СЛОЖНЫЕ ЭФИРЫ НУКЛЕОЗИДОВ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ Российский патент 1999 года по МПК C07H19/06 C07H19/67 C07H19/73 C07H19/09 C07H19/16 C07H19/167 C07D473/00 C07D473/18 C07D239/54 A61K31/70 

Изобретение относится к группе новых соединений общей формулы I:
Nu-O-Fa,
где О означает кислород;
Nu является нуклеозидом или аналогом нуклеозида;
Fa является ацильной группой мононенасыщенной Cl₁₈ или C₂₀ жирной кислоты.

Изобретение также относится к антивирусным фармацевтическим или ветеринарным композициям, содержащим соединение общей формулы I, одно или в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения людей или животных, страдающих от вирусной инфекции, и снижения инфекционной нагрузки при введении соединения формулы I.

Известно, что большое количество серьезных заболеваний, таких как СПИД, гепатит В, герпес и гинекологический рак, а также по последним данным папилломные бородавки вызываются вирусными инфекциями.

Вирусы являются маленькими инфекционными агентами, которые неспособны к независимой репликации и, следовательно, зависят для репликации от клетки хозяина. Генетическим материалом вируса является или РНК или ДНК.

При заражении организма вирус атакует специфическую клетку хозяина. После присоединения вирус проникает через цитоплазматическую мембрану и вирусный геном выделяется из вирусной частицы. Вирусный геном обычно транспортируется в ядро клетки, где реплицируются новые вирусные геномы. Новый вирусный блок синтезируется в цитоплазме и новые частицы формируются или вблизи к цитоплазматической или ядерной мембране.

Некоторые вирусы имеют геномный материал, который непосредственно (ДНК вируса) или не непосредственно (обратная транскрипция РНК, ретровирус) включен в геномы клетки хозяина.

Внеклеточные вирусы нейтрализуются циркулирующими антителами и клеточный иммуный аппарат может атаковать и удалять зараженные клетки. Вирусы внутри зараженных клеток ускользают от иммунной защиты, если вирусные антигены не экспонированы на поверхности клеток.

Иммунная атака на зараженные органы способствует заболеванию по механизму, обычно называемому вызванной вирусом иммунопатологией.

Механизмы, лежащие на основе некоторых из более важных вирусных заболеваний, различаются.

При заболевании ВИЧ-инфекцией Т-хелперные клетки пациентов являются пораженными и разрушенными. Это приводит к состоянию иммунодифицита, что делает пациента очень чувствительным к инфекциям, которые обычно подавляются иммунной системой без каких-либо опасных последствий для пациента.

Вирус гепатита В поражает клетки печени и пациент может оказаться очень больным, когда иммунная система старается избавить организм от этих зараженных клеток. Если инфекция не подавляется иммунной системой на ранних стадиях, результатом будет хронический гепатит. Следовательно, пациент будет инфицирован на всю жизнь. У ряда пациентов хронический гепатит будет развиваться в цирроз или рак печени.

При инфекциях простым герпесом вирус первоначально проникает в эпидермальные клетки. Вирус простого герпеса доходит до нервного центра, где он находится в спокойном состоянии до вспышки через определенный интервал времени. Хотя в большинстве случаев герпесная инфекция не угрожает жизни, она является болезненной и пациент будет заражаться каждый раз, когда происходит вспышка.

У вируса папилломы, особенно в мочевых путях женщин, вирусный геном локализованы в ядрах эпителиальных клеток, но не интегрирован в хромосомы клеток. Это является устойчивым состоянием и у некоторых штаммов, промотирующих опухоли, интеграция наконец происходит, приводя к развитию болезни. В этом случае вирусный геном оказывает решающее инициирующее действие на процесс, приводящий к раку.

Если иммунная система справляется с освобождением организма от вируса на ранней стадии, это приводит к длительному иммунитету. С другой стороны, если вирус является слишком агрессивным и подавляет иммунный аппарат, не достигается иммунитетом и результатом является состояние постоянной инфекции.

Из-за различных механизмов стратегия лечения должна различаться для этих состояний.

Конечной целью при лечении ВИЧ/СПИДа является освобождение пациента от инфекционного вируса. Это кажется мало вероятным в настоящее время. Однако многое может быть достигнуто путем улучшения общего состояния пациента. Снижение вирусной нагрузки будет увеличивать длительность бессимптомного периода и уменьшать инфекционность, которая является крайней важной в отношении эпидемиологической ситуации. Все используемые в настоящее время противовирусные агенты обладают токсическими побочными эффектами, которые делают невозможным достаточно интенсивное лечение.

Считается, что имеется от 250 до 300 миллионов носителей гепатита В во всем мире. Известно, что у многих из них из них развивается гепатома или печеночная недостаточность из-за инфекции. Обнадеживающие результаты при лечении носителя такого состояния были получены в последние годы при индукции иммунного ответа интерфероном. Терапия, снижая вирусную нагрузку, является важной при таком, режиме, так как эффективное лечение острого гепатита В снизит количество находящихся в состоянии носителя. Недавно идентифицированный вирус гепатита С вызывает очень большое число случаев гепатита, из которых большое количество пациентов становятся носителями. Предварительные исследования указывают, что состояние носителя может быть прервано терапевтическими режимами, подобными режимами для гепатита В.

Простой герпес 1 и 2 часто заражает людей, вызывая состояние носителя с возвратами локальной инфекции. Распространенные инфекции, включая энцефалит, является редкими, но катострофичными для пациента. Имеются большие индивидуальные отклонения в частоте локальных инфекций, Для тех пациентов, которые подверглись воздействию половым путем или через лицо, это составляет серьезную проблему для здоровья физически, умственно и социально. Ни один из разработанных до настоящего времени терапевтических режимов не лечит латентные инфекции клеток центральной нервной системы. Таким образом терапевтическая задача заключается в сведении к минимуму клинических проявлений возвратов как по симптомам, так и по длительности.

Преобладание вирусных инфекций генитальной папилломы резко возросло в 1980-е годы. Теперь установлено, что некоторые генотипы являются онкогенными, т.е. они инициируют изменения в клетке, которые после латентного периода превращаются в рак. Вирус папилломы половых путей дает длительные устойчивые инфекции. Факторы, вызывающие злокачественное превращение повреждений, полностью не известны, но полагают, что важную роль играет иммунная система. Считается, что повреждения органа, прогрессирующие в течение месяца и лет, являются такими, которые переходят в рак. Генитальные папиломы, называемые кондиломами, в настоящее время лечат физическими средствами, такими как хирургическое удаление, некротирующие средства, жидкий азот и т.п. Генитальные бородавки вначале становятся опухолями с измененным ферментным набором, воздействующим наряду с другимим моментами и на метаболизм нуклеозидных аналогов. Нуклеозидные продукты воздействуют на эписомальную пролиферацию вируса папилломы, вызывая в результате регрессию бородавок.

Профилактическая вакцинация была очень успешной при острых инфекциях, таких как полиомиелит, корь, эпидемический паратит и т.п., но вакцинация была не эффективной для многих других серьезных вирусных инфекций,
Даже хотя в последние десятилетия были приложены значительные усилия для получения эффективных противовирусных лекарств, в настоящее время не может быть предложено удовлетворительного медицинского лечения для большинства вирусных заболеваний. Усилия были особенно значительны из-за появления ВИЧ и родственных вирусных инфекций, которые распространяются в мире с пугающей скоростью, кроме того, эффекты, полученные с такими агентами, как азидотимидин (AZT) и ацикловир (ACV) при СПИДе и герпесе могут быть охарактеризованы только как частично успешные. Эти наиболее обещающие противовирусные агенты, следовательно, являются производными нуклеозидов природного происхождения, которые были модифицированы или в основании или в сахарном фрагменте. Однако у них не имеется желаемого терапевтического потенциала, поскольку они вызывают серьезные побочные эффекты у некоторых пациентов или оказывают слабое или не оказывают никакого действия на других. Кроме того, лечение этими агентами является очень дорогостоящим. По этим причинам только пациенты, страдающие очень серьезными вирусными инфекциями, такими как СПИД, получают такое лечение. Пациенты, страдающие от менее серьезных, но также очень мучительных вирусных инфекций часто остаются без какого-либо лечения, предоставляя инфекции развиваться своим путем.

Пациент без лечения переносит очень высокую инфекционную нагрузку и представляет опасность для жизни окружающих его людей. Если он получает противовирусный агент, целью является снижение инфекционной нагрузки, чтобы заставить иммунную систему организма подавить инфекцию. Другой целью является снижение заразности и, следовательно, количества новых пациентов и носителей.

