Изобретение относится к области клеточной и молекулярной биологии, клинической и экспериментальной медицины, биологической химии, фармакологии и фармакодинамики, иммунофармакологии и может быть использовано в клинической практике для лечения различных заболеваний, сопровождающихся расстройствами модулирующей активности иммунной системы, проявляющейся нарушением единого интегративного процесса, в том числе клеточного (клеточно- опосредованного ответа) и гуморального (антитело-опосредованного ответа) иммунитета, а также изменением функции распознавания "свой-чужой" (М.М. Дейл, Дж. К. Формен в кн. Руководство по иммунофармакологии, М., Медицина. 1998, стр. 1-14).
Как известно, при помощи иммунных реакций в первую очередь устраняется чужеродный (не свой) материал, который поступает в организм в виде опасных для жизни патогенных вирусов и микроорганизмов. Одновременно иммунный процесс направлен и на распознавание патологических изменений в тканях, происходящих вследствие мутационных нарушений. Поэтому иммунная защита в основном осуществляет обнаружение и удаление тех веществ, которые представляют существенную опасность для жизнедеятельности организма (Дж.Плейфэр в кн. Наглядная иммунология, М., Медицина, 1999, стр. 40-41, 56-61).
Иммуномодуляция как основной биологический гомеостатический механизм представляет интегративную регуляцию всех клеточных и гуморальных процессов в тканях тела человека, образующих естественную и адаптивную защитные реакции. При активном ответе организма основное значение имеет совокупность всех иммунных компонентов, начиная от клеток с их рецепторами, комплемента и антител до основного проявления эффекта иммуномодуляции - распознавания "свой - чужой". Поэтому иммуномодулирующий процесс сопровождается синхронной выработкой интерлейкинов и других цитокинов (молекулярных регуляторов), активацией комплемента, лизисом клеток и тканей, активизацией моноцитарной и макрофагальной реакций, феноменом цитотоксичности и стимуляцией киллерной системы, что приводит к совместной деятельности костного мозга, лимфатической системы, самой крови, макрофагов и микрофагов, тучных клеток тканей и других элементов (В.Эллиот, Д.Эллиот в кн. Биохимия и молекулярная биология, стр. 281-308, М., 1999).
Несмотря на то, что иммуномодуляция является целостным интегративным процессом, в нем следует выделить ряд составляющих, которые формируют корригирующую, стимулирующую и другие защитные реакции. Мы полагаем, что иммуномодулирующая активность должна включать в себя одновременно клеточно-опосредованный и антитело-опосредованный ответы, аутокринный механизм (продукция цитокинов - в том числе интерлейкинов), а также специфическую иммунную реакцию "свой - чужой".
Основную роль в осуществлении процесса иммуномодуляции играют иммунные клетки - лимфоциты и фагоциты (моноциты и тканевые макрофаги). Для запуска иммуномодулирующей реакции лимфоцит наиболее пригоден, так как обладает уникальными свойствами - узкоспециализированными рецепторами, позволяющими каждой клетке отвечать на индивидуальный антиген (основа специфичности), клональной пролиферацией, длительной продолжительностью жизни (основа иммунной памяти), рециркуляцией из тканей обратно в кровоток. Из этого следует, что специфическая память после локального иммунного ответа на антиген распространяется по всему организму (Дж. Плейфэр в кн. Наглядная иммунология, М., Медицина, 1999, стр. 24-31).
Основную роль в клеточной лимфоцитарной реакции осуществляет рецепторная система Т-лимфоцитов. Рецептор Т-лимфоцитов, являясь гликопротеином, имеет характерную для семейства иммуноглобулинов структуру и состоит из доменов и полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. Т-клеточные рецепторы, такие как СД3, СД4, СД8, играют важную роль для осуществления коррекции и стимуляции иммунной системы. СД2, СД28, ЛФА-1 являются наиболее важными адгезивными молекулами, поддерживающими контакт Т-лимфоцита с антиген-представляющими клетками или В-лимфоцитами. Особую роль играет молекула СД28, распознающая молекулу В7 как существенный костимулятор Т-клеточной активации. В B-лимфоцитах наиболее важен рецептор CR2 как рецептор B-лимфоцитов к C3 компоненту комплемента. Молекула СД19 - это специфический маркер В-лимфоцитов, так как не экспрессируется на клетках других типов. Связывание молекулы СД19 - необходимое условие активации В-клетки. Молекула СД19 аналогична молекулам СД4, СД8 и СД28 Т-лимфоцитов и выполняет функцию корецептора В-лимфоцита (П. Девис, Дж.Л.Турк в кн. Руководство по иммунофармакологии, М. , Медицина. 1998, стр. 68-86 и Дж. Плейфэр в кн. Наглядная иммунология, М., Медицина, 1999, стр. 34-35).
