БИОПРЕПАРАТ-СУБТИКОЛ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/74 C12N1/20 C12N1/20 C12R1/19 C12R1/10 C12R1/125 

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к биопрепаратам, нормализующим микрофлору и ингибирующим развитие патогенных микроорганизмов.

В настоящее время имеются биопрепараты, нормализующие микрофлору: лактобактерин, ацилакт, бифидумбактерин, колибактерин, бификол, биоспорин, споробактерин (Воробьев А.А. и др. Дисбактериозы - актуальная проблема медицины/ Вестник РАМН - 1997. -N 3.-С. 3-5).

Наиболее близким является колибактерин, представляющий собой микробную массу Escherichia coli М-17 (Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека/ М. - Медицина. -1965. 280 с.). Препарат характеризуется высокой степенью адгезивности к колоноцитам кишечника и выраженным антагонизмом в отношении Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Serratia spp.. Однако не характеризуется адгезивностью к энтероцитам кишечника в зоне пейеровых бляшек (Осипова И.Г. Некоторые аспекты механизма защитного действия колибактерина и споровых эубиотиков и новые методы их контроля/ Автореф. Канд. дисс. - 1997. - 25 с.).

Известен также препарат биоспорин, содержащий в своей основе живые клетки Bacillus subtilis 3 и В. licheniformis 31 (Патент РФ N 1722502). Этот препарат меньше адгезирует к колоноцитам и больше к энтероцитам, а также высокой антагонистической активностью к Proteus spp., Staphilococcus aureus, Candida spp. и меньшей, чем у колибактерина активностью в отношении Salmonella spp., Klebsiella spp. (Осипова И.Г. Некоторые аспекты механизма защитного действия колибактерина и споровых эубиотиков и новые методы их контроля/ Автореф. Канд. дисс. - 1997. - 25 с.).

Целью изобретения является создание комплексного биопрепарата, характеризующегося высокой адгезивной активностью к различным отделам кишечника и более широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов - Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Proteus spp., Staphylococcus aureus, Candida spp. в сравнении с известными препаратами.

Оказалось, что сочетание колибактерина и биоспорина обеспечивает синергический эффект, т.е. в механизме защитного действия нового биопрепарата ведущим свойством является более высокая адгезивная и антагонистическая активности, обеспечивающие колонизацию кишечника и вытеснение патогенов.

Сущность изобретения заключается в следующем: биопрепарат субтикол содержит штаммы Е. coli М-17, В. subtilis 3, В. licheniformis 31, взятые в эффективном количестве. В частности, препарат содержит указанные штаммы в равных соотношениях по количеству живых микробных клеток. Например, препарат содержит каждый из указанных штаммов в количестве 10⁹ - 10¹¹ живых микробных клеток в 1 дозе.

Изобретение характеризуется следующими примерами:
Пример 1.

Выращивают культуру штамма Е. coli М-17 на питательной среде при 37^oC. Затем готовят ее разведение в концентрации 10⁹ живых микробных клеток в 1 мл.

Аналогично выращивают культуры штаммов В. subtilis 3 и В. licheniformis 31 и также готовят суспензии этих культур с концентрацией живых микробных клеток 10⁹ в 1 мл.

Затем смешивают все три микробные культуры в равных соотношениях по объему. К полученной смеси добавляют стабилизатор, разливают в ампулы (флаконы) и лиофильно высушивают.

Пример 2.

Выращивают штаммы бактерий аналогично примеру 1, но получают суспензии с концентрацией 10¹⁰ живых микробных клеток в одной дозе. Затем получают лиофильно высушенный препарат аналогично описанному в примере 1.

Пример 3.

Выращивают штаммы бактерий аналогично примеру 1, но получают суспензии с концентрацией 10¹¹ живых микробных клеток в одной дозе. Затем получают лиофильно высушенный препарат аналогично описанному в примере 1.

Пример 4.

Оценку полученных по примерам 1-3 серий препарата "Субтикол" проводят в сравнении с колибактерином и биоспорином по антагонистической активности к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также по адгезивной активности к эпителиальным клеткам тонкого и толстого кишечника крыс. Результаты исследования приведены в табл.1 и 2.

Как видно из представленных таблиц, препарат субтикол характеризуется более выраженной адгезивной активностью, чем отдельные препараты в различных отделах кишечника и более широким спектром антигонистической активности в отношении патогенных и условно патогенных микроорганизмов.

Таким образом, установлено преимущество субтикола перед биоспорином и колибактерином.

Экспериментально подтверждены такие количественные характеристики составляющих субтикол компонентов:
Е.coli М-17 - 10⁹ - 10¹¹ живых микробных клеток в 1 дозе
B.subtilis 3 - 10⁹ - 10¹¹ живых микробных клеток в 1 дозе
В.licheniformis 31 - 10⁹ - 10¹¹ живых микробных клеток в 1 дозе
Культуры находятся в равных соотношениях по объему.

Изобретение предназначено для профилактики и лечения инфекционных болезней. Биопрепарат-cубтикол содержит штаммы E.coli M-17, B.subtilis 3 и B.licheniformis 31 в эффективном количестве и стабилизатор. Биопрепарат-субтикол изготовлен на основе сочетания двух известных биопрепаратов колибактерина и биоспорина, проявляющих синергитический эффект. Биопрепарат-субтикол характеризуется высокой адгезивной активностью к различным отделам кишечника и более широким спектром антагонической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp. , Proteus spp., Staphylococcus aureus, candida spp., в сравнении с известными препаратами (колибактерин и биоспорин). 2 з.п.ф-лы, 2 табл.

1. Биопрепарат для профилактики и лечения инфекционных болезней, содержащий штамм бактерий Escherichia coli M-17 и стабилизатор, отличающийся тем, что он дополнительно содержит штаммы бактерий Bacillus subtilis 3 и Bacollus licheniformis 31, взятые в эффективном количестве. 2. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что содержит штаммы бактерий Escherichia coli M-17, Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31, взятые в равных соотношениях. 3. Биопрепарат по п.2, отличающийся тем, что содержит каждый из штаммов в титре 10⁹ - 10¹¹ живых микробных клеток в одной дозе.