Таким образом потребность в соединениях, обладающих лучшим терапевтическим показателем является очевидной.

Потребность особенно велика для хронических или возвратных инфекций с опасной острой фазой или когда длительный срок болезни влияет на здоровье или самочувствие, таких как СПИД, гепатит В и С, инфекции группы герпеса и папилломные вирусные инфекции. Подобным образом также имеется потребность в противовирусных агентах, полезных для лечения животных, страдающих от вирусных заболеваний.

Для улучшения воздействия уже были разработаны производные нуклеозидов, которые модифицированны или в основании или в сахарном фрагменте. В частности были разработаны сложные эфиры жирных кислот нуклеозидов или аналогов нуклеозидов, чтобы улучшить липофильность и достигнуть лучшего прохода через мембраны.

Известны сложные эфиры арабино-фуранозил-тимина (Ara T) с насыщенными кислотами, имеющими 1-17 атомов углерода. (EP N 56265).

Также известны липидные производные, соединенные, особенно через фосфатную группу, с 5'-положением пентозной группы нуклеозида (РСТ N 90/00555). Цель этой дериватизации заключается в получении более липофильных нуклеозидов, чтобы они могли быть включены в липосомы, которые предпочтительно проникают в макрофаги и моноциты, клетки которых как было обнаружено содержат вирус ВИЧ. Установлено, что в результате достигается эффект мишени.

Из ЕР 393 920 известны ненасыщенные, предпочтительно полиненасыщенные С₁₆ и выше жирнокислотные эфиры или амиды нуклеозидов или аналогов нуклеозидов. Установленно, что жирнокислотная часть этих молекул предпочтительно представлена полиненасыщенными жирными кислотами, такими как γ-линоленовая или линолевая кислоты.

С целью улучшения эффекта предложены сложные эфиры жирных кислот противовирусных нуклеозидов или аналогов нуклеозидов, согласно изобретению, где жирная кислота является мононенасыщенной С₁₈ или С₂₀ кислотой. Соединения согласно настоящему изобретению являются относительно нетоксичными, что подтверждено экспериментами по росту молодых мышей, и также имеют низкую цитотоксичность в соответствии с наблюдениями, сделанными в экспериментах на культуре ткани.

Известно, что как нуклеозиды, так и аналоги нуклеозидов сами по себе, а также некоторые ненасыщенные жирные кислоты сами по себе проявляют противовирусные эффекты, величина эффектов, достигаемых с соединениями настоящего изобретения, указывает, что имеется не суммарная, а скорее синергетическая активность, которая является специфической для соединений формулы 1.

Механизм этих эффектов в настоящее время не известен, но они имеют порядок величины лучше, чем ближайшие родственные соединения, известные на данном уровне техники. Возможно они возникают только благодаря мембранному эффекту или эффекту мишени.

Эффекты достигаются с соединениями согласно изобретению в системах, где никакие эффекты не могут быть достигнуты с материнским нуклеозидным соединением.

Соединения настоящего изобретения описываются общей формулой I
Nu- O - Fa,
где О является кислородом;
Nu является нуклеозидом или аналогом нуклеозида;
Fa является ацильной группой мононасыщенной C₁₈ или C₂₀ жирной кислоты.

Нуклеозиды являются молекулами, содержащими гетероциклическое основание, такое как цитозин, урацил, аденин или гуанин, соединенное с рибосомной единицей. В аналогах нуклеозидов или основание или рибосомная единица модифицированы. Например, рибосомная единица может быть заменена другим сахарным фрагментом или нециклической цепью.

Жирная кислота этирифицирована гидроксильной группой в 5-положении сахарного фрагмента нуклеозида или гидроксильной группой нециклической группы нуклеозидного аналога.

Нуклеозиды или аналоги нуклеозидов, которые могут быть выбраны как Nu в соединениях формулы I, предпочтительно могут быть представлены формулой II
S - B,
где S является или моносахаридным производным, выбранным среди 1-β-D-арабинофуранозы или 2,3-ди-деокси-3-азидо-1-β-D-рибофуранозы, или выбранным в группе из 2-оксиэтоксиметила, 4-окси-3-/оксиметил/-бутила, 2-окси-1-/оксиметил/-этоксиметила или 2,3-диоксипропокси;
В является азотным основанием, выбранным среди аденина, гуанина, цитозина, урацила, тамина или производного тима общей формулы:

где X является дейтерием или фтором.

Примерами этих нуклеозидов или нуклеозидных аналогов являются:




или нуклеозидный аналог, где R является нециклической группой
Примеры группы R в различных нуклеозидных аналогах приведен ниже:


Существует несколько систем обозначения положения двойной связи в жирных кислотах. В настоящей заявке использована ω-система, где положение двойной связи в ненасыщенных жирных кислотах считается от концевого метила, Например, эйкозеновая кислота (С20:1 ω-9 имеет 20 атомов углерода в цепи и двойная связь находится между атомами углерода 9 и 10, считая от конца цепи.

Выбранная группа жирных кислот, которые могут реагировать с нуклеизидами или аналогами нуклеозидов с образованием сложных эфиров согласно настоящему изобретению с выраженной активностью, как было найдено, состоит только из C₁₈ и C₂₀ мононенасыщенных жирных кислот. Кроме того, даже хотя наблюдаемый эффект несколько различается для кислот с одинаковой длиной цепи, когда двойная связь находится в цис-или транс-конфигурации, в обоих случаях проявляется сильная активность. Также важным является положение двойной связи, поскольку оказалось, что сложные эфиры C₁₈ или C₂₀ жирных кислот, имеющих ненасыщенность в ω-9 положении будут обладать неожиданно высокой активностью.

C₁₈ или C₂₀ ω-9 жирные кислоты, которые будучи связанными с нуклеозидами, дают неожиданно высокий эффект, являются следующими: олеиновая кислота (С₁₈: 1, ω-9, цис), элайдиновая кислота (С₁₈:1, ω-9, транс), эйкозеногвая кислота (С₂₀:1, ω-9, цис) и (С₂₀:1, ω-9, транс).

Наиболее предпочтительны:
Ara A-олеиновая кислота,
Ara A-элайдиновая кислота,
Ara A-эйкозеновая кислота, цис,
Ara A-эйкозеновая кислота, транс,
Ara T-олеиновая кислота,
Ara T-элайдиновая кислота,
Ara T-эйкозеновая кислота, цис,
Ara T-эйкозеновая кислота, транс,
АСУ - олеиновая кислота,
АСУ - элайдиновая кислота,
АСУ - эйкозеновая кислота, цис,
АСУ - эйкозеновая кислота, транс,
AZT - олеиновая кислота,
AZT - элайдиновая кислота,
AZT - эйкозеновая кислота, цис,
AZT - эйкозеновая кислота, транс.

Их формулы приведены на фиг.4.

Соединения согласно настоящему изобретению обладают противовирусным действием, и, следовательно, настоящее изобретение включает фармацевтические или ветеринарные композиции, содержащие по крайней мере одно соединение формулы 1, одно или в сочетании с фармацевтически приемлемыми носителем или экципиентом.

Кроме того, некоторые нуклеозиды или аналоги нуклеозидов с мононенасыщенными жирными кислотами будут особенно пригодны для лечения определенных вирусных инфекций. Так, очевидно, что производные AZT жирных кислот являются особенно полезными для лечения СПИДа.

Жирнокислотные производные Ara T и Ara A особенно пригодны для лечения гепатита В. Сложные эфиры Ara T должны быть эффективными агентами для лечения папилломных вирусных инфекций.

Получение необходимого иммунного ответа для подавления вирусный инфекции, такой как гепатит, в некоторых случаях может быть вызвано совместным введением интерферона.

В зависимости от того, какая вирусная инфекция подвергается лечению и на какой стадии находится инфекция, или от того, является ли пациент человеком или животным, может быть использовано как системное, так и местное введение.

Для местного введения соединения могут быть сформулированы, как известно на данном уровне техники, для нанесения на кожу или слизистую в любой подходящей форме.

При местном введении соединения формулы I могут быть сформулированы в виде мази, крема, геля, тинктуры, аэрозоля, лосьона и т.п., содержащих соединения формулы I в смеси с инертным, твердым или жидким носителем, который является обычным в препаратах для местного нанесения. Особенно пригодно использование рецептуры, которая защищает активный ингредиент окисления или разложения.

Фармацевтические рецептуры, содержащие соединения формулы I, также могут быть введены системно, или энтерально, или парантерально.

При энтеральном введении соединения формулы I могут быть сформулированы, например, в мягких или твердых желатиновых капсулах, в виде таблеток, гранул, зерен или порошок, драже, сиропов, суспензий или растворов.