Известно, что рецепторы Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов, а также антитела и иммуноглобулины крови являются гликопротеиновыми структурами, что очень важно в теоретическом аспекте для создания идентичных по структуре лигандов с целью иммуномодуляции. Особо следует отметить важную роль антител типа G, которые обладают способностью активно связываться с комплементом и рецепторами фагоцитов.
В настоящее время окончательно выяснено, что чужеродные пептиды связываются молекулами главного комплекса гистосовместимости (ГКГС) и распознаются Т-клеточными рецепторами. Известно, что главный комплекс гистосовместимости также является гликопротеиновой структурой. Цитотоксические Т-клетки только тогда узнают чужеродные антигены, когда они ассоциированы с молекулами главного комплекса гистосовместимости класса 1. В то же время Т-хелперы узнают фрагменты чужеродных антигенов в ассоциации с гликопротеинами главного комплекса гистосовместимости класса 2 на поверхности антиген-представляющих клеток. Например, пептиды, происходящие из вирусов, связываются с молекулами главного комплекса гистосовместимости класса 1 внутри клетки и затем комплекс транспортируется на поверхность клетки, где Т-клетка распознает комбинацию пептид - ГКГС и при соответствующих условиях убивает клетку, инфицируемую вирусом. В то же время установлено, что подобный процесс происходит в специфических антиген-представляющих клетках, которые активируют Т-хелперы с тем отличием, что они содержат молекулы ГКГС класса 2, транспортирующие пептиды на поверхность клетки. В отличии от пути класса 1 данный процесс происходит в эндосомально-лизосомальных вакуолях, в которых нормально расщепляется чужеродный материал (Б.Албертс, Д.Брей и др. в кн. Молекулярная биология клетки, М., Мир, т. 3, стр. 215-282).
В осуществлении клеточных иммунных реакций большая роль принадлежит комплементу, который состоит из множества белков. Последовательно активируясь, они образуют биологические активные соединения, способные вызывать воспалительные процессы, лизис-клеток и, осаждаясь на клеточных мембранах, стимулировать фагоцитоз. Активация комплемента осуществляется путем связывания специфических антител класса G или М с поверхностными антигенами. Ряд очень важных этапов активации комплемента зависит от ионов Ca+2 или Mg+2.
Для стимуляции клеточного иммунитета, а также для дифференцировки лимфоцитов и стимуляции роста большинства типов клеток костно-мозгового происхождения существует механизм аутосекреции лимфоцитами Т и В, фагоцитами, в том числе и нейтрофилами. Механизм аутосекреции, то есть продуцирование иммунными клетками небольших белковых молекул, крайне необходим в осуществлении межклеточных взаимодействий. Эти белковые молекулы, носящие название цитокинов, представлены многочисленным классом интерлейкинов, интерферонов, колониестимулирующих факторов, а также фактором некроза опухоли (Дж. Плейфэр в кн. Наглядная иммунология, М., Медицина, 1999, стр. 52-53).
В развитии иммуномодулирующей активности большую роль играют вторичные посредники, то есть такие вещества, которые оказывают непосредственное воздействие на клеточные мембраны, в том числе и на рецепторы, а также на различные гуморальные процессы. В настоящее время установлено, что в запуске иммуномодулирующего механизма важная роль принадлежит различным микро- и макроэлементам (биотикам), циклическому аденозинмонофосфату (цАМФ) и инозитолфосфату (ИФ3) (Й. Дудель в кн. Физиология человека, T.1. М., Мир, 1996, стр. 9-25).
Из биотиков наиболее важное значение принадлежит селену, который, как выяснилось, оказывает настолько существенное воздействие на структурные и гуморальные компоненты иммунной системы, что без него не формируется адекватная стимуляция лимфоцитарной и гистиоцитарной систем. Эффект селена в организме определяется его участием в функции клеточных мембран. Твердо установлено, что противоопухолевый эффект селена является высокоспецифичным и обусловлен не только антиоксидатной функцией этого микроэлемента.
