ПРЕПАРАТ АБАКТАН ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЖИВОТНЫХ Российский патент 1998 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к области ветеринарии и медицины и касается разработки препарата Абактан - композиции, включающей пефлоксацин и мидантан в соотношении 1: 1, предназначенного для лечения и профилактики инфекционных болезней животных бактериальной и вирусной природы, и может быть использовано в научно-исследовательских лабораториях, а также в животноводстве и птицеводстве.

Пефлоксацин мезилат обладает высокой антибактериальной активностью в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий [1], однако данные о его противовирусной активности и действии на особо опасные возбудители в литературе отсутствуют.

Известно, что мидантан (1-аминоадамантана - гидрохлорид) избирательно подавляет репродукцию РНК-содержащих вирусов: гриппа типа А, парагриппозного вируса (Сендай), вируса бешенства, вируса саркомы Раусса и Esh вируса лейкоза птиц [2] , однако данных об антибактериальной активности мидантана на особо опасные возбудители в доступной литературе не найдено.

Предложенный препарат (композиция) устраняет указанные недостатки.

Задача: разработать препарат (композицию), обладающий антибактериальной и антивирусной активностью для лечения и профилактики инфекционных болезней сельскохозяйственных животных бактериальной и вирусной (РНК-содержащие вирусы) природы.

Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что для профилактики и лечения инфекционных болезней используют препарат Абактан (композицию, включающую пефлоксацин мезилат и мидантан в соотношении 1:1), обладающий вирусстатическим (РНК-содержащие вирусы), бактериостатическим и бактерицидным действием.

Препарат Абактан включает в себя:
I. Пефлоксацина мезилат.

Структурная формула

Химическое название:
1-этил-6-фтор-7-(4-метилпиперазинил)4-оксо-1,4-дигидро-3- хинолинкарбоновая кислота, метансульфонат дигидрат.

Эмпирическая формула: C₁₈H₂₄FN₃O₆S • 2H₂O.

Молекулярная масса: 465,50
Бесцветные кристаллы, хорошо растворимые в воде.

II. Мидантан.

Структурная формула

Химическое название: 1-аминоадамантана гидрохлорид.

Эмпирическая формула: C₁₀H₁₈NCl
Молекулярная масса: 187,50
Бесцветные кристаллы, хорошо растворимые в воде.

Структура композиции. "Абактан"

Соотношение компонентов пефлоксацина и мидантана в композиции Абактана составляет по весу 1:1, по молекулярной массе 2,49:1.

Изучение биологической активности Абактана осуществляли следующим образом.

Вирусстатическое действие "Абактан" изучали в сравнении с входящими в его состав пефлоксацином и мидантаном в культуре клеток (КК) с вирусом классической чумы свиней (КЧС) и на 9-10-дневных развивающихся куриных эмбрионах (КЭ) с вирусом гриппа птиц (ВГП) согласно Методическим указаниям по отбору, испытаниям и оценке антивирусных химиопрепаратов. М., 1984 [3].

Вирусстатическую активность определяли по разнице накопления вируса КЧС в опыте по сравнению с контролем и выражали в lg БОЕ 50 (бляшкообразующих единиц), и по процентам выживания КЭ, зараженных ВГП, при 100% гибели в контроле и величине химиотерапевтического индекса (ХТИ). Предварительно определяли максимально переносимую дозу (МПД) препаратов, а в ходе экспериментов - минимально эффективную дозу (МЭД), после чего вычисляли химиотерапевтический индекс.

ХТИ = МПД /МЭД.

В табл.1 представлены данные по оценке вирусстатического действия композиции "Абактан" по сравнению с пефлоксацином и мидантаном.

Из данных табл.1 видно, что Абактан и мидантан в МПД полностью (т.е. на 5,5 lg БОЕ 50) подавляли репродукцию вирусов КЧС в КК и защищали от гибели 42,0 и 41,3% КЭ, зараженных ВГП, при 100%-ной гибели в контроле и имели ХТИ, равный 10 и 64 соответственно, тогда как пефлоксацин не ингибировал репродукцию указанных вирусов.

Антибактериальное действие "Абактана", пефлоксацина и мидантана изучали на жидких и твердых питательных средах с возбудителем сибирской язвы в споровой и вегетативной формах, а также с возбудителями колибактериоза, микоплазмоза, согласно Методическим указаниям по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. М., 1972 [4].

В ходе экспериментов определяли минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК), которую выражали в мкг/мл.

В табл. 2 представлены результаты сравнительного изучения антибактериального действия "Абактан", пефлоксацина и мидантана.

Из данных табл. 2 видно, что композиция "Абактан", как и пефлоксацин проявляет выраженное ингибирующее и бактерицидное действие в отношении возбудителей сибирской язвы, колибактериоза и микоплазмоза. Более высокие, в дав раза, значения МИК и МБК у Абактана объясняются весовым соотношением (1:1) мидантана и пефлоксацина в составе композиции "Абактан". Мидантан антибактериального действия не проявил.