При парантеральном введении пригодными являются рецептуры соединений формулы I в виде растворов для инъекций или инфузий, суспензий, или эмульсий.

Препараты могут содержать инертные или фармакодинамически активные добавки. Таблетки или грануляты, например, могут содержать серию связующих агентов, наполнители, субстанцию носителя или разбавители. Жидкие рецептуры могут быть, например, в форме стерильного раствора. Капсулы могут содержать наполнитель или загуститель в дополнение к активному ингредиенту. Кроме того, также могут присутствовать улучшающие вкус добавки, а также вещества, обычно используемые в качестве консервантов, стабилизаторов, удерживающих влагу и эмульгирующих агентов, соли для изменения осмотического давления, буфеты и другие добавки.

Дозы, в которых вводят препараты согласно настоящему изобретению, могут меняться в соответствии со способом введения и путем использования, а также от требований пациента. Обычно дневная доза для системной терапии для взрослого среднего пациента будет составлять примерно 0,1-100 мг/кг массы тела/день, предпочтительно 1-20 мг/кг/день. Для местного нанесения подходящая мазь может содержать 0,1-10 мас.% фармацевтической рецептуры, особенно 0,5-5 мас.%
При желании фармацевтический препарат соединения формулы I может содержать антиоксидант, например, токоферол, N-метилтокоферамин, бутилированный оксианизол, аскорбиновую кислоту или бутилированный окситолуол.

Далее изобретение относится также к способу лечения вирусных инфекций, который заключается во введении по крайней мере одного соединения формулы I человеку или животному при необходимости такого лечения.

Кроме того, изобретение также включает способ лечения пациента, нуждающегося в таком лечении, сочетанием соединения формулы I и интерферона.

Биологическое действие
Описание чертежей
На фиг. 1а представлено ингибирующее действие сложных эфиров жирной кислоты и АСУ; соединения согласно настоящему изобретению сравнивают с известным соединением (АСУ линолеат, смотри ЕР-А-393920 и С22 мононенасыщенным ω-9 сложным эфиром (АСУ эрукат).

На фиг. 1в представлено сравнение двух соединений согласно настоящему изобретению с материнским нуклеозидом в двух различных концентрациях.

На фиг. 2 показан ингибирующий эффект, достигнутый со сложными эфирами Аrа; соединение согласно настоящему изобретению сравнивают с известным соединением - насыщенным сложным эфиром Ara T (Ara T пальмитат, смотри ЕР-56265), двумя материнскими нуклеозидами и мононенасыщенным С11 сложным эфиром [Ara T ([Ara T ундеценат).

На фиг. 3 представлено сравнение дозы выживания для молодых мышей, зараженных HSV 2, после введения АСУ и АСУ элайдата.

На фиг.4 показана полная структура наиболее предпочтительных соединений согласно настоящему изобретению.

А. Эксперименты in vitro
Метод бляшек: Культура ткани вируса
Вирусный препарат HSV 2 (3-й пассаж клинического изолята) разбавляют до 3•10³ pfu /ячейку и после этого инокулируют в клетки и инкубируют 1 час в культуре ткани верно-клеток. За это время вирус включается в клетки.

Затем эти клетки культивируют в течение 24 часов с противовирусным агентом. Затем их замораживают, что приводит к разрыву клеток и появлению свободного вируса в процессе плавления.

Готовят разбавления 1/100 или 1/10000 и прибавляют к свежим культурам ткани. Инкубирование в течение 1 часа приводит к включению вируса в клетки.

Добавляют карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ), чтобы предотвратить миграцию вируса между клетками через среду. Распространение вируса при контакте с клетками является еще эффективным, вызывая образование бляшек.

Одна бляшка будет представлять один инфекционный вирус. Следовательно, подсчет бляшек дает уточненное количество числа инфекционных вирусов.

1.1. Ацикловирные сложные эфиры
Различные противовирусные агенты согласно настоящему изобретению и известные (ЕР N 393920), а также сравниваемый сложный эфир мононенасыщенной жирной кислоты с более длинной цепью прибавляют к культуре ткани, растворенными в демитилсульфоксиде (ДМСО) в концентрации 0,94 мкмоль/д. Эта концентрация ниже эффективной ингибирующей концентрации ацикловира в использованном штамме простого Герпеса 2. Результаты показаны на фиг.1а. Как можно видеть на фиг.1а, нуклеозидные сложные эфиры жирных кислот согласно изобретению даже при этой концентрации оказывают ингибирующее действие на вирус с величинами, лучшими, чем материнское соединение ацикловир. Кроме того, фиг. 1а показывает повышенный ингибирующий эффект при сравнении с соединениями в соответствии с известным уровнем техники, предоставленными АСУ γ-линолеатом (С₁₈:3 ω-3) и также при сравнении с нуклеозидным сложным эфиром жирной мононенасыщенной кислоты с более длинной цепью, АСУ эрукатом (С₂₂:1 ω-9), имеющим ненасыщенность в таком же положении цепи. Ингибирующий эффект, достигаемый с тремя соединениями настоящего изобретения, близок к 100%.

Эффект увеличивающихся концентраций показан на фиг.1в. В данном тесте со штаммом HSV 2, относительно устойчивом к АСУ, испытуемые соединения: АСУ, АСУ-олеат и АCV-элайдат, добавляют при 0,9 мкмоль/л или 2,2 мкмоль/л. Как можно видеть, ингибирующее действие соединений согласно настоящему изобретению сильно возрастает при более высокой концентрации, тогда как действие материнского нуклеозида, ACV, остается на том же уровне.

1.2. AraT сложные эфиры
Проводят соответствующие эксперитенты с Ara T, Ara T-олеатом, одним сложным эфиром насыщенной жирной кислоты, представляющим уровень техники, Ara T-пальмитатом (С₁₆:0), и Ara T-ундеценатом (С₁₁:11, ω-I), сложным эфиром мононенасыщенной жирной кислоты с более короткой цепью. Противовирусные агенты прибавляют в концентрации 3,9 мкмоль/л. Результаты представлены на фиг.2.

Как отмечалось ранее для ACV-сложных эфиров, Ara T сложный эфир согласно изобретению, Ara T олеат, обладает значительно улучшенной ингибирующей активностью. В этом тесте ингибирование достигает 100%.

Б. Достигнутые результаты in vivo - снижение смертности.

Вирус простой Герпес 2
Эксперименты in vivo проводят с использованием самок мышей 3-4 недельного возраста N MRI. Этот штамм является чувствительным к вирусу человеческого герпеса в возрасте примерно до 6 недель, после этого они становятся относительно устойчивыми. Используют мышей ниже этого критического возраста, имеющих массу 13-17 г.

Вирус герпеса 2 является третьим пассажем изолята и его инокулируют в левую долю уха по стандартизованной процедуре. Через 3 дня устанавливают наличие местной инфекции. В этих условиях HSV 2 является высоко нейротрофическим и у 95% животных развивается фатальный энцефалит, обычно через 7-9 дней. Следовательно, HSV 2 является особенно пригодным в качестве системы оценки терапевтической эффективности путем подсчета количества случаев энцефалита.

Введение испытуемых соединений проводят при очень низкой концентрации, чтобы лучше наблюдать разницу в действии. Животные получают приблизительно 12 мг/кг массы тела/день с питьевой водой. Соединения добавляют к питьевой воде в виде мицелл с деоксихолатом. Конечная концентрация составляет 0,22 ммоля /л.

Как контрольная группа, так и группы, получавшие испытуемые соединения, состоят из 10 животных каждой группе. Испытуемыми соединениями были ACV-элайтат и ACV в сравнении с контролем. Лечение начинали на день 3 после инокуляции. За это время инфекция хорошо обоснавалась в центральной нервной системе. Смертность животных наносят на график и результаты приведены на фиг.3.

Эта тест-система представляет собой очень жесткие условия.

Как видно из фиг.3, все животные контрольной группы умерли от инфекции, Материнский нуклеозид ацикловир не оказывает терапевтического действия при этой концентрации, когда обработку начинают после хорошо развившейся инфекции в день 3 после заражения.

Как можно видеть, количество выживших повышается от 0 до 40% у животных, получивших ACV-элайтат. Через 21 день животных этой группы осматривали взъерошиванием, у них не было признаков энцефалита.

Соединения общей формулы 1 в p общем могут получены в соответствии со следующим уравнением реакции:

где Nu, O и Fa имеют указанные ранее значения, а Х может быть Cl, Br, O-CO-R', где R' является Fa, CH₃, CH₂CH,₃ или CF₃.