Селен входит в состав субъединицы (27,5 Да) глутатионпероксидазы (Beckett et аl, 1991), форматдегидрогеназы, селено-протеинов (Р/57-58 кДа) и W (300 Да); 14 кДа селено-протеина, связывающего жирные кислоты; селено-протеина спермы; Se-зависимой 5-дейодиназы 1 типа.
Недостаточность селена вызывает снижение активности селенозависимой дейодиназы в гипофизе, обеспечивающей биотрансформацию Т4 в ТЗ. Поскольку в гипофизе есть рецепторы лишь к ТЗ, то при дефиците селена начинает страдать обратная связь, регулирующая продукцию тиреотропного гормона (ТТГ). Гиперпродукция ТТГ при недостаточности селена становится причиной гиперплазии щитовидной железы.
При помощи селена и его соединений в организме осуществляется биосинтез иммуноглобулинов, особенно типа G; происходит коррекция клеточных компонентов иммунитета, возрастает количество хелперов (СД4) и уменьшается количество супрессоров (СД8), в связи с чем нормализуется коэффициент иммунорегуляции. Кроме того, активная роль селена и его органических соединений в осуществлении антиоксидантных процессов приводит к нормализации клеточного дыхания и восстановлению метаболически важных энергетических процессов.
Активную роль в осуществлении клеточного и гуморального иммунного ответа играют макроэлементы кальций и магний. Является твердо установленным фактом, что реакция активации комплемента, без которого невозможно осуществление гуморальных и клеточных реакций, напрямую зависит от ионов кальция или магния. Известно, что кальций или магний являются не только внутриклеточными посредниками, но и участвуют в осуществлении тех реакций в клетке, в основе которых лежит регуляторное воздействие на мембраны.
При модулировании иммунной активности, когда констатируется снижение функции иммунной системы, требуется применение физиологически приемлемых адъювантных веществ, способных усиливать иммунный ответ на антиген. Наиболее вероятно, что адъюванты одновременно улучшают и пролонгируют представление антигенов. К металлам, которые оказывают адъювантные действия, относятся соли алюминия и кальция. В настоящее время стало известно, что адъюванты являются своего рода иммуностимуляторами и относятся к веществам, которые при введении вызывают явления неспецифического иммунитета, характеризующегося повышенной резистентностью к инфекции или опухолевому росту. Вот почему соли алюминия или кальция, которые биологически переносимы для организма, остаются единственными адъювантами, приемлемыми для приготовления человеческих вакцин. При посредстве алюминия и его солей происходит накопление мононуклеарных клеток, особенно макрофагов, в месте введения. Макрофаги участвуют в первой стадии иммунного ответа в качестве так называемых антиген-представляющих клеток. Белковые антигены, захваченные антиген-представляющими клетками, расщепляются на пептидные фрагменты, которые затем экспрессируются на клеточной поверхности, где они физически связываются с антигенами гистосовместимости II класса. T-клетки-хелперы могут распознавать только процессированные антигены, ассоциированные с антигенами гистосовместимости II класса и неспособны распознавать свободный недеградированный белок. Макрофаги выделяют монокин, интерлейкин 1, который стимулирует T-хелперы к секреции лимфокина - интерлейкина 2 - ростового фактора Т-клеток. Следствием совместного действия ИЛ - 1 и ИЛ - 2 является клональная экспансия T-клеток-хелперов. Такие адъюванты, как соли алюминия и кальция, принимают участие в начальном процессе этих событий, то есть запускают макрофагальную реакцию, участвующую в распознавании иммунного феномена "свой - чужой". Представленные данные показывают, что соли алюминия и кальция оказывают непрямое воздействие на один из механизмов иммуномодулирующей активности (Р. Бомфорд в кн. Руководство по иммунофармакологии, М., Медицина, 1998, стр. 288-291).
Циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) является особо важным посредником. Сложная цепь реакций, в которых он участвует, начинается с активации рецептора Rs на наружной поверхности плазматической мембраны, которая служит местом специфического связывания различных медиаторов и гормонов. После связывания со специфической стимулирующей молекулой рецептор Rs изменяет свою конформацию, что приводит к изменению влияния на белок Gs на внутренней поверхности мембраны. Активированный белок Gs стимулирует фермент на внутренней поверхности мембраны - аденилатциклазу, которая катализирует образование цАМФ из АТФ. Водорастворимый цАМФ и является тем посредником, который передает эффект стимуляции внеклеточного рецептора Rs к внутренним структурам клетки. Этим достигается так называемый эффект сенситизации, то есть синергичность воздействия вещества на рецепторы мембран сочетается с одновременным синтезом АТФ (И. Дудель в кн. Физиология человека, т.1, М., Мир, 1996, стр.23-25).
Крайне важную роль в иммуномодуляции играет и такой посредник как инозитолфосфат. Связывание Т-клетки с антигеном на поверхности антиген-представляющей клетки заставляет Т-клеточный рецептор запустить инозитолфосфолипидный сигнальный путь. В результате Т-клетка стимулирует антиген-представляющую клетку, которая начинает секретировать цитокины, в частности интерлейкин 1, который способствует активации Т-клетки. В свою очередь активированная Т-клетка синтезирует рецепторы для интерлейкина 2 и секретирует интерлейкин 2; связывание интерлейкина 2 с вновь произведенными рецепторами стимулирует рост и деление иммунных клеток.
Для поддержания функций иммунной системы в качестве микроэлемента селен вводят в комплексы витаминных препаратов, например Центрум (Справочник ВИДАЛЬ "Лекарственные препараты в России", М., АстраФармСервис, 1997, стр. Б-654). Известны также селеносодержащие препараты, полученные на основе биомассы водорослей (патент 2203043, 1988 или патент RU 2096037), обладающие общетонизирующим действием, реализация которого связана с активным воздействием на иммунную систему соединений селена, однако указанные препараты имеют недостаточно высокое содержание органического селена, а технология их получения сложна и требует длительного времени.
В патенте (RU 2138271 C1, 1999) было предложено иммунокорригирующее средство ПСК (протеоселеновый комплекс), технология производства которого разрешала предыдущие трудности, а содержание органического селена было выше, но недостаточно для эффективной коррекции иммунной системы.
Представленные сведения говорят о том, что современная технология получения препаратов нового класса, осуществляющих иммуномодулирующую активность, должна основываться на структуре и топологии присутствующих в организме активных биомолекул, представленных гликопротеинами, фосфолипидными и фосфолипопротеиновыми комплексами в сочетании с макро- и микроэлементами. Новые лекарственные средства по своему строению и механизму действия должны в определенной мере - стереохимически, т.е. биологически и химически, соответствовать тем веществам организма человека, которые непосредственно осуществляют иммуномодулирующий процесс.
Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента иммунотропных активирующих средств - создание селеновых фосфолипогликопротеиновых элемент-органических веществ (СФЛГПЭОВ), введение которых в организм не сопровождается побочными последствиями и вызывает системный лечебный эффект, основанный на нормализации иммуномодулирующей активности в организме человека. Для решения поставленной задачи предложена группа изобретений, объединенных общим изобретательским замыслом. Подобное лекарственное средство обладает иммуномодулирующим действием. Оно включает низкомолекулярный содержащий селен белковый компонент, полученный путем экстракции органическими растворителями с последующим высушиванием субстанции и растворением в 60-90% спирте (селенорганическое вещество), органические углеводы и фосфолипиды, и разнообразные неорганические ионы: катионы кальция, магния и алюминия, анионы гидросульфита и гидроортосиликат-анионы в виде жидких растворов. Смесь подобных веществ помещают и выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле 20-30 МГц в течение 5 минут. Полученные нами разнообразные комплексные препараты названы селеновыми фосфо-липогликопротеиновыми элемент-органическими веществами (СФЛГПЭОВ). В 1 мл комплекса иммуномодулирующего средства содержится 30-40 мг субстанции, 6-12 мкг селена; содержание углеводов и фосфолипидов к протеоселену составляет в мольном соотношении 1:1:1, а соотношение фосфолипогликопротеоселенового комплекса к неорганическим ионизированным молекулярным структурам в мольном соотношении составляет 1:2-1:7.
Получение фосфолипогликопротеоселенового комплекса (ФЛГПСК).
