СПОСОБ ОЦЕНКИ ХАРАКТЕРА ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА В ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЕ Российский патент 2001 года по МПК G01N33/50 G01N33/52 

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для выявления активности воспалительного процесса, состояния местных факторов защиты в предстательной железе при обследовании больного и для обоснования выбора оптимальной тактики лечения с учетом состояния свободно радикального окисления, обоснования необходимости включения рекомендуемых в последнее время антиоксидантов в комплекс лечения, контроля эффективности проводимого лечения.

По современным представлениям, одним из важнейших задач при клиническом обследовании больного хроническим простатитом любой этиологии является установление активности патологического процесса.

Известные методы исследования, направленные на изучение местного иммунитета, фагоцитоза требуют дорогостоящего оборудования и реактивов.

Для изучения местных факторов естественной защиты в предстательной железе определяются содержание секреторного (s) иммуноглобулина A (slgA), сывороточных иммуноглобулинов классов G, А, М в секрете предстательной железы и сыворотке крови, активность лизоцима в секрете предстательной железы и иммуносупрессивную активность семенной плазмы.

Количественное определение уровня IgA в секрете предстательной железы и сывороточных IgA, IgG, IgM в сыворотке и секрете проводили методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Активность лизоцима оценивали, используя в качестве тест-объекта ацетоновый порошок. Иммуносупрессивную активность семенной плазмы выявляли путем культивирования лимфоцитов больных в реакции бластрансформации в течение 96 ч с фитогемагглютинином при добавлении аутологической семенной плазмы в разведении 1:320. По результатам исследования было установлено, что имеющиеся одинаковые при норме соотношения уровней IgA и IgG, при воспалительных процессах в предстательной железе различаются. Соотношение уровней иммуноглобулинов в сыворотке крови остается прежним, а в секрете предстательной железы составляет 1:3. Воспалительные процессы в половых путях мужчины сочетаются с повышением концентрации иммуноглобулинов и понижением активности лизоцима в секрете предстательной железы [Дранник Г.Н. , Юнда И. Ф. , Монтаг Т.С., Бойко Н.И., Романив В.Я. Местный иммунитет у больных хроническим простатитом. Вестник дерматовенерологии, 1986, N 9, стр. 66-70].

Прототипом предлагаемого нами метода исследования секрета предстательной железы является иммунохимический тест определения лактоферина. Лактоферин выступает критерием активности воспаления при простатите. Его уровень в стадии обострения превышает норму вдвое, а после эффективной терапии снижается до нормальных значений. Тест на лактоферин отражает различные стороны патологического процесса и может служить показателем активности заболевания и эффективности предпринятого лечения [Николаев А.А., Аншакова Н.И., Мельман В.М. Иммунохимические тесты в диагностике заболеваний мужской репродуктивной системы. Урология и нефрология, 1991 г., N 5, стр. 56-59].

Иммунохимический тест измерения лактоферина в секрете предстательной железы показывает, что его уровень повышается при обострении хронического простатита. Таким образом, данный тест имеет определенную диагностическую ценность. Но проведение такого иммунохимического исследования теста требует длительных по времени исследований с применением дорогостоящих реактивов в условиях специализированных биохимических и иммунологических лабораторий при наличии специально обученного персонала.

Технический результат предлагаемого изобретения - повышение точности диагностики, сокращение времени исследования, возможность выбора более адекватного патогенетического лечения.

Оно основано на определении свободных радикалов - активных форм кислорода в секрете предстательной железы методом регистрации люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ), отражающей состояние местных факторов естественной защиты, которое изменяется в зависимости от характера воспалительного процесса и проведенного лечения.

Способ осуществляется следующим образом.

0,1 мл секрета простаты, полученный путем массажа предстательной железы в чистые пробирки, разводят в 2 мл физиологического раствора (pH 7,2) с люминолом (10^-5 М). Хемилюминесценцию изучают на установке ХЛМ - 003. Проверку стабильности работы установки проводили перед каждым измерением по излучению вторичного эталона СФХМ - 1 (ГОСТ 9411 - 81). Интенсивность свечения контроля составляла 5,1-10⁵ квантов в сек. Для удобства эта величина была принята за одну относительную единицу. Определяют светосумму свечения, характеризующую генерацию радикалов кислорода, максимальную интенсивность свечения и величину спонтанного излучения. Светосумму свечения определяют по площади под кривой записи ХЛ за 10 мин измерения. Длительность латентного периода оценивают в мин., крутизну нарастания медленной вспышки - по тангенсу угла наклона касательной. Во время исследования температуру образца поддерживают при 37^oC. Процесс измерения хемилюминесценции и обработка результатов проводятся в автоматическом режиме, что позволяет повысить точность и объективность полученной информации. Полученные результаты фиксируют в виде графического изображения на каждое исследование и автоматически обрабатывались ПЭВМ пакетом специальных программ.

На фиг. 1 приведена типичная запись ХЛ секрета простаты здорового человека; на фиг. 2 - запись ХЛ пациента с вялотекущим воспалением предстательной железы; на фиг. 3 - с повышенными показателями ХЛ при обострении хронического простатита; на фиг. 4-5 - график ХЛ пациента с обострением хронического простатита до и после лечения.

Существенным отличием предлагаемого изобретения является то, что при исследовании секрета простаты регистрируют уровень его хемилюминесценции, обусловленный наличием в них активных форм кислорода, вырабатываемых лейкоцитами и отражающих их фагоцитарную активность. По полученным данным: спонтанное свечение, максимальная вспышка, светосумма - оценивают характер воспалительного процесса в предстательной железе.

