СПОСОБ ТЕРАПИИ ОСТРОЙ ПНЕВМОНИИ Российский патент 1998 года по МПК A61K31/14 A61K38/02 A61M15/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической иммунологии, и может быть использовано в клинике для лечения больных острой пневмонией, в сочетании с традиционной терапией.

Известен способ лечения острой пневмонии, включающий в традиционную лекарственную терапию ингаляционное введение стимулированных аутологичных моноцитов. Суть способа состоит в выделении аутологичных моноцитов, культивировании последних на питательных средах с добавлением иммуномодуляторов, например левамизола, с последующим ингаляционным введением моноцитов больному.

Недостаток способа состоит в том, что размер моноцита 20-40 мкм, а как известно, частицы величиной больше 8 микрон не достигают мелких бронхов, а тем более альвеол. Следовательно, метод малоэффективен при процессах,поражающих преимущественно дистальные участки дыхательных путей (Иммунокоррекция в пульмонологии /Под ред. А.Г.Чучалина. - М.: Медицина, 1989, с. 141-144.

Сущность способа терапии острой пневмонии состоит в том, что наряду с традиционной лекарственной терапией больному ингаляционно, с помощью УЗ-ингалятора вводят супернатант стимулированной фитогемаглютинином (ФГА) культуры аутологичных мононуклеарных клеток в количестве 5 мл с концентрацией белка 50-100 мкг/мл в течение 6-8 дней.

Возможность ингаляционного применения супернатанта ФГА-стимулированной культуры аутологичных мононуклеарных клеток обусловлена наличием в нем комплекса эндогенных цитокинов (КЭЦ), таких, как интерлейкин-1, интерлейкин-2, интерлейкин-6, фактор некроза опухоли, интерфероны. Перечисленные цитокины обладают свойством усиливать бактерицидность и хемотаксис фагоцитов, индуцировать синтез цитокинов другими клетками, повышать киллерную активность NK-лимфоцитов. Кроме того КЭЦ нормализует процессы репарации в очаге воспаления. Все перечисленные эффекты КЭЦ обуславливают клинический эффект у больных острой пневмонией.

Необходимость использования ультразвуковых ингаляторов для введения КЭЦ обусловлена их способностью создавать высокодисперсный аэрозоль с величиной частиц 0,5-5 мкм, которые способны достигать терминальных бронхов и альвеол.

Дозировка КЭЦ по белку (50-100 мкг/мл) определена исходя из эффективности применения КЭЦ в такой дозе при лечении других заболеваний (Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В. Иммуноцитокины и локальная иммунокоррекция// Иммунология, 1995, N 1, с. 4-7).

Объем КЭЦ на одну ингаляцию (5 мл) выбран потому, что именно такой объем жидкости полностью расходуется за 10 мин (оптимальная длительность процедуры).

Способ осуществляют следующим образом. Больной острой пневмонией получает традиционную комплексную лекарственную терапию, включающую антибактериальные препараты, противовоспалительные, бронхолитические, отхаркивающие средства, витаминотерапию. При поступлении больного производят забор 20 мл венозной крови из кубитальной вены в стерильную силиконизированную посуду, содержащую 0,5 мл гепарина (5000 ЕД/мл). Из полученной крови выделяют мононуклеарные клетки путем центрифугирования на градиенте плотности фикол-верографина.

Выделенные мононуклеарные клетки трижды отмывают раствором Версена, затем готовят взвесь клеток с концентрацией 5•10⁶/мл в среде 199, содержащей гентамицин (80 мкг/мл). К полученной взвеси мононуклеарных клеток добавляют ФГА из расчета 20 мкг/мл, инкубируют 3 ч в термостате при температуре 37^oC. Трижды отмывают клеточную взвесь раствором Версена, добавляют до первоначального объема среды 199 и инкубируют в термостате 20 ч при 37^oC.

Взвесь мононуклеарных клеток центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Супернатант, содержащий комплекс эндогенных цитокинов (КЭЦ) забирают в стерильные пенициллиновые флаконы и хранят в морозильном отделении холодильника при -20^oC. К оставшемуся клеточному осадку добавляют до первоначального объема среды 199 с гентамицином и инкубируют 20 ч в термостате при 37^oC, затем супернатант забирают, как описано выше.

