Biochemical Systematics Ecology", 1977, с. 207-218, описывается экстракция сесквитерпен-лактонов из Tanacetum parthenium с помощью хлороформа, то есть аполярного экстрагирующего средства.

Кроме того, известна также экстракция с помощью фосфатного буферного раствора.

Установлено, что известные способы экстракции обеспечивают относительно небольшой выход. Кроме того, сесквитерпен-лактоны, экстрагированные из Tanacetum parthenium, оказываются относительно нестабильными.

В основу изобретения положена задача получить новый фармацевтический состав и на его основе лекарственное средство из Tanacrtum parthenium, которое обладало бы более высокой стабильностью.

Предлагаемый согласно изобретению состав с фармацевтической активностью из Tanacetum parthenium с сесквитерпен-лактон-партенолидами в качестве доминирующих в количественном отношении ингредиентов получают путем следующих технологических операций:
- тонкий помол растений;
- экстрагирование с помощью CO₂ в надкритическом состоянии при 32 - 60 ^oC и давлении 150 - 350 бар.

Предлагаемый согласно изобретению состав с фармацевтической активностью отличается от экстрактов из Tanacetum parthenium, полученных известными методами экстракции. Это отличие состоит в том, что содержание партенолида в предлагаемом составе при хранении более одного года остается по существу постоянным, в то время, как содержание партенолида в обычных экстрактах заметно снижается за этот промежуток времени. В сущности отличие предлагаемого фармацевтического состава от обычных экстрактов из Tanacetum parthenium объясняется тем, что при обычных способах характеристические реактивные группы сесквитерпен-лактонов, например метиленовые группы и эпоксидная функция, разрушались, тогда как в предлагаемом согласно изобретению составе они сохраняются.

Указанные выше задачи решаются также с помощью способа, согласно которому экстракцию осуществляют посредством CO₂ в надкритическом состоянии при 32 - 60^oC и давлении 150 - 350 бар.

Этот способ ведет к получению вышеуказанного состава с фармацевтической активностью, обладающего неожиданными преимуществами.

Кроме того, преимущество экстракта, полученного предлагаемым согласно изобретению способом, заключается в том, что он свободен от остатков растворителя и содержащихся в нем нелетучих загрязняющих примесей.

Экстракция с помощью надкритического CO₂ обеспечивает полное экстрагирование лекарственного сырья, что недостижимо посредством других растворителей.

Экстракцию осуществляют предпочтительно при 32 - 60^oC. Предпочтительный диапазон давлений находится между 150 и 350 бар, при этом наиболее предпочтительными комбинациями параметров являются 60^oC и 300-350 бар или 40^oC и 200 бар.

Полная экстракция обеспечивается за счет того, что CO₂ в надкритическом состоянии циклически пропускают через измельченные растения. При этом в техническом масштабе продолжительность обработки надкритическим газом составляет около 3 ч.

Экстракция из Tanacetum parthenium с помощью надкритического CO₂ ведет к получению стабильного экстракта, обогащенного сесквитерпен-лактонами, в частности партенолидом. Выход экстракта колеблется в зависимости от условия экстрагирования в диапазоне между 90 и 99%. Выход партенолида соответственно находится в пределах между 11,9 и 14,4%.

Экстракт, полученный согласно изобретению, может быть использован для приготовления лекарственного средства. Лекарственное средство применяется, в частности, для лечения мигрени, астмы, бронхита или артрита.

Обнаружено, что жирорастворимый экстракт может еще содержать около 5% остаточной воды. При этом полярные субстанции из растений заносятся в экстракт. Полярные ингредиенты - терпен и хлорофил - при покрытии лекарственного средства желатиновой оболочкой могут реагировать с аминогруппами желатина с образованием поперечных связей, которые препятствуют быстрому растворению желатиновой оболочки. Вызывающие поперечные связи ингредиенты после окончания дубления желатиновой оболочки больше не попадают в содержимое капсулы, но полностью связываются на оболочке капсулы. Такой нежелательный эффект можно предотвратить за счет добавки к подвергаемому экстракции лекарственному сырью силикагеля, предпочтительно в количестве 60 - 140 г на 1 кг тонкоизмельченных растений (лекарственного сырья). Оптимальное количество добавки составляет 100 г на 1 кг тонкоизмельченных растений. Добавка силикогеля может привести к снижению выхода экстракта.

Определяющие активность сесквитерпен-лактоны: партенолид, сантамарин и рейнозин могут быть также экстрагированы из Tanacetum parthenium по фракциям. Посредством такого фракционирования получают экстракт, который применим в маслянистой форме в капсулах из мягкого желатина и не обнаруживает никаких поперечных связей.

Экстракция с помощью сжатых газов в принципе известна. Обзор основных положений этого метода экстракции и областей его применения содержится в статье: Бруннер, Петер "Экстракция сжатыми газами", Хим.-Тех.-Инж., 53 (1981), с. 529-542. Как известно из основных положений экстрагирования с помощью надкритических газов, так и из таблиц, содержащих примеры использования следует, что основными областями применения газовой экстракции являются нефть и аналогичные продукты, уголь, пищевые масла и жиры, а также извлечение кофеина из кофе. Приведен лишь один единственный (не раскрытый в подробностях) пример изготовления лекарственного вещества.