В качестве исходных продуктов используют зеленую массу белковосодержащих растений, например злаковых и бобовых, а также богатые белками листья кукурузы. Зеленую массу предварительно высушивают и измельчают. С помощью экстракции из полученного сырья извлекают белковоорганические комплексы. Экстракцию осуществляют с помощью эфира, спирта или димексида. Полученный экстракт выпаривают и производят лиофильную сушку. Полученный порошок растворяют в 60% или 90% спирте. После этого к раствору добавляют селен в виде ионов, получаемых при электролизе селеномочевины из расчета 6-12 мкг на 1 мл раствора и ко всему этому добавляют определенное количество углеводов и фосфолипидов (мольное соотношение фосфолипидов, гликозидов и протеоселена - 1:1: 1). В качестве углеводов используют глюкозу и фруктозу в мольных соотношениях 1:1, а в качестве фосфолипидов - фосфоглицерид. Полученные вещества помещают в электромагнитное (плотность потока мощности 5•10-3 Вт/см) синусоидальное высокочастотное поле 20-30 МГц на 5 минут. Указанное поле может быть создано, например, в сквидмагнитометрах, которые применяются для магнито-энцефалографии.
Примеры получения селеновых фосфолипогликопротеиновых элемент-органических веществ (СФЛГПЭОВ).
1. Способ получения кальцио-фосфолипогликопротеоселена.
К фосфолипогликопротеоселеновому комплексу (ФЛГПСК) добавляют необходимое количество водного раствора катионов кальция, полученного при предварительном электролизе ортосиликата кальция (мольное соотношение комплекса ФЛГПС к кальцию 1:6). Подобную смесь выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле с частотой 20-30 МГц и получают необходимое СФЛГПЭОВ.
2. Способ получения кальцио-сульфо-фосфолипогликопротеоселена.
К ФЛГПСК добавляют необходимое количество гидросульфита кальция, подвергнутого предварительно электролизу (мольные соотношения ФЛГПСК к кальцию 1: 6 и к анионам HSO3 1:7. Подобную смесь выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле с частотой 20-30 МГц и получают необходимое СФЛГПЭОВ.
3. Способ получения магнио-фосфолипогликопротеоселена.
К ФЛГПСК добавляют необходимое количество ионов магния, полученных при электролизе глицерофосфата магния (мольное соотношение ФЛГПСК к магнию 1:6). Подобную смесь выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле с частотой 20-30 МГц и получают необходимое СФЛГПЭОВ.
4. Способ получения алюмо-фосфолипогликопротеоселена.
К ФЛГПСК добавляют необходимое количество водного раствора катионов алюминия, полученных при электролизе сульфата алюминия (мольное соотношение ФЛГПСК к алюминию 1:4). Подобную смесь выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле с частотой 20-30 МГц и получают необходимое СФЛГПЭОВ.
5. Способ получения алюмо-силицио-фосфолипогликопротеоселена.
К ФЛГПСК добавляют определенное количество водного раствора катионов алюминия, полученных при электролизе сульфата алюминия и необходимое количество гидроортосиликат-анионов, полученных при электролизе гидроортосиликата кальция (мольное соотношение ФЛГПСК к алюминию 1:4 и к гидроортосиликат-аниону 1:2). Подобную смесь выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле с частотой 20-30 МГц и получают необходимое СФЛГПЭОВ.
Рентгеноструктурный анализ полученного вещества показал, что СФЛГПЭОВ представляют собой асимметрическую белковую молекулу с альфа-спиралью и бета-структурой. Гидрофобный конец молекулы СФЛГПЭОВ, представленный сульфгидрильными связями, переходит в альфа-спираль, бета-структура молекулы СФЛГПЭОВ - извита соответствующим образом и внутренние стороны аминокислотных цепочек соединены диселенидными и дисульфидными связями, обеспечивающими пространственную устойчивость и в то же время гибкость данной молекулы.
В состав всей молекулы СФЛГПЭОВ входит 15 основных аминокислот, из которых 11,5% принадлежит аланину, 24,0% лейцину, 10,5% пролину и 27,0% глутаминовой кислоте. Соответственно описанной технологии могут быть получены молекулы лекарственного вещества из 15-20 аминокислот с относительно низким молекулярным весом.