Таким образом реакция протекает путем ацилирования нуклеозида или его аналога. Ее проводят при использовании подходящих реактивных производных жирных кислот, предпочтительно галоидангидридов и антигидридов кислот. Когда используют галоидангидрид, такой как хлорангидрид кислоты, добавляют третичный аминный катализатор, такой как триэтиламин, N,N-диметиланилин, пиридин или N, N-диметиламинопиридин, в реакционную смесь для связывания высвобождающейся галоидводородной кислоты. Реакцию предпочтительно проводят в инертном растворителе, таком как N,N-диметилформамид или галоидированный углеводород, такой как дихлорметан. При желании любой из вышеупомянутых третичных аминных катализаторов может быть использован в качестве растворителя, при этом внимательно следят, чтобы имелся подходящий избыток. Температура реакции варьируется между 0^oC и 40^oC, предпочтительно, 5^oC - 25^oC. Реакция практически завершается за 24-60 часов. За ходом реакции следят, используя тонкослойную хроматографию (ТСХ) и подходящую систему растворителей. По окончании реакции по данным ТСХ продукт экстрагируют органическим растворителем и очищают хроматографией и/или перекристаллизацией из подходящей системы растворителей. Если в нуклеозиде или его аналоге имеется более одной гидроксильной или аминогруппы, может быть получена смесь соединений. Индивидуальные моно или поли- ацилированные соединения могут быть разделены с помощью мгновенной хроматографии.

Способ проиллюстрирован следующими примерами.

Пример 1
5'-0-Гексадеканоил-1-β-γ-арабинофуранозилтимин
К раствору 0,5 г (1,94 • 10^-3 моля) I-β-D-арабинофуранозилтемина (ARA-T) в 20 мл безводного пиридина прибавляют 3 мл исходного раствора 0,58 г (2,13 • 10^-3 моля) пальмитоилхлорида в 5,5 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре 12 часов, когда тонкослойная хроматография показывает частичную конверсию. Прибавляют остальной раствор пальмитоилхлорида и полученную смесь перемешивают 24 часа. Реакционную смесь выпаривают досуха и остаток распределяют между 50 мл хлороформа и 50 мл воды. Центрифугирование полученной эмульсии дает полутвердый продукт, который перекристаллизовывают из этанола/гептана 1:1, получают 0,7 г (72%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,32 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,58 (1Н, д, ОН-3'), 4,50 (1Н, м, Н-5'₁), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 4,02 (1Н, м, Н-2'), 3,92 (1Н, м, Н-3'), 3,88 (1Н, м, Н-4'), 2,31 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,55 (2Н, м, СН₂-C-СОО), 1,20 (24Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃- СН₂)
¹³С-ЯРМ (ДМСО-d₆), 75 МГц/ δ :172,81 (СОО), 163,78 (СО-4), 150,37 (СО-2), 137,88 (С-6), 107,21 (С-5), 85-29 (С-1'), 81,74 (С-4'), 76,06 (С-3'), 74,65 (С-2'), 63,23 (С-5'), 33,41, 31,26, 28,97 28,82, 28,66, 28,33, 24,44, 22,05 (СН₂), 13,89 (CH₃СН₂), 12,15 (СН₃- 5).

Пример 2
5'-0-/цис-9''-Гексадеканоил/-1-β-D-арабинофуранозилтемин
К раствору 4,0 г (15,72 • 10^-3 моля) цис-9-гексадекеновой кислоты в 40 мл безводного бензола прибавляют 1,5 мл (17,72 • 10^-3 моля) оксалилхлорида и перемешивают смесь в азоте при 35^oC в течение 3 часов. Удаляют растворитель и избыток реагента в высоком вакууме, а остаток разбавляют 10 мл дихлорментана, чтобы получить исходный раствор цис-9-гексадекеноилхлорида. К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пирнидина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Прибавляют дополнительно 4 мл исходного раствора порциями по 1 мл с интервалом примерно 8 часов. После суммарного времени реакции 60 часов удаляют растворители в высоком вакууме и разбавляют остаток 50 мл воды и 50 мл хлороформа. Центрифугирование полученной эмульсии дает полутвердую массу, которую перекристаллизовывают из этанола/гептана 1: 1, получают 1,15 г (60%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,32 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,3 (2Н, м, -СН= СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н-2'), 3,95 (1Н, м, Н-3'), 3,90 (1Н, м, Н-4'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,98 (4Н, м, = СН-СН₂-), 1,75 (3Н, т, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 20 (16Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃- СН₂)
¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ 172,31 (СОО), 163,31 (СО-4), 149,90 (СО-2), 137,89 (С-6), 129,13 и 129,03 (-СНОСН-), 106,74 (С-5), 84,83 (С-1'), 81,26 (С-4'), 75,59 (С-3'), 74,16 (С-2'), 62,76 (С-5'), 32,98, 30,62, 28,57, 28,50, 28,02, 27,91, 27,84, 27,76, 26,07, 26,03, 23,95, 21,56 (СН₂), 13,39 (СН₃-СН₂), 11,68 (СН₃-5).

Пример 3
5'-0-/цис-6''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами приблизительно 12 часов. После суммарного времени реакции 60 часов выпаривают растворители в высоком вакууме и остаток разбавляют 65 мл хлороформа и 65 мл воды. Полученную эмульсию центрифугируют и органическую фазу обрабатывают рассолом, концентрируют и остаток перекристаллизовывают, получают 1,1 г (55%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ : 11,28 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,28 Э2Н, м, -СН= СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н-2'), 3,95 (1Н, м, Н-3'), 3,90 (1Н, м, Н-4'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,97 (4Н, м, = СН-СН₂-), 1,75 (3Н, т, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃- СН₂)
¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ : 172,73 (СОО), 163,81 (СО-4), 150,40 (СО-2), 137,88 (С-6), 129,88 и 129,10 (СН=СН), 107,24 (С-5), 85,34 (С-1'), 81,76 (С-4'), 76,10 (С-3'), 74,66 (С-2'), 63,28 (С-5'), 33,29, 31,28, 28,99, 28,84, 28,69, 28,57, 28,43, 26,54, 26,29, 24,07, 22,07 (СН₂), 13,89 (СН₃-СН₂), 12,16 (СН₃-5).

Пример 4
5'-0-/цис-9''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) цис-9-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами примерно 12 часов. После суммарного времени реакции 60 часов растворители выпаривают в высоком вакууме и остаток разбавляют 65 мл хлороформа и 65 мл воды. Полученную эмульсию центрифугируют и органическую фазу обрабатывают рассолом, концентрируют и перекристаллизовывают остаток, получают 1,2 г (60%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆/δ : 11,28 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2'), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,28 (2 Н, м, -СН=СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н-2'), 3,95 (1Н, м, Н-3'), 3,95 (1Н, м, Н-3'), 3,90 (1Н, м, Н-4'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,97 (4Н, м, СН₂СН=), 1,75 (3Н, т, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (20Н, м, СН₂), 0,35 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,75 (СОО), 163,80 (СО-4), 150,39 (СО-2), 137,88 (С-6), 129,58 и 129,49 (СН=СН), 107,21 (С-5), 85,36 (С-3'), 81,79 (С-4'), 76,11(С-1'), 74,67 (С-2') 63,26 (С-5'), 33,42, 31,27, 29,08, 29,02, 28,84, 28,68, 28,55, 26,43, 28,37, 26,54, 24,44, 22,07 (СН₂), 13,86 (СН₃-CH₂), 12,15 (СН₃-5).

Пример 5
5'-0-/транс-9''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) транс-9-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами примерно 12 часов. После суммарного времени реакции 60 часов выпаривают растворители в высоком вакууме и остаток разбавляют 65 мл хлороформа и 65 мл воды. Обычная обработка и перекристаллизация дают 1,30 г (65%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,35 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,35 (2 Н, м, -СН= СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 4,0 (1Н, м, Н-2'), 3,95 (1Н, м, Н-3'), 3,90 (1Н, м, Н-4'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,93 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,51 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,77 (СОО), 163,80 (СО-4), 150,45 (СО-2), 137,98 (С-6), 130,03 и 129,97 (СН=СН), 107,24 (С-5), 85,44 (С-1'), 81,89 (С-4'), 76,17(С-3'), 74,69 (С-2') 63,34 (С-5'), 33,48, 31,99, 31,35, 29,6, 29,00 28,91, 28,78, 28,61, 28,56, 28,44, 28,40, 24,50 и 22,15 (СН₂), 13,90 (СН₃-CH₂), 12,20 (СН₃-5).