В работе Листа и Шмидта "Технология приготовления лекарств из растений", Штуттгарт, 1984, с. 159-173 также описывается экстракция с помощью надкритических газов. При этом в качестве предпочтительного экстрагирующего газа называется CO₂. Приводится несколько примеров использования в фармацевтике. В качестве существенного преимущества указывается гарантированное отсутствие в экстрактах растворителя. Из приведенного уровня техники не следует, что путем экстракции с помощью CO₂ в надкритическом состоянии получают иные, чем обычными способами экстракты и эти экстракты обладают другими свойствами.

Полученный способом согласно изобретению состав с фармацевтической активностью содержит сесквитерпен-лактон-партенолид в качестве доминирующего в количественном отношении ингредиента.

Полученные при предпочтительных производственных условиях экстракты имеют жировидную консистенцию, интенсивный запах и становятся темнее с увеличением продолжительности экстрагирования. Экстракт преимущественно непосредственно растворяют или суспендируют в масле или в комбинации масел, которые обычно используют в фармации. Раствор, в частности, пригоден для употребления в виде капсул из мягкого желатина. Однако возможны и другие формы.

Полученный вышеописанным способом экстракт в отношении противовоспалительных и спазмолитических свойств при сравнительных фармакологических экспериментах показал результаты, превышающие другие экстрактивные формы.

Физико-химические параметры экстрагирования и экстракта представлены в табл. 1.

В приведенных ниже примерах описывается получение экстракта в техническом масштабе.

Пример 1. В 10-литровый экстрактор, снабженный всеми приборами для контроля температуры и давления, загружают 3,2 кг тонко размолотого растительного сырья из Tanacetum parthenium. Затем после герметизации аппаратуры газообразным CO₂ из резервуара, доведенным до надкритического значения, заполняют установку и непрерывно перекачивают по замкнутому контуру. Эту операцию циклически повторяют через 3 ч при 350 бар и 60^oC до полного экстрагирования растительного сырья.

Выход экстракта 99,9 г; выход партенолида 11,4 г; содержание партенолида в экстракте 11,4%; остаток партенолида в экстрагированном растительном сырье 0,9 г.

Пример 2. В 10-литровый экстрактор, снабженный всеми приборами для контроля температуры и давления, загрузили 3,1 кг тонко размолотого растительного сырья из Tanacetum parthenium. Затем после герметизации аппаратуры газообразным CO₂ из резервуара, доведенным до надкритического значения, заполнили установку и непрерывно перекачивали ее по замкнутому контуру. Эта операция повторялась циклически через 3 ч при 200 бар и 40^oC до полного экстрагирования растительного сырья.

Выход экстракта 90,1 г; выход партенолида 11,9; содержание партенолида в экстракте 13,2%; остаточное содержание партенолида в экстрагированном сырье 1,1 г.

Экстракция с помощью надкритического CO₂ обеспечивает не только существенно более высокий выход экстракта, но и более высокую устойчивость активного вещества. В ниже табл. 2 показано сравнение между обычным водно-этиловым экстрактом и предлагаемым CO₂-экстрактом по содержанию партенолида при максимальном времени хранения около 1,5 года.

Из табл. 2 следует существенное падение процентного содержания партенолида в водно-этаноловом экстракте, в то время, как содержание партенолида CО₂-экстракта остается практически неизменным.

Состав, представляющий собой смесь многочисленных ингредиентов, в частности из измельченных растений, например Tanacetum parthenium, являющихся продуктом тонкого помола и экстракции, обеспечивает повышение выхода и неожиданно высокую стабильность активного вещества, если экстрагирование проводят с помощью газа, предпочтительно CO₂, в надкритическом состоянии. 2 с. и 8 з.п. ф-лы, 2 табл.

1. Биоактивный экстракт из Tanacetum parthenium, содержащий сесквитерпенлактоны, отличающийся тем, что он представляет собой CO₂-экстракт, получаемый экстракцией сырья углекислым газом в надкритическом состоянии и содержащий в качестве сесквитерпенлактонов партенолид, сантаморин и рейнозин. 2. Способ получения биоактивного экстракта из Tanacetum parthenium, содержащего сесквитерпенлактоны, путем экстракции растительного сырья, отличающийся тем, что экстракцию проводят с помощью CO₂ в надкритическом состоянии при 32 60^oC и 150 350 бар. 3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что экстракцию проводят при 60^oC и 300 350 бар. 4. Способ по пп. 2 и 3, отличающийся тем, что экстракцию проводят при 40^oC и 200 бар. 5. Способ по пп. 2 4, отличающийся тем, что CO₂ в надкритическом состоянии циклически пропускают через тонко размолотый Tanacetum parthenium. 6. Способ по пп. 2 5, отличающийся тем, что производят циклическую циркуляцию CO₂ в надкритическом состоянии до полной экстракции. 7. Способ по пп. 2 6, отличающийся тем, что в тонкоразмолотые растения Tanacetum parthenium перед экстракцией с помощью CO₂ добавляют силикагель. 8. Способ по пп. 2 7, отличающийся тем, что количество силикагеля составляет 60 140 г на 1 кг тонко размолотых растений. 9. Способ по пп. 2 8, отличающийся тем, что количество силикагеля составляет 100 г на 1 кг тонко размолотых растений. 10. Способ по пп. 2 9, отличающийся тем, что полученный экстракт фракционируют на сесквитерпенлактоны: партенолид, сантамарин и рейнозин.