Острую токсичность препарата исследовали при внутрибрюшинном введении СФЛГПЭОВ в дозе 250 мг/кг мышам (возраст 6 недель, вес 28-30 г). Значение ЛД составило 700 мг/кг.
При исследовании общей токсичности мышам вводили СФЛГПЭОВ в дозе 100 мг/кг в день внутрибрюшинно непрерывно в течение 10 дней. Снижение веса и каких-либо других нарушений при этом не наблюдали, в последующем, при наблюдении этих мышей в течение трех месяцев отклонений от нормы не выявлено.
В результате проведенных исследований установлено, что СФЛГПЭОВ является органическим низкомолекулярным соединением, обладает иммуномодулирующим действием, не токсичен, полностью растворим в воде, биологических жидкостях: крови, лимфе и ликворе. В 1 мл СФЛГПЭОВ содержится в зависимости от количества аминокислот в лиганде от 30 до 40 мг субстанции и 6-12 мкг селена.
Доза вводимого препарата зависит от клинического состояния больного, его возраста, веса, а также способа введения. Эффективная терапевтическая суточная доза для больного составляет от 6 мг до 150 мг активного вещества, которое вводят одномоментно или дробно.
Способ модулирующей функции иммунной системы осуществляют следующим образом.
Полученный препарат СФЛГПЭОВ представляет собой раствор активного вещества в 60-90 % спирте, 1 мл которого содержит 30-40 мг лекарственной субстанции. СФЛГПЭОВ вводят перорально, внутримышечно, внутривенно, внутриартериально, а также наружно в виде суспензии в масляном растворе или в виде мази с масляно- спиртовым наполнителем.
При пероральном введении необходимую дозу рассчитывают следующим образом:
в 20 каплях раствора содержится 30-40 мг лекарственной субстанции;
в 10 каплях (1/2 мл) содержится 15-20 мг препарата;
в 5 каплях (1/4 мл) содержится 7,5-10 мг препарата;
в 3 каплях (1/7 мл) содержится 4,3-5,7 мг препарата.
При внутримышечном, внутривенном или внутриартериальном введении препарат растворяют в физиологическом растворе для лучшей диссоциации в соотношении 1:10 при использовании 60% спирта или 1:15 при 90% спирте.
Например: детям до 6 лет при клинической патологии средней степени тяжести препарат вводят однократно в виде инъекции от 0,1 мл до 0,5 мл в день, при тяжелой степени патологии указанную дозу вводят два раза в день. При проведении интенсивной терапии препарат вводят внутримышечно или внутривенно (внутриартериально) по 1,0-2,0 мл соответственно с добавлением 10 или 20 мл физиологического раствора. В случае перорального введения в зависимости от возраста, веса и степени поражения - от 0,5 мл до 3,0 мл, причем препарат растворяют в 1/3 стакана кипяченой слегка теплой воды (36-38oC).
Длительность лечения может колебаться от 1 до 3 месяцев, в случае тяжело протекающей патологии курс лечения повторяют с интервалом 1-2 месяца до выраженного клинического эффекта. В период проведения лечения контролируют иммунологический статус больного по развернутой клинической формуле и иммунограмме.
Приводим конкретные примеры реализации способа иммуномодуляции селеновыми фосфолипогликопротеиновыми элемент-органическими веществами.
Пример 1. Больная П.Н.В. 1990 г. рождения (наблюдение Центра биотехнологических проблем).
Внезапно на фоне полного здоровья у больной возникла остро развившаяся инфекция (грипп), сопровождающаяся повышенной температурой - 38,6oC, сильной головной болью, режущей болью в глазных яблоках, мышечной слабостью, кашлем и болью за грудиной, потерей аппетита.
С согласия родителей больной на второй день от начала заболевания было начато лечение селеновым фосфолипогликопротеиновым веществом (кальцио-силицио-фосфолипогликопротеоселен) по 5 капель на 30 г теплой кипяченой воды 2 раза в день за 30 мин до еды. К третьему дню от начала лечения нормализовалась температура, улучшился аппетит, возникло чувство бодрости. К четвертому дню утихла головная боль, исчезли боли за грудиной. Кашель продолжался еще в течение 7 дней на фоне значительного клинического улучшения. Через 12 дней больная почувствовала себя полностью здоровой. Вначале лечения и после него были проведены контрольные иммунологические исследования:
иммунограмма до начала лечения - Т-хелперы СД4 - 30, Т-супрессоры СД8 - 28,2, активированные лимфоциты СД38 - 24,6, рецептор интерлейкина-2 СД25 - 2,3, естественные киллеры СД16 (NK-клетки) - 8,9, молекула адгезии СД50 - 85,6;
иммунограмма после окончания лечения - Т-хелперы СД4 - 38,9, Т-супрессоры СД8 - 24,6, активированные лимфоциты СД38 - 37,4, рецептор интерлейкина-2 СД25 - 4,8, естественные киллеры СД16 (NK -клетки) - 19,1, молекула адгезии СД50 - 98,1.