Пример 6
5'-0-/цис-11''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора цис-11-октадекеноилхлорида (2,1 г, 6,98 • 10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным образом и сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента 5% метанола в хлороформе. Гомогенные фракции выпаривают, получают 1,2 г (55%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,32 (2Н, м, -СН=СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁ ), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н=2'), 3,90 (1Н, м, Н-3'), 3,88 (1Н, м, Н-4'), 2,33 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (20Н, м, СН₂), 0,95 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,78 (СОО), 163,78 (СО-4), 150,38 (СО-2), 137,87 (С-6), 129,56 (СН-СН), 107,21 (С-5), 85,31 (С-1'), 81,73 (С-4'), 76,07(С-3'), 74,65 (С-2') 63,24 (С-5'), 33,41, 31,10, 29,05, 28,81, 28,74, 28,64, 28,50, 28,34, 28,24, 26,56, 26,52, 24,43, 22,04 (СН₂), 13,85 (СН₃-CH₂), 12,15 (СН₃-5).

Пример 7
5'-0-/транс-11''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) транс-11-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным образом и сырой продукт перекристаллизовывают, получают 1,3 г (65%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,35 (2 Н, м, НС= СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁ ), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 4,05 (1Н, м, Н-2'), 3,95-3,90 (2Н, м, Н-3' и Н-4'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН= ), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ 172,75 (СОО), 163,79 (СО-4), 150,38 (СО-2), 137,90 (С-6), 129,98 (СН=СН), 107,19(С-5), 85,34 (С-1'), 81,77 (С-4'), 76,11 (С-3'), 74,65 (С-2') 63,26 (С-5'), 33,42, 31,91, 31,10, 28,95, 28,83, 28,76, 28,65, 28,40, 28,37, 28,12, 24,44 и 22,04 (СН₂), 13,83 (СН₃-CH₂), 12,13 (СН₃-5).

Пример 8
5'-0-/цис-11''-Эйкозеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,38 • 10^-3 моля) цис-11-эйкозеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают смесь в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным образом и сырой продукт очищают на колонке с силикагелем, используя 10% метанола в хлороформе в качестве элюэнта. Гомогенные фракции выпаривают, получают 1,25 г (58%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,35 (2Н, м, СН= СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н-2'), 3,90 (1Н, м, Н-3'), 3,88 (1Н, м, Н-4'), 2,33 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН= ), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,52Т (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (24Н, м, СН₂), 0,95 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,25 (СОО), 163,30 (СО-4), 149,89 (СО-2), 137,38 (С-6), 129,05 (СН= СН), 106,71 (С-5), 84,85 (С-1'), 81,28 (С-4'), 75,60 С-3'), 74,16 (С-2') 62,76 (С-5'), 32,92, 30,78, 28,58, 28,34, 28,19, 28,08, 27,88, 26,04, 23,95, 21,58 (СН₂), 13,36 (СН₃-CH₂), 11,65 (СН₃-5).

Пример 9
5'-0-/цис-13''-Докозеноил/-1-β-D-арабинофуранозилтимин
К раствору 1,0 г (3,87 • 10^-3 моля) ARA-T в 10 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,15 г (6,02 • 10^-3 моля) цис-13-докозеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают и очищают продукт на колонке с силикагелем (10% МеОН/СHCl₃), получают 1,15 г (51%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,25 (1Н, с, N - Н), 7,35 (1Н, с, Н-6), 6,05 (1Н, д, Н-1'), 5,65 (1Н, д, ОН-2' ), 5,55 (1Н, д, ОН-3'), 5,32 (2 Н, м, -СН=СН), 4,45 (1Н, м, Н-5'₁ ), 4,15 (1Н, м, Н-5'₂), 3,98 (1Н, м, Н-2'), 3,90 (1Н, м, Н-3'), 3,88 (1Н, м, Н-4'), 2,33 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,75 (3Н, с, СН₃-5), 1,52 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1, 25 (28Н, м, СН₂), 0,95 (3Н, т, СН₃- СН₂).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,63 (СОО), 163,48 (СО-4), 150,43 (СО-2), 137,88 (С-6), 129,44 (СН= СН), 107,21 (С-5), 85,51 (С-1'), 81,92 (С-4'), 76,20(С-3'), 74,69 (С-2'), 63,36 (С-5'), 33,47, 31,40, 29,20, 29,15, 29,03, 28,83, 28,73, 28,55, 26,63, 24,50, 22,16 (СН₂), 13,79 (СН₃-CH₂), 12,14 (СН₃-5).

Пример 10
9-/2'-/цис-9''-Гексадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1,0 г (4,43 • 10^-3 моля) 9-/2-оксиэтоксиметил/гуанина (ацикловир, ACV) в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 4,29 г (15,72 • 10^-3 моля) цис-9-гексадекеноилхлорида в 10 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Прибавляют дополнительно 4 мл исходного раствора порциями по 2 мл с интервалом примерно 10 часов. После 60 часов суммарного времени реакции растворители удаляют в высоком вакууме и остаток разбавляют 65 мл хлорформа и 65 мл воды. Центрирфугирование и перекристаллизация (этанол) полученной полутвердой массы дают 1,35 г (66%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,82 (1Н, с, СН-8), 6,50 (2Н, с, НН₂), 5,35 (2Н, с, СН₂-1'), 5,2-5,4 (2Н, м, СН=СН), 4,07 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,21 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,98 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,48 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (16Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,72 (СОО), 156,79 (СО-6), 153,91 (С-2), 151,41 (С-4), 137,62 (СН-8), 129,56 (СН=СН), 116,43 (С-5), 71,81 (СН₂ -1'), 66,55 (СН₂ -3'), 62,53 (СН₂ -4'), 33,28, 31,14, 29,08, 28,54, 28,47, 28,40, 28,29, 26,59, 24,35, 22,07 (СН₂), 13,86 (СН₃ СН₂).

Пример 11
9-/2'-/цис-6''-Октадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1,0 г (4,43 • 10^-3 моля) ACV в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) цис-6-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным путем и перекристализовывают продукт, получают 1,6 г (80%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,82 (1Н, с, СН-8), 6,52 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,07 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,25 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,48 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,20 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,66 (СОО), 156,72 (СО-6), 153,87 (С-2), 151,37 (С-4), 137,58 (СН-8), 129,85 и 129,17 (СН=СН), 116,42 (С-5), 71,81 (СН₂ -1'), 66,52 (СН₂ -3'), 62,52 (СН₂ -4'), 33,28, 31,25, 29,06, 28,97, 28,85, 28,66, 28,57, 28,43, 26,56, 26,26 23,96, 22,05 (СН₂), 13,88 (СН₃-СН₂).

Пример 12
9-/2'-/цис-9''-Октадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 2,0 г (8,89 • 10^-3) ACV в 40 мл безводного пиридина и 20 мл N, N-диметилформамида прибавляют 4 мл исходного раствора 4,25 г (14,12 • 10³ моля) цис-9-октадекеноилхлорида в 8 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся раствор хлорингидрида кислоты прибавляют и порциями по 4 мл каждые 8 часов. После суммарного времени реакции 40 часов удаляют растворители в высоком вакууме. Остаток суспендируют в 50 мл воды и 100 мл хлороформа. Центрифугирование эмульсии дает полутвердую массу, которую перекристаллизовывают из этанола, получают 3,7 г (85%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,82 (1Н, с, СН-8), 6,52 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,07 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,25 (2Н, т, СН₂-С-СОО), 1,98 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,48 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,20 (20, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ/ : 172,72 (СОО), 156,70 (СО-6), 153,85 (С-2), 151,37 (С-4), 137,58 (СН-8), 129,58 (СН=СН), 116,46 (С-5), 71,76 (СН₂ -1'), 66,51 (СН₂ -3'), 62,50 (СН₂ -4'), 33,25, 31,23, 29,03, 28,78, 28,63, 28,54, 28,48, 28,42, 28,35, 26,54, 24,32, 22,03 (СН₂), 13,87 (СН₃ СН₂).