Все манипуляции со взвесью мононуклеарных клеток и супернатантами производят в стерильном боксе с соблюдением правил асептики и антисептики. Полученные супернатанты фильтруют через стерильные фильтры synpor или Millipore 0,22.

Как в первой, так и во второй порциях супернатанта определяют количество общего белка по Лоури спектрофотометрическим способом, и перед назначением больному концентрацию белка в супернатанте доводят до 50-100 мкг/мл путем разбавления стерильным физиологическим раствором.

Больному вводят ингаляционно 5 мл супернатанта с концентрацией белка 50-100 мкг/мл, с помощью любого ультразвукового ингаляционного аппарата (например USI-3, ГДР), ежедневно в течение 6-8 дней в зависимости от клинической картины заболевания.

Пример. Больной П. , 40 лет, диагноз при поступлении: острая левосторонняя пневмония, поступил на 2 сутки болезни. При поступлении больной предъявлял жалобы на боли в левой половине грудной клетки, озноб, кашель с отделением мокроты, потливость, лихорадку. Частота дыхательных движений - 20 в 1 мин. Голосовое дрожание ослаблено слева в подлопаточной области, там же ослабленное везикулярное дыхание. Слева в подлопаточной и аксилярной областях - множественные мелко- и среднепузырчатые влажные хрипы. Пульс 96 ударов в 1 мин, удовлетворительных качеств. АД 125/80 мм рт.ст. Общий анализ крови от 13.12.95: эритроциты - 4,19•10¹²/л, Hb - 135 г/л, ЦП - 0,96, лейкоциты - 6,44•10⁹/л, эозинофилы - 1%, палочкоядерные нейтрофилы - 7%, сегментоядерные - 64%, лимфоциты - 20%, моноциты - 8%, СОЭ - 40 мм/ч.

Исследование мокроты от 13.12.95: цвет - серый, характер - слизисто-гнойный, консистенция - вязкая, лейкоциты - 5-10 в п/з, эпителиальные клетки - умеренное количество, микобактерии туберкулеза не выявлены.

Рентгенография органов грудной клетки в прямой проекции при поступлении: снижена пневматизация легочной ткани в среднем легочном поле левого легкого за счет инфильтрации. Корень расширен, бесструктурен, синусы свободны.

Иммунограмма от 14.12.94. : E-POK - 70%, IgG - 7,7 г/л, IgA - 0,8 г/л, IgM - 1,1, фагоцитарный индекс - 50%, фагоцитарное число - 4, циркулирующие иммунные комплексы - 1,2 г/л, РТМЛ с ФГА - 90%.

Больному проводилась следующая лекарственная терапия:
1) Бензилпенициллина Na соль 0,5 млн., 5 раз в сутки, в/м - 10 дней.

2) Гентамицина сульфат 80 мг, 2 раза в стуки, в-в - 6 дней.

3) Таблетки эуфиллина 0,15, 3 раза в сутки.

4) Таблетки от кашля 3 раза в сутки.

5) Таблетки ортофена 0,025 3 раза в сутки.

С четвертого дня болезни больному с помощью УЗ-ингалятора USI-3, вводили КЭЦ, 5 мл (50 мкг белка на 1 мл) ежедневно, всего 6 ингаляций.

Динамика клинической картины и коэффициента тяжести болезни отражена в таблице 1.

Рентгенография органов грудной клетки в прямой проекции на 10 день болезни: положительная динамика, сохраняется негомогенная инфильтрация в язычковом сегменте левого легкого.

Рентгенография органов грудной клетки в прямой проекции на 22 день болезни: отсутствие очаговых и инфильтративных теней.

На 23 день от начала болезни больной в удовлетворительном состоянии выписан.

При выписке:общий анализ крови - эритроциты - 4,19•10¹²/л, Hb - 138 г/л, ЦП - 0,99, лейкоциты - 4,78•10⁹/л, эозинофилы 2%, палочкоядерные нейтрофилы - 6%, сегментоядерные - 59%, лимфоциты - 26%, моноциты - 7%, СОЭ - 12 мм/ч.