В этом наблюдении клеточный противовирусный иммунитет проявился активацией Т-хелперов, киллерной системы клеток, клеток СД25 и СД50, содержащих молекулы адгезии. Приведенные данные свидетельствуют о том, что под воздействием селенового фосфолипогликопротеинового элемент-органического вещества возникла иммуномодулирующая активность целой системы клеток, устранившая вирусную инфекцию. Это стало возможным вследствие уничтожения вируса цитотоксическими Т-лимфоцитами и NK -клетками.
Пример 2. Больная П.И.В. 1964 г. рождения. Диагноз - остаточные явления вирусного гепатита А с явлениями подострого гепатита. Поступила в клиническое отделение Института инфекционных болезней с жалобами на высокую температуру, озноб, головную боль, слабость и ломоту во всем теле. Через 5 дней от начала заболевания у пациентки исчез аппетит, появилась тошнота и возникли боли в области правого подреберья. Моча была темного цвета, наблюдалось обесцвечивание кала, кожа и слизистая оболочки приобрели темно-коричневый цвет. Был выставлен диагноз эпидемического гепатита - форма А (болезнь Боткина). После проведения комплексного лечения больная была выписана домой, однако общее состояние ее оставалось неудовлетворительным: периодически возникали боли в правом подреберье, наблюдалось нарушение пищеварительной функции в виде спастического колита, отмечалась быстрая утомляемость и физическая слабость. В 1998 г. с согласия больной было начато лечение селеновыми фосфолипогликопротеиновыми элемент-органическими веществами (магнио-фосфолипогликопротеоселен и кальцио- фосфолипогликопротеоселен) по 0,5 мл препарата на 50 г кипяченой воды 2 раза в день за 30 мин до еды. В течение года было проведено два курса лечения по 60 дней каждый с интервалом между первым и вторым в два месяца. К концу лечения состояние пациентки значительно улучшилось: исчезли боли в правом подреберье, повысилась работоспособность, больная стала употреблять практически все виды продуктов. Были проведены две контрольные иммунограммы.
Иммунограмма до лечения - Т-хелперы СД4 - 27,4, Т-супрессоры СД8 - 37,8, активированные лимфоциты СД38 - 25,6, рецептор интер-лейкина-2 СД25 - 2,0, естественные киллеры СД16 (NK -клетки) - 12,4, молекула адгезии СД50 - 78,1;
иммунограмма после окончания лечения - Т-хелперы СД4 - 38,4, Т-супрессоры СД8 - 25,6, активированные лимфоциты СД38 - 29,4, рецептор интерлейкина-2 СД25 - 4,7, естественные киллеры СД16 (NK -клетки) - 19,1, молекула адгезии СД50 - 98,1.
В приведенном наблюдении эффект иммуномодуляции сочетается с одновременной стимуляцией иммунной системы, так как в начале лечения были выражены явления иммунодепрессии - Т-супрессоры преобладали над Т-хелперами. Однако после применения селеновых элемент-органических веществ стала доминировать иммунная активность - Т-хелперы превышали количество супрессорных клеток (коэффициент иммунорегуляции - 1,6). Синхронно с этим активировалось производство интерлейкинов, молекул адгезии и киллерных клеток, что прямо указывало на иммуномодулирующую активность действия селеновых фосфолипогликопротеиновых веществ.
Пример 3. Больная В.Н.Н. 1968 г. рождения (ист. бол. N 285-88-9/99 от 16.12. 99 г.). Наблюдение Киевского городского онкологического диспансера.