Пример 13
9-/2'-/транс-9''-Октадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 2,0 г (8,89 • 10^-3 моля) ACV в 40 мл безводного пиридина и 20 мл N, N-диметилформамида прибавляют 4 мл исходного раствора 4,25 г (14,12 • 10^-3моля) транс-9-октадекеноилхлорида в 8 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в азоте. Оставшийся раствор хлорангидрида кислоты прибавляют порциями по 4 мл каждые 8 часов. После суммарного времени реакции 50 часов отгоняют растворители в высоком вакууме. Остаток суспендируют в 50 мл воды и 100 мл хлороформа и центрифугируют эмульсию, получают полутвердую массу, которую перекристаллизовывают из этанола, получают 3,75 г (86%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,82 (1Н, с, СН-8), 6,75 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,07 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,21 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,98 (4Н, м, СН₂-С=), 1,45 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,77 (СОО), 156,72 (СО-6), 154,17 (С-2), 151,36 (С-4), 137,52 (СН-8), 130,03 (СН=СН), 116,44 (С-5), 71,77 (СН₂ -1'), 66,54 (СН₂ -3'), 62,55 (СН₂ -4'), 33,28, 31,93, 31,26, 28,98, 28,95, 28,82, 28,69, 28,49, 28,38, 28,33, 24,35 и 22,08 (СН₂), 13,91 (СН₃ - СН₂).

Пример 14
9-/2'-/цис-11''-Октадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1,0 г (4,43 • 10^-3 моля) ACV в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 г (6,98 • 10^-3 моля) цис-11-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным путем и продукт перекристализовывают, получают 1,8 г (90%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,82 (1Н, с, СН-8), 6,52 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,07 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,25 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-СН=), 1,48 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,20 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,74 (СОО), 156,62 (СО-6), 153,91 (С-2), 151,34 (С-4), 137,58 (СН-8), 129,58 (СН=СН), 116,22 (С-5), 71,82 (СН₂ -1'), 66,55 (СН₂ -3'), 62,50 (СН₂-4'), 33,26, 31,09, 29,06, 28,81, 28,79, 28,62, 28,54, 28,36, 28,23, 26,55, 24,33, 22,04 (СН₂), 13,87 (СН₃ СН₂).

Пример 15
9-/2'-/транс-11''-Октадекеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1,0 г (4,43 • 10^-3 моля) ACV в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора транс-11-октадекеноилхлорида (2,1 г, 6,98 • 10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают обычным путем и сырой продукт перекристаллизовывают, и получают 1,7 (78%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,60 (1Н, с, NН), 7,81 (1Н, с, СН-8), 6,60 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,05 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,22 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂-С=), 1,45 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,20 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ 172,75 (СОО), 156,76 (СО-6), 153,78 (С-2), 151,41 (С-4), 137,63 (СН-8), 130,03 (СН=СН), 116,48 (С-5), 71,79 (СН₂ -1'), 66,54 (СН₂ -3'), 62,52 (СН₂ -4'), 33,29, 31,92, 31,09, 28,95, 28,79, 28,63, 28,38, 28,12, 28,35 и 22,05 (СН₂), 13,86 (СН₃-СН₂).

Пример 16
9-/2'-/цис-11''-Эйкозеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1,0 г (4,43 • 10^-3 моля) ACV в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 1,59 г (4,83 • 10^-3 моля) цис-11-эйкозеноилхлорида в 4 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся раствор хлорангидирад кислоты прибавляют порциями по 1 мл каждые 8 часов. После суммарного времени реакции 60 часов удаляют растворители в высоком вакууме. Остаток обрабатывают хлороформом и водой и окончательно очищают на колонке с силикагелем (10% МеОН) (СНСI), получают 0,92 г (40%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,81 (1Н, с, СН-8), 6,50 (2Н, с, NН₂), 5,25-5,4 (4Н, м, СН₂-1' и СН=СН), 4,08 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,21 (2Н, т, СН₂-СОО), 2,0 (4Н, м, СН₂-С=), 1,45 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (24Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,73 (СОО), 156,70 (СО-6), 153,90 (С-2), 151,37 (С-4), 137,59 (СН-8), 129,58 (СН=СН), 116,35 (С-5), 71,81 (СН₂ -1'), 66,54 (СН₂ -3'), 62,52 (СН₂ -4'), 33,28, 31,26, 29,09, 28,82, 28,67, 28,58, 28,40, 26,56, 24,35, и 22,07 (СН₂), 13,88 (СН₃ СН₂).

Пример 17
9-/2'-/цис-13''-Докозеноилокси/этоксиметил/-гуанин
К раствору 1 г (4,43 • 10^-3 моля) ACV в 20 мл безводного пиридина и 10 мл N, N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора цис-13-докозеноилхлорида (2,10 г, 5,88•10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Реакцию завершают и продукт перекристаллизовывают (этанол), получают 1,24 г (52%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 10,65 (1Н, с, NН), 7,80 (1Н, с, СН-8), 6,50 (2Н, с, NН₂), 5,2-5,4 (4Н, м, СН₂-1', СН=СН), 4,10 (2Н, т, СН₂-4'), 3,65 (2Н, т, СН₂-3'), 2,22 (2Н, т, СН₂-СОО), 2,05 (4Н, т, СН₂-С=), 1,45 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (28Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ 172,74 (СОО), 156,70 (СО-6), 153,87 (С-2), 151,38 (С-4), 33,28, 31,25, 29,06, 28,98, 28,85, 28,66, 28,56, 28,39, 26,53, 24,35, 22,06 (СН₂), 13,89 (СН₃-СН₂).

Пример 18
5-О-/цис-9''-Октадекеноил/-3'-деокси-3'-азидо-тимидин
К раствору 1,0 г 3'-деокси-3'-азидотимидина (AZT) (3,75 • 10^-3 моля) в 20 мл безводного пиридина прибавляют 2 мл исходного раствора цис-9-октадекеноидхлорида (70%, 1,7 г, 3,9 • 10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами примерно 8 часов. После суммарного времени реакции 60 часов растворители отгоняют в высоком вакууме и остаток разбавляют 100 мл хлороформа и 50 мл воды. Органическую фазу обрабатывают рассолом, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получают вязкое масло. Продукт очищают хроматографией на колонке, элюируя 3% метанола в хлороформе. Гомогенные фракции выпаривают, получают 1,65 г (82%) целевого соединения в виде бесцветного вязкого масла.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 11,25 (1Н, с, NН), 7,45 (1Н, с, Н-6), 6,12 (1Н, т, Н-1'), 5,25-5,4 (2Н, м, СН=СН), 4,45 (1Н, м, Н-3'), 3,95 (1Н, м, Н-4'), 2,25-2,45 (2Н, м, СН₂-2'), 2,35 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,97 (4Н, м, СН₂-СН= ), 1,77 (3Н, с, СН₃-5), 1,53 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂).

¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,51 (СОО), 163,58 (СО-4), 150,32 (СО-2), 135,91 (СН-6), 129,55 и 129,49 (СН=СН), 109,81 (С-5), 83,61 (СН-1'), 80,61 (СН-3'), 63,11 (СН₂ -5'), 60,17 (СН-4') 35,67 (СН₂-2'), 33,30, 31,29, 29,10, 29,06, 28,85, 28,70, 28,61, 28,54, 28,43, 26,56, 24,30, 22,09 (СН₂), 13,85 (СН₃-СН₂),12,04 (СН₃-5).

Пример 19
5-О-/цис-9''-Октадекеноил/-9-β- D-арабинофуранозил-аденин
К раствору 1,0 г (3,74 • 10^-3 моля) 9-β-D-арабинофуранозил-аденина (ARA-A) в 10 мл безводного пиридина и 20 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора 2,1 (6,98 • 10^-3 моля цис-9-октадекеноилхлорида в 6 мл дихлорментана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами примерно 8 часов. После суммарного времени реакции 50 часов растворители отгоняют в высоком вакууме и растворяют остаток в 10% метанола в хлороформе и фильтруют через колонку с силикагелем. Фракции концентрированного продукта очищают на колонке с силикагелем, получают 0,6 г (30%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 8,18 (1Н, с, ArН), 8,12 (1Н, с, ArН), 7,25 (2Н, с, NН-2), 6,30 (1Н, д, Н-1'), 5,78 (1Н, д, ОН-2'), 5,68 (1Н, д, ОН-3'), 5,2-5,4 (2Н, м, СН=СН), 4,38 (1Н, м, Н-5'₁), 4,25 (1Н, м, Н-5'₂), 4,15 (2Н, м, Н-2', Н-3'), 3,95 (1Н, м, Н-4'), 2,30 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,95 (4Н, м, СН₂С=), 1,50 (2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25 (20Н, м, СН₂), 0,85 ( 3Н, т, СН₃-СН₂)
¹³C-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ 172,73 (СОО), 155,43 (С-6), 151,85 (С-2), 149,28 (С-4), 140,60 (С-8), 129,66 и 129,54 (СН=СН), 118,22 (С-5), 83,82 (С-1'), 81,23 (С-4'), 75,88 (С-2'), 75,11 (С-3'), 63,88 (С-5'), 33,37, 31,29, 29,09, 29,05, 28,85, 28,70, 28,59, 28,48, 28,42, 26,56, 24,41, 22,08 (СН₂), 13,87 (СН₃-СН₂).