Иммунограмма - E-POK - 66%, IgG - 8,5 г/л, IgA - 1,6 г/л, IgM - 0,6 г/л, фагоцитарный индекс - 58%. фагоцитарное число - 4, циркулирующие иммунные комплексы - 0,9 г/л, РТМЛ с ФГА - 85%.

Были исследованы 26 больных с острой пневмонией, госпитализированных в пульмонологическое отделение и отделение иммунологии 1-й ГКБ в период от 1-х до 6-7 суток от начала болезни. Все больные были разделены на две группы - основную и контрольную. Включение больного в ту или иную группу осуществлялось в день поступления с помощью таблицы случайных чисел. Основная группа составила 9 человек, в возрасте 16-60 лет, средний возраст 42,5 года; из них мужчин - 6, женщин - 3; контрольная составила 17 человек в возрасте 16-60 лет, средний возраст 37,5 лет, из них мужчин - 13, женщин 4.

Больные основной группы получали стандартную терапию, включающую антибактериальные препараты (пенициллин, ампициллин, гентамицин, бисептол), отхаркивающие средства, противовоспалительные препараты, бронхолитики, комплекс витаминных препаратов, физиотерапевтическое лечение (УВЧ, электрофорез с CaCl₂). Кроме того им проводили ингаляции КЭЦ со 2-4-го дня пребывания в стационаре, ежедневно, один раз в день в дозе 5 мл с концентрацией белка 50-100 мкг/мл. Всего на курс от 6 до 8 ингаляций. Больные контрольной группы получали аналогичное лечение с той только разницей, что вместо ингаляцией с КЭЦ назначались ингаляции с эктерицидом.

Эффективность лечения оценивали по следующим критериям:
1) по динамике клинического коэффициента тяжести острой пневмонии с помощью математического метода, предложенного Г.И.Марчуком и Э.П.Беребенцевой (1986 год). Метод заключается в балльной оценке 16 клинических симптомов и рентгенологической картины, с последующим расчетом коэффициента тяжести по формулам. Преимущество метода в возможности интегральной количественной оценке клинической картины заболевания и объективизации исследования
2) по срокам исчезновения некоторых симптомов острой пневмонии (повышенная температура тела, сухой и влажный кашель, плевральная боль, ослабление голосового дрожания, перкуторного притупления, наличия влажных хрипов или крепитации).

3) по срокам нормализации рентгенологической картины.

4) по длительности койко-дня.

Проведенные исследования выявили высокую эффективность КЭЦ в комплексной терапии острой пневмонии. Так, в основной группе больных со 2-3 дня от начала применения КЭЦ выявляется четкая тенденция к снижению степени тяжести заболевания. На 4-5 день применения КЭЦ (6-8 день болезни) снижение коэффициента тяжести становится статистически достоверным.

В основной группе отмечается четкая тенденция к сокращению сроков исчезновения клинических признаков острой пневмонии, таких как кашель, плевральная боль, усиление голосового дрожания, одышка, хрипы. Надо отметить, что различие в сроках исчезновения сухого кашля статистически достоверно.

Кроме того прослеживается тенденция к более ранней нормализации данных перкуссии, результатов рентгенологического исследования, а также к сокращению койко-дней.

У больных, которым ингалировали КЭЦ, не наблюдалось побочных реакций. Полученные данные представлены в таблицах 2 и 3.

Использование предлагаемого способа лечения острой пневмонии обеспечивает следующие преимущества:
- снижает тяжесть состояния больных острой пневмонией;
- сокращает длительность пребывания больного в стационаре.

Изобретение относится к медицине, в частности к пульмонологии, и касается лечения острой пневмонии. Для этого дополнительно к традиционной лекарственной терапии проводят ингаляции супернатанта аутологичной культуры мононуклеарных клеток, стимулированных ФГА, в количестве 5 мл с концентрацией белка 50-100 мкг/мл ежедневно в течение 6-8 дней. Способ позволяет также обеспечивать эффект лечения при процессах, поражающих преимущественно дистальные участки дыхательных путей. 3 табл.

\\\1 Способ лечения острой пневмонии, включающий традиционную лекарственную терапию, отличающийся тем, что дополнительно ингалируют супернатант аутологичной культуры мононуклеарных клеток, стимулированных ФГА, в количестве 5 мл с концентрацией белка 50 - 100 мкг/мл ежедневно в течение 6 - 8 дней.