Интегральной величиной является светосумма свечения, измеряемая за 10 мин. Ее средние значения составляют в норме 65,47 ± 12,25 условных единиц, величина спонтанного свечения равна в среднем 7,17 ± 3,99 у. е., максимальной светимости 10,27 ± 2,49 у. е.

Для больных с длительно и вялотекущим воспалительным процессом, с редкими обострениями (n = 9) светосумма свечения оказалась ниже 25 у. е., составляя в среднем 18,34 у. е., и наоборот, для группы больных (n = 11) с более выраженными проявлениями простатита, подтвержденная данными других видов исследования (анамнез, клинико-лабораторные данные, УЗИ предстательной железы), превышала 100 у. е. и в среднем равнялась 363,18 у. е.

Пример 1 (фиг. 2). Пациент М.М.С. 22 лет, длительное время лечился различными антибактериальными препаратами по поводу явлений хронического простатита, которые давали кратковременное улучшение. При трансректальном осмотре ПЖ плотноэластичная, неоднородная, отечная, умеренно болезненная. Микроскопическое исследование секрета простаты показало повышенное содержание лейкоцитов, встречающееся скоплениями, уменьшение количества лецитиновых зерен. Проведенное после клинического обследования исследование ХЛ секрета простаты показало снижение в отличие от нормы показателей - светосумма составила 22,13 у. е., спонтанная светимость 4,39 у. е., максимальная светимость 2,83 у. е. После проведенной этиотропной и патогенетической терапии, сопровождавшейся ликвидацией клинических проявлений и нормализацией секрета предстательной железы, параметры ХЛ изменились в сторону повышения и составили: светосумма - 119,24 у. е., спонтанная светимость 6,88 у. е., максимальная светимость - 18,17 у. е. (фиг. 3).

Пример 2 (фиг. 3). Пациент С. И. И. 39 лет, страдает хроническим простатитом последние 4-5 года. Неоднократно лечился амбулаторно. Принимал антибиотики широкого спектра действия (инъекции гентамицина, ампиокса, клафоран и внутрь несколько видов антибактериальных препаратов). В последнее время ухудшение состояния, проявляющееся сильными болями внизу живота, в паховых областях, дизурическими явлениями и ослаблением половой функции. При трансректальном исследовании выявлена увеличенная ПЖ, поверхность бугристая, консистенция плотная, болезненная. При микроскопическом исследовании нативного препарата секрета предстательной железы отмечается наличие большого количества лейкоцитов в поле зрения, встречаются они скоплениями. Лецитиновые зерна единичные. Хемилюминесценция до начала лечения показала - светосумма составила 822,20 у. е., спонтанная светимость 57,62 у. е., максимальная светимость составила 90,72 у. е. Проведенная после окончания лечения ХЛ показала изменения параметров в сторону снижения - светосумма 194,05 у. е. , спонтанная светимость 9,38 у.е., максимальная светимость 25,95 у. е. Снижение показателей ХЛ сопровождалось нормализацией микроскопической картины секрета предстательной железы, ликвидацией болевого синдрома и нормализацией половой функции.

Из приведенных примеров следует, что ХЛ сока простаты зависит от характера течения воспалительного процесса: снижается при длительных, вялотекущих, неадекватно леченых процессах с явлениями иммунодефицита и увеличивается при клинически выраженном обострении воспалительного процесса. Это свидетельствует о значении активных форм кислорода в природе воспаления. Недостаток генерации активных форм кислорода ведет к наличию латентно текущего воспалительного процесса. Избыток образования активных форм кислорода сопровождается обострением имеющегося хронического воспаления.

Применение люминол-зависимой хемилюминесценции секрета предстательной железы при хронических простатитах облегчает диагностику в ранних этапах заболевания, позволяет вести достаточно информативный контроль эффективности лечения, обосновать использование определенной группы лекарственных препаратов. Так же люминол-зависимая хемилюменесценция позволяет определить влияние используемых препаратов на состояние свободного радикального окисления конкретно в предстательной железе и управлять данным процессом, используя антиоксиданты и прооксиданты. Проводимое исследование не требует больших материальных затрат и просто в проведении. Все процессы регистрации и оформления протокола исследования проводятся с помощью компьютерной обработки без вмешательства персонала, тем самым повышается точность исследования.

Способ может быть использован в медицине, а именно в урологии для выявления активности воспалительного процесса, состояния местных факторов защиты в предстательной железе при обследовании больного. Определяют светосумму свечения, максимальную интенсивность свечения и величину спонтанной светимости и при уровне светосуммы свечения менее 25 у.е., спонтанной светимости менее 5 у.е., максимальной светимости менее 7 у.е. воспалительный процесс оценивают как вялотекущий, а при светосумме свечения более 100 у.е., спонтанной светимости более 15 у.е., максимальной светимости более 20 у.е. воспалительный процесс оценивают как обострение. Способ повышает точность диагностики, сокращает время исследования, дает возможность выбора более адекватного патогенетического лечения. 5 ил.

Способ оценки характера воспалительного процесса в предстательной железе путем исследования ее секрета, отличающийся тем, что регистрируют уровень люминолзависимой хемилюминесценции секрета и при светосумме свечения менее 25 у.е., спонтанной светимости менее 5 у.е., максимальной светимости менее 7 у.е. воспалительный процесс оценивают как вялотекущий, а при светосумме свечения более 100 у.е., спонтанной светимости более 15 у.е., максимальной светимости более 20 у.е. его оценивают как обострение.