Пример 20
5'-О-/транс-9''-Октадекеноил/-1-β-D-арабинофуранозил-/N-6-метил/-аданин
К раствору 1,0 г (3,55 • 10^-3 моля) 9-β-D-арабинофуранозил-N-6-метил-аденина в 10 мл безводного пиридина и 15 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора транс-9-октадекеноилхлорида (2,0 г 6,64 • 10^-3моля) в 6 мл дихлорметана и перемешивают реакционную смесь в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 20 мл с интервалами примерно 8 часов. После суммарного времени реакции 60 часов растворители отгоняют в высоком вакууме и остаток растворителя в 5% метанола и хлороформе и повторно хроматографируют на колонке с силикагелем, получают 0,7 г (36%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц/δ : 8,25 (1Н, с, ArН), 8,10 (1Н, с, ArН), 7,75 (1Н, с, NН), 6,29 (1Н, д, Н-1'), 5,78 (1Н, д, ОН-2'), 5,70 (1Н, д, ОН-3'), 5,25-5,35 (2Н, м, СН= СН), 4,40 (1Н, м, Н-5'₁), 4,27 (1Н, м, Н-5'₂), 4,15 (2Н, м, Н-2', Н-3'), 3,95 (1Н, м, Н-4'), 2,95 (3Н, шир, Н-СН₃), 2,30 (2Н, т, СН₂-СОО), 1,90 (4Н, м, СН₂-С=), 1,50 ( 2Н, м, СН₂-С-СОО), 1,25(20Н, м, СН₂), 0,85 (3Н, т, СН₃-СН₂)
¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ: 172,75 (СОО), 154,89 (С-6), 152,43 (С-2), 149,33 (С-4), 140,02 (С-8), 129,99 (СН=СН), 118,20 (С-5), 83,61 (С-1), 81,06 (С-4'), 75,77 (С-2'), 75,06 (С-3'), 63,76 (С-5'), 33,36, 31,90, 31,25, 28,97, 28,90, 28,81, 28,68, 28,47, 28,36, 28,30 (СН₂), 27,20 (Н-СН₂), 24,41 22,07 (СН₂), 13,89 (СН₃-СН₂).

Пример 21
9-/4'/транс-9''Октадекеноилокси/-3'-оксиметилбутил/-гуанин
К раствору 1,0 г (3,98 •10^-3 моля) 9-/4-окси-3-оксиметилбутил/гуанина (пенсикловир) в 10 мл безводного пиридина и 40 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора транс-9-октадекеноилхлорида (2,1 г, 6,98 • 10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в азоте при комнатной температуре. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалами примерно 8 часов. После суммарного времени реакции 65 часов отгоняют растворители в высоком вакууме и остаток растворяют в 15% метанола в хлороформе и элюируют через колонку с силикагелем. Гомогенные фракции перекристаллизовывают из этанола, получают 0,45 г (22%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ : 10,50 (1H, с, NH), 7,65 (1H, c, CH-8), 6,43 (2H, c, NH₂), 5,33 (2H, м, CH=CH), 4,62 (1H, т, OH), 4,00 (4H, м, CH₂-H) и RCOOCH₂), 3,38 (2H, м, CH₂-OH), 2,25 (2H, т, CH₂-COO), 1,90 (4H, м, CH₂-C= ), 1,60-1,80 (CH и CH₂-CH₂N), 1,45 (2H, м, CH₂-C-COO), 1,20 (20H, м, CH₂), 0,85 (3H, т, CH₃).

¹³С-ЯМР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ : 172,90 (СОО), 156,75 (С-6), 153,40 (С-2), 151,07 (С-4), 137,22 (С-8), 130,02 (CH=CH), 116,57 (С-5), 63,80 (RCOOCH₂), 60,50 (CH₂OH), 40,67 (CH₂N), 37,54 (CH), 33,44, 31,88, 31,88, 31,22, 28,95, 28,90, 28,77, 28,64, 28,43, 28,27, 24,38, 22,04 (CH₂), 13,90 (CH₃).

Пример 22
9-/2'-(транс-9''-октадекеноилокси)-1'-оксиметилэтоксиметил/-гуанин
К раствору 9-{ [2-окси-1-(оксиметил)этокси]метил}гуанина (Гансикловир) (0,655 г, 2,56 • 10^-3 моля) в 10 мл безводного пиридина и 40 мл N,N-диметилформамида прибавляют 2 мл исходного раствора транс-9-октадекеноилхлорида (1,3 г, 4,32 • 10^-3 моля) в 6 мл дихлорметана, реакционную смесь перемешивают в азоте при 40^oC. Оставшийся исходный раствор прибавляют порциями по 2 мл с интервалом примерно 10 часов. Остаток суспендируют в 100 мл воды и 100 мл дихлорметана и центрифугируют эмульсию, получают полутвердую массу, которую перекристаллизовывают из этанола, получают 0,9 г (60%) целевого соединения в виде белого твердого продукта.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ : 10,60 (1H, с, NH), 7,81 (1H, c, CH-8), 6,58 (2H, c, NH₂), 5,45 (2H, с, OCH₂N), 5,35 (2H, м, CH=CH), 4,85 (1H, т, OH), 4,08 (1H, м,), 3,90 (1H, м) и 3,75 (1H, м) (RCOOCH₂ и CH-O), 3,35 (2H, м, CH₂-OH), 2,08 (2H, т, CH₂-COO), 1,93 (4H, м, CH₂-C=), 1,10-1,45 (22H, м, CH₂), 0,85 (3H, т, CH₂CH₂).

¹³С-ЯСР (ДМСО-d₆, 75 МГц) δ : 172,64 (СОО), 156,85 (С-6), 153,84 (С-2), 151,34 (С-4), 137,62 (С-8), 130,02 (CH=CH), 116,48 (С-5), 76,88 (CH-O), 71,29 (OCH₂N), 63,13 (RCOOCH₂), 60,39 (CH₂OH), 33,19, 31,97, 31,29, 29,02, 28,85, 28,72, 28,53, 28,41, 27,07, 27,02, 24,32, 22,10 (CH₂), 13,90 (CH₃).

ПРИМЕРЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА
Пример Д
Препарат в виде крема для местного применения, содержащий в качестве активного ингредиента элаидат ACV, получают в следующей композиции:
Компонент, мас.%:
ACV элаидат (активный ингредиент) - 5,00
Эмульгирующий воск - 10,0
Белый мягкий парафин - 5,0
Минеральное масло - 15,00
Жидкий силикон 200 - 1,00
Полисорбат 60 - 1,00
Пропилпарабен - 0,20
Глицерол - 4,00
Метилпарабен - 0,20
Вода - 58,60
Крем готовят как две отдельные фазы, А и В, которые затем смешивают вместе для получения однородного гомогенного крема.

Фаза А включает эмульгирующий воск, белый мягкий парафин, минеральное масло, жидкий силикон 200 (увеличивает чувствительность кожи и способность распространяться на пропилпарабен и ACV элаидат.

Вторая фаза, фаза В, включает глицерол (сорастворитель для улучшения смягчения), метилпарабен и воду.

Две фазы независимо друг от друга смешивают при 70^oC до тех пор, пока все ингредиенты не будут смешены вместе.

Затем фазу В добавляют к фазе А при 70^oC и смешивание продолжают в течение 5 мин. Полученную смесь затем снимают с источника нагревания и, энергично перешивая, объединяют до тех пор, пока не получится однородный крем при снижении температуры до 30 - 35^oC.

Пример F
Этот пример иллюстрирует приготовление липосомного препарата, содержащего элаидат ddC для орального введения. Получают исходный раствор лецитина (100 мг), растворенный в смеси хлороформ/метанол (1 : 1 об./об. 2 мл), и фосфатидилглицерол (10 мг), растворенный в той же самой смеси растворителей (1,0 мл).

В 25 мл колбе с круглым дном смешивают 0,2 мл раствора лецитина и 0,1 мл раствора фосфатидилглицерола. Активный ингредиент, элаидат ddC (5 мг), растворенный в смеси хлороформ/метанол (1 : 1 об/об, 5 мл), добавляют к смеси, получая прозрачный раствор (необходимо легкое нагревание).

Растворитель удаляют, используя роторный выпарной аппарат, оставляя тонкую "стекловидную" пленку. Ее сушат в высоком вакууме в течение 1 ч. В колбу добавляют фосфатный буфер (1,5 мл) и энергично встряхивают.