Испытания лечебно-профилактического действия композиции "Абактан", мидантана и пефлоксацина проводили при сибирской язве и гриппе птиц. При сибирской язве испытания лечебно-профилактического действия препаратов проводили на беспородных белых мышах, массой тела 18-20 г в количестве 100 голов. Мышей разделили на 10 групп по 10 голов в каждой, 9 групп опытных и 1 - контрольная. Каждую группу содержали изолированно в индивидуальных клетках в условиях вивария. Мышей заражали подкожно сибиреязвенным штаммом "М-71" в дозе 2•10⁶ спор в объеме 0,5 мл. Препараты вводили мышам подкожно в дозе 10^-20 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение 5 дней, I, IV и VII группам - одновременно с заражением, II, V, VIII через 1 сут. после заражения, III, VI и IX группам - через 2 сут. после заражения, X группа - препаратов не получала, вводили плацебо - физ.раствор - контроль. По всем группам проводили учет заболеваемости мышей, тяжесть проявления болезни и процент гибели. После гибели контроля за опытными группами вели наблюдение в течение 5 дней. При проведении опыта учитывали следующие показатели: а) выживаемость, б) тяжесть проявления болезни и сроки гибели мышей. Результаты исследования лечебно-профилактического действия препарата при сибирской язве представлены в табл.3.

При гриппе птиц испытание лечебно-профилактического действия препаратов проводили на невакцинированных против гриппа цыплятах 45 - 50-дневного возраста породы "белый Леггорн", полученных из хозяйства, благополучного по инфекционным болезням птиц, в количестве 100 голов.

Предварительно у 10% цыплят была взята кровь и сыворотка исследована в реакции задержки гемагглютинации (РЗГА) - результат отрицательный.

Интактных цыплят разделили на 10 групп по 10 голов в каждой, 9 групп опытных и 1 - контрольная. Каждую группу содержали изолированно в индивидуальных клетках в условиях вивария. Цыплят заражали внутримышечно вирулентным вирусом гриппа А птиц (Г5N2), штамм "Пенсильвания-84", в дозе 300 - 400 ЭЛД50 (эмбриональных летальных доз), в объеме 1 мл. Препараты вводили цыплятам с кормом в дозах 10 - 20 мг/кг массы 1 раз в сутки в течение 10 дней, I, IV, VII группам одновременно с заражением, II, V, VIII группам - через 1 сут. после заражения, III, VI, IX группам через 2 сут. после заражения, X группа препаратов не получала - контроль. После гибели контроля за опытными группами цыплят вели наблюдение в течение 30 сут. Через 21. сут после заражения у выживших цыплят была взята кровь и сыворотки исследованы на наличие антител к гомологичному вирусу гриппа птиц в реакции задержки гемагглютинации.

При проведении опыта учитывали следующие показатели:
а) заболеваемость,
б) выживаемость,
в) наличие у цыплят постинфекционных антигемагглютинирующих антител (АГА).

Результаты испытаний лечебно-профилактического действия препаратов при гриппе птиц представлены в табл.3.

Из данных табл.3 видно, что Абактан обладает выраженным профилактическим и лечебным действием при бактериальных (сибирская язва) и вирусных (грипп птиц, РНК-содержащий вирус) болезнях, в дозах 10,0 - 20,0(мг/кг массы тела при подкожном и пероральном способе введения, защищая 70,0 - 100,0% белых мышей и цыплят при 90,0 - 100,0% гибели в контроле, при указанных болезнях. Абактан не влияет на формирование постинфекционного иммунитета при гриппе птиц. Мидантан обладает лечебно-профилактическим действием только при гриппе птиц, а пефлоксацин - только при сибирской язве.

Акты комиссионных производственных испытаний имеются.

При изучении токсичности Абактана установлено, что ЭЛД50 (эмбриональных летальных доз) для куриных эмбрионов составляет 2000 мкг/КЭ, а ЛД50 (летальных доз) для белых мышей при внутривенном введении 100 мг/кг, при даче с кормом - 2300 мг/кг. В лечебных дозах Абактан не обладает эмбриотоксическим, тератогенным и иммунодепрессивным действием, не влияет на воспроизводительную функцию животных и птиц.

Таким образом, предложенный препарат отечественного производства (композиция Абактан) и способ его применения просты в исполнении и промышленно применимы животноводческих и птицеводческих хозяйствах. Препарат отечественного производства, синтезируется из отечественного сырья.

Источники информации
1. Глушков Р. Г. , Левшин И.Б., Марченко Н.Б. и др. Химико-фармацевтический журнал, 18(9), 1984, 1048 - 1064.

2. Индулен М.К., Калныня В.А., Рязанцева Г.М., Бугович В.И. Механизм антивирусного действия производных адамантана. Рига, 1981, с. 168.

3. Методические указания по отбору, испытаниям и оценке антивирусных химиопрепаратов. М., 1984.

4. Методические указания по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. М., 1972.

Препарат Абактан - композиция для профилактики и лечения инфекционных болезней животных бактериальной и вирусной природы включает пефлоксацин мезилат и мидантан в соотношении 1 : 1. Препарат обладает вирусстатическим, бактериологическим и бактерицидным действием. Применяют Абактан в дозе 10 - 20 мг/кг массы тела животных парентерально или перорально 1 раз в сутки в течение 3 - 10 дней. 3 табл.

Препарат для лечения и профилактики инфекционный болезней животных, содержащий пефлоксацин мезилат, отличающийся тем, что дополнительно содержит мидантан в соотношении 1:1 по массе.