СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИКОАГУЛЯНТНЫМ, ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИМ, АНТИТРОМБОЦИТАРНЫМ, АНТИТРОМБОТИЧЕСКИМ И ТРОМБОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2003 года по МПК A61K35/78 A61P7/00 

Изобретение относится к способам получения биологически активного препарата, который может быть использован в фармакологии, химико-фармацевтической промышленности, медицине, физиологии и патофизиологиии.

Известен способ получения антикоагулянта из растения, произрастающего в Южной Африке, - Aspilia africana, заключающийся в экстракции биологически активной фракции, очистки ее путем гель-хроматографии на колонке с сефадексом G-50 [1-3].

Указанный способ имеет следующие недостатки. Растение, используемое для получения средства, обладающего антикоагулянтной активностью, имеет редкий ареал распространения. Технология получения биологически активного вещества трудоемка, а целевой прордукт, полученный известным способом, дает побочные эффекты.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату являетя способ получения биологически активного вещества, обладающего фибринолитической, антикоагулянтной и антидиабетогенной активностями, из растения средней полосы России. В качестве сырья используют кору корней пиона желтого -Paeonia lutea, которую измельчают и экстрагируют этиловым спиртом (40 %) при соотношении сырье: экстрагент 1:10, настаивают 5-7 суток, после чего осадок удаляют фильтрованием [4].

Технической задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента препаратов, обладающих противосвертывающим действием, а также расширение спектра его действия, поскольку препарат, помимо фибринолитической, антикоагулянтной активностей обладает антитромбоцитарной, тромболитической и антитромботической активностями.

Для решения поставленной задачи используют корень пиона - Paeonia officinalis. Корни тщательно моют холодной водой, высушивают в термостате при 36,5-37,5^oС в течение 23-25 ч, высушенный корень (кора + сердцевина) измельчают до зернисто-порошкообразного состояния, заливают дистиллированной водой из расчета на 1 г порошка 50 мл воды, кипятят на водяной бане в течение 15-20 мин, выдерживают в темном месте в течение 20-24 ч, осадок отделяют центрифугированием при 3000 об/мин в течение 30-40 мин, а надосадочную жидкость доводят до первоначального объема дистиллированной водой. При пероральном хроническом введении животным (крысам) препарата в течение 7 дней установлено повышение в плазме крови животных суммарной фибринолитической активности в 1,5 раза, неферментативного фибринолиза - в 1,4 раза, активности активатора плазминогена - в 2,2 раза, активированного частичного тромбопластинового времени - в 1,7 раза, снижение агрегации тромбоцитов в 4 раза по сравнению с контрольной группой (таблица).

В таблице приведены данные, подтверждающие достижение технического результата.

Предлагаемое изобретение имеет преимущества перед известными решениями подобного рода.

1. Полученный продукт обладает антикоагулянтным эффектом.

2. Полученный препарат предупреждает развитие тромбоопасных состояний или лизирует образовавшиеся тромбы.

Пример 1
Берут корень пиона Paeonia officinalis, моют холодной водой, высушивают в термостате при 37^oС в течение 22 ч, после чего корень измельчают до порошкообразного состояния. Взвешивают 0,5 г порошка и заливают 50 мл дистиллированной воды, далее кипятят на водяной бане в течение 20 мин, после чего оставляют при комнатной температуре в темном месте в течение 20 ч, затем центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин. Осадок отбрасывают, а надосадочную жидкость замораживают при температуре -20^oС и высушивают на лиофильной сушке.

1%-ный целевой продукт обладал антикоагулянтной активностью, превышающей антикоагулянтную активность контроля в 2,5 раза, неферментативной фибринолитической активностью, превышающей контроль в 1,8 раза, и снижал агрегацию тромбоцитов на 35%.

При пероральном введении белым крысам (12 самцов с массой тела 180 г) 1%-ного целевого продукта в течение 7 дней в плазме крови животных через 24 ч после последнего введения установлено повышение суммарной фибринолитической активности в 1,5 раза, неферментативного фибринолиза - в 1,4 раза, активности активатора плазминогена - в 2,2 раза, увеличение активированного частичного тромбопластинового времени - в 1,7 раза. Снижение агрегации тромбоцитов в 4 раза по сравнению с контрольной группой (10 крыс), получающих вместо целевого продукта тот же объем 0,85%-ного раствора NaCl. Для определения антитромботической и тромболитической активности целевого продукта у обеих групп животных вызывали тромбы в изолированной зажимами v.jugularis по методу Wessler. У всех животных опытной группы, получавших препарат пиона, тромбы или не образовывались (на фоне введенного целевого продукта) - антитромботическая активность, или растворялись в 100% случаев после введения целевого продукта - тромболитическая активность.

Пример 2
Берут корень пиона Paeonia officinalis, моют холодной водой, высушивают в термостате при 36,5^oС в течение 24 ч, далее процесс ведут, как и в примере 1, кипятят на водяной бане 15 мин и настаивают при 37^oС в течение суток, центрифугируют 40 мин. Получают целевой продукт с заданными свойствами.

Пример 3
Берут корень пиона Paeonia officinalis, высушивают в термостате при 37,5^oС в течение 24 ч, затем процесс ведут, как в примере 1. Получают целевой продукт с заданными свойствами.

Источники информации
1. Niemetz Hanna. Thromb. Ressearch. 1987, v 47, p. 401-407.

2. SU 1601832 A, 1989.

3. RU 2055591 С1, 1993.

4. Успенская М.С., Пасторова В.Е., Новиков B.C., Ляпина Л.А., Ульянов А. М. , Тарасов Ю.А. Способ получения препарата, обладающего фибринолитической, антитромбоцитарной, антикоагулянтной и антидиабетогенной активностями. - Патент РФ 2143270, А 61 К 35/78.

Изобретение относится к медицине. Сухие корни пиона Paeonia officinalis экстрагируют дистиллированной водой из расчета на 1 г сырья 50 мл воды, кипятят на водяной бане, настаивают в темноте 20-24 ч при 37^oС, осадок отделяют, а надосадочную жидкость доводят до первоначального объема, замораживают и лиофильно высушивают. Изобретение позволяет получить продукт, обладающий широким спектром биологического действия. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Способ получения средства, обладающего антикоагулянтным, фибринолитическим, антитромбоцитарным, антитромботическим и тромболитическим действием, характеризующийся тем, что сухие корни пиона Paeonia officinalis экстрагируют дистиллированной водой из расчета на 0,5 г сырья 50 мл воды, кипятят на водяной бане, далее настаивают в темноте, осадок отделяют центрифугированием, а надосадочную жидкость доводят до первоначального объема, подвергают замораживанию с последующей лиофильной сушкой. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что кипячение на водяной бане проводят в течение 15-30 мин. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что настаивание проводят в течение 20-24 ч при температуре 37^oС.