Считает себя больной с 1998 г., когда была обнаружена опухоль правой молочной железы (при ультразвуковой диагностике в ткани правой молочной железы выявлено новообразование размерами 3 х 3,2 см). 16.12.1999 г была произведена секторальная резекция молочной железы с удалением опухоли. Тем не менее через некоторое время при повторном осмотре правой молочной железы вновь была определена опухоль и ультразвуковая диагностика подтвердила рецидив опухоли размерами 2,5 х 1,5 см. Опасаясь появления метастазов, больная обратилась за помощью и с ее согласия был проведен 2-х месячный курс лечения инъекциями фосфолипогликопротеоселеновыми элемент-органическими препаратами (алюмо-фосфолипогликопротеоселен и алюмо-силицио-фосфолипогликопротеоселен). Селеновые элемент-органические вещества с наличием в их молекулах атомов алюминия были выбраны с целью как прямого иммунного, так и адъювантного воздействия. Лечение проводилось в виде ежедневных инъекций препарата по 1 мл внутримышечно с 10 мл теплого физиологического раствора с чередованием алюмо-фосфолипогликопротеоселена и алюмо-силицио-фосфолипогликопротеоселена. Через месяц плотное опухолевое образование значительно уменьшилось и к концу лечения полностью исчезло. В течение всего периода лечения больная отмечала локальную пульсирующую боль в области опухолевого образования. В настоящее время чувствует себя практически здоровой, рецидива опухоли в молочной железе до настоящего времени нет. Перед лечением и после него были проведены две иммунограммы:
иммунограмма до начала лечения - Т-хелперы СД4 - 28,9, Т-супрессоры СД8 - 24,6, активированные лимфоциты СД38 - 29,4, рецептор интерлейкина-2 СД25 - 2,0, естественные киллеры СД16 (NK -клетки) - 12,4, молекула адгезии СД50 - 85,7;
иммунограмма после окончания лечения - Т-хелперы СД4 - 39,6, Т-супрессоры СД8 - 25,4, активированные лимфоциты СД38 - 39,4, рецептор интерлейкина-2 СД25 - 3,9, естественные киллеры СД16 (NK -клетки) - 18,4, молекула адгезии СД50 - 98,4.
В приведенном наблюдении виден клинический эффект иммуномодулирующего действия селеновых фосфолипогликопротеиновых элемент-органических веществ - увеличение количества Т-хелперов, нормализация коэффициента иммунорегуляции (1,5), увеличение количества киллеров, активация системы адгезии, увеличение количества интерлейкинов. Противоопухолевый клеточный иммунитет в сочетании с гуморальным привел к выраженному эффекту иммуномодулирующей активности - рассасыванию опухоли в ткани молочной железы.
Изобретение относится к медицине и касается иммуномодулирующего средства, которое может быть использовано для лечения различных заболеваний, сопровождающихся расстройствами модулирующей активности иммунной системы. Изобретение заключается в том, что средство содержит фосфолипогликопротеоселеновый комплекс, включающий низкомолекулярный селен, белковый компонент, полученный путем экстракции органическими растворителями с последующим высушиванием субстанции и растворением в спирте, органические углеводы и фосфолипиды и неорганические ионы - катионы кальция, магния и алюминия, анионы гидросульфита и гидроортосиликатанионы в виде жидких растворов. Смесь подобных веществ помещают и выдерживают в электромагнитном синусоидальном высокочастотном поле 20-30 МГц. В 1 мл иммуномодулирующего средства содержится 30-40 мг субстанции и 6-12 мкг селена; мольное соотношение фосфолипида к гликозиду и протеоселену составляет 1:1:1, а фосфолипогликопротеоселенового комплекса к неорганическим ионизированным структурам составляет 1:2-1:7. Также изобретение заключается в способе иммуномодуляции. Изобретение обеспечивает системный лечебный эффект, основанный на активации клеточных и гуморальных иммунных процессов, в том числе основного механизма иммуномодулирующей активности - распознавания чужеродного антигена. 2 с. и 17 з.п. ф-лы.
| ИММУНОКОРРЕГИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ИММУНОКОРРЕКЦИИ | 1999 |
|
RU2138271C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩЕГО ПРЕПАРАТА БИОМАССЫ СПИРУЛИНЫ | 1996 |
|
RU2096037C1 |
| СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ АДАПТАЦИИ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА | 1988 |
|
RU2048809C1 |
| WO 00/12101 A1, 09.03.2000. | |||
