АНТИГИПОКСИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС Российский патент 1999 года по МПК A61K31/725 A61K31/725 A61K31/40 

Изобретение относится к применению известных веществ по новому назначению и может быть использовано в медицине, физиологии и при подготовке спортсменов.

Гипоксия сопутствует практически любой патологии. Остра гипоксическая гипоксия, создаваемая в условиях барокамеры - это быстрое снижение напряжения кислорода при уменьшении общего парциального давления. В настоящее время продолжается поиск антигипоксантов, предпочтение отдается препаратам, обладающим комбинированным действием.

Известно антигипоксическое вещество, оказывающее свое действие на животных и человека, например, гепарин [1].

Недостатком данного вещества является низкий уровень антигипоксической активности.

В качестве прототипа целесообразно взять известный антигипоксант - мексидол, который оказывает свое действие на организм человека и животных [2].

Прототип обладает следующими недостатками:
1) необходимость применения значительной дозы мексидола - не менее 40 мг/кг живого веса,
2) невысокая эффективность препарата, выражающаяся в небольшом увеличении времени жизни животных в условиях острой гипоксии,
3) наличие противопоказаний к применению - при выраженных нарушениях функции печени и почек, при аллергии к пиридоксину (витамину B₆).

В качестве антигипоксического препарата предлагается известный комплекс гепарина с серотонином, обладающий антикоагулянтными свойствами [3]. Данный комплекс обладает выраженными антигипоксическими свойствами и не обладает недостатками известных решений и прототипа.

Цель достигается тем, что берут комплекс гепарин:серотонин (вес. %) 1-3: 1-1,5, готовят 0,1% раствор. Берут 10 крыс, каждой из которых вводят 0,3 мл 0,1% раствора комплекса за 10 мин до помещения их в условия барокамеры, затем создают разрежение воздуха, соответствующее 12 тысячам метров над уровнем моря, регистрируют время до потери позы (крыса неподвижно лежит), фиксируют время жизни крыс до последнего агонального дыхания, после этого крыс быстро вынимают из барокамеры и регистрируют время реституции - когда появляется мышечный тонус в конечностях, разделив время жизни на время реституции, получают коэффициент K, подсчитывают сколько из 10 подопытных крыс выживает - это называют выживаемостью.

Предлагаемый комплекс применяют по сравнению с прототипом в значительно меньших концентрациях. Так, из таблицы видно, что комплекс можно вводить животным в 111 раз меньшей дозе, чем прототип - мексидол. Показатели адаптации к острой гипоксической гипоксии, создаваемой у крыс при помощи барокамеры лучше у предлагаемого комплекса: так, по сравнению с прототипом, комплекс увеличивает время до потери позы в 3,9 раза, время жизни - в 3,3 раза, коэффициент K - в 1,6 раза, выживаемость - в 1,1 раза. Предлагаемый препарат и прототип, как видно, не влияют на время реституции - появление мышечного тонуса у крыс.

Пример 1. Берут 1 г гепарина, растворяют в 1000 мл дистиллированной воды, берут 1,5 г серотонина, растворяют в 1500 мл дистиллированной воды, оба раствора смешивают в данных количествах, смесь ставят в термостат при температуре 37^oC на 15 мин, после чего смесь из термостата вынимают и доводят pH при помощи 0,1 H NaOH до 5,5, добавляют 5-кратный объем охлажденного ацетона, ставят смесь в холодильник при температуре +4^oC на 60 мин, после этого смесь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, осадок высушивают лиофильно, получают белый кристаллический порошок комплекса гепарин:серотонин в вес.% 1:1,5. Берут 3 мг сухого комплекса, доводят до 3 мл 0,85% физиологическим раствором (pH 7,2), получают 0,1% раствор комплекса. Берут 10 крыс, каждой из которых вводят 0,3 мл раствора комплекса за 10 мин до помещения их в условия барокамеры, затем в барокамере создают разрежение воздуха, соответствующее 12 тысячам метров над уровнем моря, регистрируют время до потери животным позы (крыса неподвижно лежит), потеря позы наступает через 647,6 ± 32,5 с (среднее значение, вычисленное из данных, полученных на 10 крысах), далее фиксируют время жизни крыс до последнего агонального дыхания, оно наступает через 873,4 ± 30,1 с (среднее значение), после этого крыс быстро вынимают из барокамеры и регистрируют время реституции - когда появлялся мышечный тонус в конечностях - оно составляет 129,3 ± 15,9 c (среднее значение), разделив время жизни на время реституции, получают коэффициент K - 5,2 ± 1,9 (среднее значение). Из 10 подопытных крыс выживает 8, что составляет 80% - это называют выживаемостью.