Получают суспензию молочного цвета, которая стабильна к диализу против фосфатного буфера.

Частицы суспензии имеют размер в интервале 4-15 ММ (среднее 10μM), измерено над ситом Малвена.

После выстаивания (в течение 5 дней при 5^oC) суспензия остается стабильной. Наблюдается некоторое расслаивание, не осаждение (твердое вещество) эмульсии.

Пример Е
В этом примере готовят капсулы, наполненные сухой смесью, содержащей элаидат GCV в качестве активного ингредиента.

Препарат для наполнения капсулы следующий:
Компонент вес (г)
GCV элаидат - 6,600
Лактоза - 4,950
Кукурузный крахмал - 1,518
Коллоидальный кремнезем - 0,066
Стеарат магния - 0,006
Каждый из вышеуказанных ингредиентов аккуратно взвешивают и затем переносят в полипропиленовый сосуд и смешивают вместе. Полученную смесь затем пропускают через 500μMсито. Смесь со сборных противней затем смешивают и пропускают через то же сито второй раз. Смесь после второго просеивания возвращают в полипропиленовый сосуд и смешивают в барабане приблизительно со скоростью 60 об/мин в течение 1 ч.

Полученным препаратом затем заполняют в ручную твердожелатиновые капсулы, имеющие размер 1, таким образом, чтобы каждая капсула содержала около 200 мг препарата.

(1) На графиках сложные эфиры согласно настоящему изобретению представляют собой эфиры элаидиновой и эйкозеновой кислот. Характеристики эфиров использованных для целей сравнения, следующие:
(a) эфиры петрозелиновой и вакценовой кислот представляют другие мононенасыщенные жирные кислоты С₁₈, т.е. кислоты с ненасыщенной связью, не находящейся в положении омега-9;
(b) эфир пальмитодеиновой кислоты является производным мононенасыщенной жирной кислоты С₁₆ и поэтому является близким аналогом жирных кислот, используемых согласно настоящему изобретению;
(c) стеараты представляют полностью насыщенную жирную кислоту С₁₈, т.е. другой близкий аналог жирных кислот, используемых согласно настоящему изобретению; и
(d) эфиры линоленовой и линолевой кислот представляют полиненасыщенные жирные кислоты, использованные в имеющихся патентах.

(2) Фиг. 5, 6, 8, 9, 13 и 14 показывают измеренные величины 1С-50 для большого числа различных испытанных соединений, действующих на штаммы вирусов, которые были идентифицированы. Как вы знаете, величины 1С-50 являются мерой концентрации лекарственного препарата требуемой, чтобы уменьшить образование пятна роста вируса на 50% и, следовательно, чем ниже величина 1С, тем более активным является противовирусный препарат.

(3) Из фиг. 5, 6, 8, 9, 13 и 14 можно видеть, что соединения, представленные в настоящем изобретении, а именно эфиры элаидиновой и эйкозеновой кислот (элаидаты и эйкозенаты) проявляют стабильно высокую противовирусную активность. Некоторые другие сложные эфиры, которые были испытаны, иногда показывают большую активность, чем соединения настоящего изобретения, но только производные элаидиновой и эйкозеновой кислот согласно настоящему изобретению действуют против всех различных штаммов вирусов, которые были испытаны.

(4) На фиг. 7 показан индекс селективности различных производных GCV. Индекс селективности определен под графиком и, как вы можете понять, чем выше эта величина, тем лучше.

(5) На фиг. 10 и 11 важным моментом, который следует отметить, является то, что имеется большое различие между самим GCV и его эфиром с элаидиновой кислотой согласно настоящему изобретению при низких концентрациях лекарственного препарата, которые обычно назначаются человеку. Так, например, на фиг. 10 при величине концентрации 5 мМ шесть из десяти мышей выживали при введении им элаидата GCV согласно настоящему изобретению, тогда как при применении самого GCV выживали только две мыши.

Аналогичные результаты показаны на фиг. 11.

(6) фиг. 12 показывает, что элаидат GCV согласно данному изобретению предотвращает развитие энцефалита, тогда как сам GCV не дает эффекта.

(7) На фиг. 14 важным являются результаты, полученные со штаммом вируса иммунодефицита человека (ВИЧ-1) У181С, так как это полурезистентный клинический штамм ВИЧ. Как вам может быть известно, AZT является лекарственным препаратом, обычно используемым для лечения ВИЧ-инфекций, и фиг. 10 показывает, что элаидат AZT согласно этому изобретению имеет высокую активность, превосходящую активность обычного лекарства.

В целом, включенные сюда графики дают дополнительно убедительное доказательство того, что улучшения, которые можно получить при помощи настоящего изобретения, не зависят от структуры нуклеозида или аналога нуклеозида, к которому присоединен остаток жирной кислоты.

Приложенные графики также дают экспериментальные данные, относящиеся к AZT и GCV.

Сложные эфиры PCV и AraA проявляют аналогичные свойства в сравнении с PCV и AraA.

Изобретение относится к группе новых соединений формулы I Nu-O-Fa, где O - кислород, Nu - нуклеозид или аналог нуклеозида, включающей такое азотное основание, как аденин, изанин, цитозин, урацил, тимин; Fa - ацил мононенасыщенной C₁₈ мли C₂₀ ω-9-жирной кислоты, в котором жирная кислота этерифицирована гидроксильной группой в 5 положении сахарного фрагмента нуклеозида или аналога нуклеозида или гидроксильной группой нециклической цепи аналога нуклеозида. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение I, обладает противовирусным действием. 2 с. и 19 з.п. ф-лы, 14 ил.

1. Сложные эфиры нуклеозидов общей формулы I
Nu - O - Fa,
где O - кислород;
Nu - нуклеозид или аналог нуклеозида, включающий такое азотное основание, как аденин, гуанин, цитозин, урацил, тимин;
Fa - ацил мононенасыщенной C₁₈ или C₂₀ ω-9 жирной кислоты, в котором жирная кислота этирифицирована гидроксильной группой в 5 положении сахарного фрагмента нуклеозида или аналога нуклеозида или гидроксильной группой нециклической цепи аналога нуклеозида, кроме 5'-О-олеил-Ara-цитидина и 2,2'-ангидро-5'-О-олеил-Ara-цитидина. 2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu - остаток формулы S - B, где S - моносахаридный остаток, выбранный из 1-β-D-арабинофуранозы или 2,3-дидеокси-3-азидо-1-β-D-рибофуранозы, или 2-окси-этоксиметил, 4-окси-3-(оксиметил)бутил, 2-окси-1-(оксиметил)-этоксиметил, 2,3-диоксипропокси, а B - азотное основание, выбранное из аденина, гуанина, цитозина, урацила, тимина. 3. Соединение по п.2, отличающееся тем, что Nu является арабинофуранозилтимином (Ara T), арабиноферанозиладенином (Ara А), ацикловиром (ACV), азидотимидином (AZT), пуриноарабинозидом общей формулы

где R₁ - NH₂, NHCH₃ или аналогом нуклеозида общей формулы

где R - нециклическая группа. 4. Соединение по п. 3, отличающееся тем, что R является [2-окси-1-(оксиметил)этокси]метилом. 5. Соединение по пп.1 - 4, отличающееся тем, что Fa является элаидиновой кислотой. 6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является ацикловиром и Fa является олеиновой кислотой. 7. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является ацикловиром и Fa является элаидиновой кислотой. 8. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является ацикловиром и Fa является цис- или транс-эйкозеновой кислотой. 9. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является элаидиновой кислотой. 10. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является олеиновой кислотой. 11. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является цис- или транс-эйкозеновой кислотой. 12. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является цис- или транс-эйкозеновой кислотой. 13. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является олеиновой кислотой. 14. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AraT и Fa является элаидиновой кислотой. 15. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является ганцикловиром и Fa является элаидиновой кислотой. 16. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AZT и Fa является элаидиновой кислотой. 17. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AZT и Fa является олеиновой кислотой. 18. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Nu является AZT и Fa является цис- или транс-эйкозеновой кислотой. 19. Фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием, включающая активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель или экципиент, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента используют сложные эфиры нуклеозидов формулы 1 по п.1 в эффективном количестве. 20. Композиция по п.19, обладающая противовирусным действием по отношению к ВИЧ, отличающаяся тем, что в качестве сложного эфира нуклеозида используют нуклеозид по одному из пп.16 - 18. 21. Композиция по п.19, обладающая противовирусным действием по отношению к вирусу HSV 1 или 2, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента она содержит соединение по пп.6 - 8. 22. Соединения общей формулы I по п.1, обладающие противовирусной активностью.