СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА, ОБЛАДАЮЩЕГО ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ, АНТИТРОМБОЦИТАРНОЙ, АНТИКОАГУЛЯНТНОЙ И АНТИДИАБЕТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЯМИ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к способам получения биологически активных препаратов и может быть использовано в фармакологии, медицинской и химико-фармацевтической промышленности, физиологии, патофизиологии.

Известен способ получения антикоагулянта из растения, произрастающего в Южной Африке - Aspilia africana, заключающийся в экстракции биологически активной фракции, очистки ее путем гель-хроматографии на колонке с сефадексом G-50 (1).

Способ имеет следующие недостатки:
1. редкий ареал распространения вида растения;
2. имеются побочные эффекты от использования фракции;
3. трудоемкость процесса;
4. отсутствие фибринолитического действия препарата;
5. отсутствие антидиабетогенного действия препарата.

Известен способ получения вещества, обладающего антикоагулянтной активностью, из растения средней полосы европейской части России /таволги вязолистной - Filipendila ulmaria/, заключающийся в экстракции биологически активной фракции, инкубации ее в термостате, центрифугировании с последующим ультрацентрифугированием в градиенте плотности сахарозы (2).

Способ имеет следующие недостатки:
1. трудоемкость способа получения целевого продукта;
2. отсутствие антитромбоцитарных свойств;
3. отсутствие антидиабетогенного действия.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ получения биологически активного препарата, обладающего фибринолитической, тромболитической, антикоагулянтной и антидиабетогенной активностями. В качестве сырья используют кору корней пиона древовидного - Paeonia suffruticosa, которую измельчают и экстрагируют дистиллированной водой при соотношении сырье-экстрагент 1:5, прогревают на кипящей водяной бане при помешивании в течение 10-20 минут, после чего осадок удаляют центрифугированием при 1800-2000 об/мин в течение 20-30 минут, супернатант замораживают при -10-20^oC и лиофильно высушивают (3).

Технической задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента препаратов, обладающих противосвертывающим действием, а также расширение спектра его действия, поскольку препарат помимо фибринолитической, антикоагулянтной, антидиабетогенной активностей обладает антитромбоцитарным действием и повышает активность активатора плазминогена.

Для решения поставленной задачи используют кору корней пиона - Paeonia lutea. Корни очищают, тщательно моют холодной водой, высушивают в термостате при 36,5-37,5^oC в течение 23-25 часов, затем отделяют высушенную кору, измельчают в гомогенизаторе до порошкообразного состояния, порошок заливают 40% этиловым спиртом из расчета 1 г порошка - 10 мл спирта, выдерживают в темном месте при комнатной температуре в течение 5-7 дней, затем фильтруют через двойной слой марли. Полученный целевой продукт разбавляют дистиллированной водой до исходного объема - 10 мл.

В таблице приведены материалы иллюстрирующие достижение цели.

Предлагаемое изобретение имеет преимущества перед известными решениями подобного рода:
1. использование легкодоступного, экологически чистого растительного сырья,
2. полученный предложенным способом целевой продукт оказывает комплексное противосвертывающее и антидиабетогенное действие на организм.

Пример N 1.

Берут корень пиона Paeonia lutea, очищают, моют холодной водой, высушивают в термостате при 37^oC в течение 23 часов, после чего кору отделяют, измельчают до порошкообразного состояния. Взвешивают 1 г порошка и заливают 10 мл 40%-го этилового спирта, оставляют в стеклянном плотно закрытом флаконе при комнатной температуре в темноте на 5 суток, затем настой фильтруют через двойной слой марли, доводят объем полученного целевого продукта до 10 мл дистиллированной водой.

Антикоагулянтная активность целевого продукта при определении in vitro по тесту активированного частичного тромбопластинового времени свертывания плазмы крови крыс составляла 450 с, фибринолитическая неферментативная активность - 56 мм, антитромбоцитарная - 50% и активность активатора плазминогена - 36 мм.

При пероральном введении белым крысам (6 самцов с массой тела 200 г) целевого продукта в течение 10 дней по 1,5 мл/кг массы тела в день в плазме крови животных через 24 часа после последнего введения установлено повышение суммарной фибринолитической активности в 1.6 раза, активности активатора плазминогена - в 2 раза, увеличение активированного частичного тромбопластинового времени - в 1.4 раза по сравнению с контрольной группой (6 крыс-самцов), получающих вместо целевого продукта тот же объем 0.85%-го раствора NaCl. Для определения антидиабетогенной активности целевого продукта обеим группам животных внутривенно вводили диабетогенную дозу аллоксана (37,5 мг/кг массы). Все животные опытной группы, которые получали целевой продукт, выживают (100%), при этом у них в крови наблюдается нормогликемия (99,3 мг%) на 7-е сутки опыта. В контрольной группе выживаемость составила 66.6%, а средний уровень сахара крови животных в этот же период опыта составил 159 мг%.

Пример 2.

Берут корень пиона Paeonia lutea, очищают, моют холодной водой, высушивают в термостате при 36.5^oC в течение 25 часов, далее процесс ведут как и в примере N 1, настаивают в течение 6 суток. Получают целевой продукт с заданными свойствами.

Пример N 3.

Берут корень пиона Paeonia lutea, очищают, моют холодной водой, высушивают в термостате при 37.5^oC в течение 24 часов, затем процесс ведут как в примере N 1, настаивают в течение 7 суток. Получают целевой продукт с заданными свойствами.

Изобретение относится к способам получения биологически активного препарата и может быть использовано в фармакологии, медицине, физиологии и патофизиологии. Технической задачей изобретения является расширение ассортимента препаратов, обладающих противосвертывающим действием, а также расширение спектра его действия. Целевой продукт выделяют из коры корней пиона Paeonia lutea, которые очищают, моют холодной водой, затем высушивают при 36,5 - 37,5^oС в течение 23 - 25 ч, высушенную кору отделяют, измельчают до зернистопорошкообразного состояния, заливают 40%-ым этиловым спиртом из расчета на 1 г порошка 10 мл спирта, настаивают в темноте в течение 5 - 7 суток, осадок отделяют, а надосадочную жидкость доводят до первоначального объема дистиллированной водой. При пероральном введении препарата животным установлено повышение суммарной фибринолитической активности в 1,6 раза, активности активатора плазминогена в 2 раза, увеличение активированного частичного тромбопластинового времени в 1,4 раза, снижение уровня сахара крови при развитии экспериментального инсулинзависимого диабета. 2 з.п.ф-лы, 1 табл.

1. Способ получения препарата, обладающего фибринолитической, антитромботической, антикоагулянтной и антидиабетогенной активностями путем экстракции коры корней пиона, отличающийся тем, что используют кору корней пиона Paeonia lutea, их высушивают при 36,5 - 37,5^oС в течение 23 - 25 ч, затем высушенную кору отделяют, измельчают до порошкообразного состояния и экстрагируют 40%-ным этиловым спиртом из расчета на 1 г порошка 10 мл спирта, далее настаивают в темноте в течение 5 - 7 суток, осадок отделяют, а надосадочную жидкость доводят до первоначального объема дистиллированной водой. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что настаивание проводят при комнатной температуре. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что осадок отделяют фильтрованием.