Пример 2. Берут, 3 г гепарина, растворяют в 3000 мл дистиллированной воды, берут 1,5 г серотонина, растворяют в 1500 мл дистиллированной воды, оба раствора смешивают в данных количествах, смесь ставят в термостат при температуре 37^oC на 15 мин после чего смесь из термостата вынимают и доводят pH при помощи 0,1 H NaOH до 5,5, добавляют 5-кратный объем охлажденного ацетона, ставят смесь в холодильник при температуре +4^oC на 60 мин, после этого смесь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, осадок высушивают лиофильно, получают белый кристаллический порошок комплекса гепарин:серотонин в вес.% 3:1,5. Берут 3 мг сухого комплекса, доводят до 3 мл 0,85% физиологическим раствором (pH 7,4), получают 0,1% раствор комплекса. Берут 10 крыс, каждой из которых вводят 0,3 мл раствора комплекса за 10 мин до помещения их в условия барокамеры, затем в барокамере создают разрежение воздуха, соответствующее 12 тысячам метров над уровнем моря, регистрируют время до потери животным позы, потеря позы у крысы наступает через 698,2 ± 47,6 с (среднее значение из данных, полученных на 10 крысах), далее фиксируют время жизни крыс до последнего агонального дыхания, время жизни составляет 902,2 ± 31,3 с (среднее значение), после этого крыс быстро вынимают из барокамеры и регистрируют время реституции - когда появляется мышечный тонус в конечностях, время реституции составляет 131,4 ± 15,2 с (среднее значение), разделив время жизни на время реституции, получают коэффициент K - 6,8 ± 2,1 (среднее значение). Из 10 подопытных крыс выживает 9, что 90%.

Пример 3. Берут 3 г гепарина, растворяют в 3000 мл дистиллированной воды, берут 1 г серотонина, растворяют в 1000 мл дистиллированной воды, оба раствора смешивают в данных количествах, смесь ставят в термостат при температуре 37^oC на 15 мин, после чего смесь из термостата вынимают и доводят pH при помощи 0,1 H NaOH до 5,5, добавляют 5-кратный объем охлажденного ацетона, ставят смесь в холодильник при температуре +4^oC на 60 мин, после этого смесь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, осадок высушивают лиофильно, получают белый кристаллический порошок комплекса гепарин:серотонин в вес.% 3:1. Берут 3 мг сухого комплекса, доводят до 3 мл 0,85% физиологическим раствором (pH 7,2), получают 0,1% раствор комплекса. Берут 10 крыс, каждой из которых вводят 0,3 мл раствора комплекса за 10 мин до помещения их в условия барокамеры, затем в барокамере создают разрежение воздуха, соответствующее 12 тысячам метров над уровнем моря, регистрируют время до потери животным позы, потеря позы крысой наступает через 712,4 ± 41,3 с (среднее значение, вычисленное из данных, полученных на 10 крысах), далее фиксируют время жизни крыс до последнего агонального дыхания, оно наступает через 951,2 ± 24,2 с (среднее значение), после этого крыс быстро вынимают из барокамеры и регистрируют время реституции - когда появляется мышечный тонус в конечностях - оно составляет 128,5 ± 17,5 c (среднее значение), разделив время жизни на время реституции, получают коэффициент K - 7,4 ± 1,3 (среднее значение). Из 10 подопытных крыс выживает 9, что составляет 90%.

Пример 4. Берут, 1 г гепарина, растворяют в 1000 мл дистиллированной воды, берут 1 г серотонина, растворяют в 1000 мл дистиллированной воды, оба раствора смешивают в данных количествах, смесь ставят в термостат при температуре 37^oC на 15 мин, после чего смесь из термостата вынимают и доводят pH при помощи 0,1 H NaOH до 5,5, добавляют 5-кратный объем охлажденного ацетона, ставят смесь в холодильник при температуре +4^oC на 60 мин, после этого смесь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, осадок высушивают лиофильно, получают белый кристаллический порошок комплекса гепарин: серотонин в вес.% 1:1. Берут 3 мг сухого комплекса, доводят до 3 мл 0,85% физиологическим раствором (pH 7,2), получают 0,1% раствор комплекса. Берут 10 крыс, каждой из которых вводят 0,3 мл раствора комплекса за 10 мин до помещения их в условия барокамеры, затем в барокамере создают разрежение воздуха, соответствующее 12 тысячам метров над уровнем моря, регистрируют время до потери животным позы, потеря позы крысой наступает через 562,6 ± 48,9 с (среднее значение, вычисленное из данных, полученных от 10 крыс), далее фиксируют время жизни крыс до последнего агонального дыхания, время жизни составляет 867,5 ± 35,8 с (среднее значение), после этого крыс быстро вынимают из барокамеры и регистрируют время реституции - когда появляется мышечный тонус в конечностях, время реституции составляет 118,7 ± 21,3 сек (среднее значение), разделив время жизни на время реституции, получают коэффициент K - 7,3+1,7 (среднее значение). Из 10 подопытных крыс выживает 8, что составляет 80%.

Использованные источники
1. Любимов Б.И., Шолохов В.М., Самойлов Н.H., Кижаев Е.В. Фармакологическая защита гипоксимированного аутодермотрансплантата//Материалы 2-й Всесоюзной конференции "Фармакологическая коррекция гипоксических состояний", Гродно, 1991. С. 107-108.

2.Машковский М.Д. Лекарственные средства, 1993. 2-й том, с. 216-217.

3. Кондашевская М.В., Ляпина Л.А., Смолина Т.Ю. Комплексы высоко- и низкомолекулярного гепарина с серотонином и их физиологические свойства //Вестник МГУ, сер. 16 биологическая. 1996. N 2, с.17-21.

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии. Предложен новый антигипоксант, обладающий комбинированным действием. В качестве нового антигипоксического препарата предлагается антикоагулянтный комплекс, гепарина с серотонином в вес.% 3:1. Новое средство по многим показателям устойчивости к гипоксии превосходит известный препарат-аналог - мексидол. 1 табл.

Применение известного антикоагулянтного комплекса гепарин: серотинин в вес.% 1-3:1-1,5 в качестве антигипоксанта.