СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ЯИЧНИКОВ Российский патент 2002 года по МПК A61K35/26 A61K38/20 A61P35/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к онкогинекилогии, и может быть использовано при лечении рака яичников III-IV стадий распространенности опухолевого процесса с использованием комплексных методов лечения, включающих хирургический, противоопухолевую химиотерапию, иммунотерапию.

Известен "Способ лечения больных злокачественными опухолями с применением ЛАК-терапии (лимфокин-активированных киллеров) (см. В.И. Новиков, В.И. Карандашов, И. Г. Сидорович "Иммунотерапия при злокачественных новообразованиях", М., "Медицина", 1999 г., с. 98-100). Способ предусматривает экстракорпоральное культивирование в присутствии интерлейкина-2 (ИЛ-2) лимфоцитов, выделенных из периферической крови с помощью многократных процедур цитофореза: с последующим внутривенным введением. Срок культивирования колеблется от 3-х до 5 суток. При этом культивирование с ИЛ-2 приводит к генерации ЛАК, обладающих высоким цитотоксическим потенциалом, а следовательно, и противоопухолевой активностью. Источником ЛАК-клеток является периферическая кровь.

Недостатками известного метода являются процедуры многократного цитофореза для получения необходимого количества лимфоцитов, а также необходимость проведения нескольких курсов ЛАК-терапии, поскольку эффективность метода зависит от количества лимфоцитов, трансформированных в ЛАК. Кроме того, нет сведений в современной медицинской литературе о сочетании ЛАК-терапии с противоопухолевой терапией рака яичников.

Известен "Способ неоадъювантной аутолимфохимиотерапии (АЛХТ) у практически инкурабельных больных раком яичников", выбранный нами в качестве прототипа (см. "Влияние АЛХТ на функциональное состояние лимфоцитов у больных раком яичников". Тезисы II съезда онкологов стран СНГ. Украина, Киев, 23-26 мая 2000 г. V Suppl 1061). Была исследована динамика иммунологических показателей крови и лимфы и состояние клеточных мембран форменных элементов крови у 12 инкурабельных больных раком яичников после предоперационной АЛХТ. Отмечено статистически достоверное увеличение функциональной активности Т-лимфоцитов крови. Позитивная динамика иммунологических показателей в значительной степени определяется состоянием клеточных мембран. После АЛХТ имело место увеличение до уровня доноров текучести мембран лимфоцитов в зоне белок-липидных контактов и липидного бислоя, изначально сниженной у больных на 24-31%, и снижение содержания внеэритроцитарного гемоглобина, увеличение которого в 1,5 раза у больных до лечения отражало повышение проницаемости мембран клеток крови.

Полученные данные свидетельствуют о том, что АЛХТ обладает выраженным клиническим эффектом, не приводит к угнетению иммунного статуса больных распространенным раком яичников и сопровождается нормализацией текучести и проницаемости мембран клеток крови.

Тем не менее, ЛАК-терапия позволяет воздействовать даже на химиорезистентные опухолевые клетки, поэтому комбинация ее с АЛХТ в курсе неоадъювантного лечения может привести к усилению циторедуктивного эффекта.

Целью изобретения является повышение эффективности лечения больных раком яичников III-IV стадий в предоперационном периоде, заключающееся в уменьшении распространенности процесса, резорбции опухоли и возможности выполнения операции в полном объеме.

Поставленная цель достигается тем, что в предоперационном периоде и/или на этапах противоопухолевого лечения проводят забор центральной лимфы в объеме 1000-2000 мг, делят лимфу на 2 равные порции, одну часть лимфы инкубируют в течение 30-60 минут с цитостатиками в дозах: циклофосфан 500 мг/м², адриабластин - 40 мг/м², цисплатин 100 мг/м² и вводят больной внутривенно, капельно в тот же день на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии; другую порцию лимфы инкубируют с 2 млн. ME ронколейкина (рекомбинантного ИЛ-2) в течение 24 часов при температуре 37^oС в полной питательной среде, затем отмывают от среды и вводят больной внутривенно, капельно на второй день после химиотерапии.

Изобретение "Способ лечения рака яичников" является новым, так как оно неизвестно из уровня медицины в области комплексной терапии распространенных форм рака яичников.

Новизна изобретения заключается в том, что в предоперационном периоде и/или на этапах противоопухолевого лечения, проводят забор центральной лимфы больной в объеме 1000-2000 мл, делят лимфу на 2 равные порции, одну часть лимфы инкубируют в течение 30-60 минут с цитостатиками в дозах: циклофосфан - 500 мг/м², адриабластин 40 мг/м², цисплатин 100 мг/м² и вводят больной внутривенно, капельно, в тот же день на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии, другую порцию лимфы инкубируют с 2 млн. ME ронколейкина (рекомбинантного ИЛ-2) в течение 24 часов при температуре 37^oС в полной питательной среде, отмывают от среды и вводят больной внутривенно, капельно на второй день после химиотерапии.

Сопоставительный анализ сущности изобретения с известными способами лечения распространенных форм рака яичников III-IV стадий показывает, что в медицинской практике неизвестен способ противоопухолевой индукционной терапии рака яичников путем последовательного применения АЛХТ и ЛАК-терапии на аутолимфе. Как АЛХТ, так и ЛАК-терапия обеспечивают цитотоксическое воздействие на опухоль, а их синергический эффект при раке яичников не известен.

Следует отметить, что благодаря генерации ЛАК на основе лимфоцитов, культивированных с ронколейкином, высокому цитозу лимфы (до 10⁷/мл лимфоцитов), возможности взятия ее больших объемов из грудного протока при его катетеризации (до 1000-2000 мл) можно получить до 10⁹-10¹⁰ клеток. Это позволяет повысить цитотоксический потенциал лимфоидных клеток больного и обойтись одним курсом ЛАК-терапии, вместо 3-4 курсов, принятых при генерации ЛАК из клеток крови. Учитывая нередко развивающуюся химиорезистентность опухолей и то, что химиорезистентные клетки остаются ЛАК чувствительными, мы предлагаем последовательное проведение АЛХТ и ЛАК-терапии на лимфе для достижения максимальной реализации циторедуктивного эффекта. Наши лабораторные иммунологические исследования показали, что при инкубации лимфы с ронколейкином в течение 24 часов обнаружено повышение количества лимфоцитов, экспрессирующих СД8+ (цитотоксических) и маркеры ранней (СД25+) и поздней (HLADR+ +CD95+) активации (таблица 1). CD25+ является рецептором ИЛ-2, т.е. обработка лимфоцитов, ронколейкитивность лимфоцитов после инкубации с ронколейкином повышается (как спонтанная, так и митоген-индуцированная, РБТЛ).

Кратковременная обработка ронколейкином лимфоцитов лимфы (30' при 37^oС без культивирования) также приводит к определенным изменениям функционального состояния клеток. В частности, возрастает продукция монокинов JL - 1β и TNF - α, функциональная активность Т-клеток (при снижении спонтанной РБТЛ); возрастает экспрессия маркеров, характеризующих цитотоксические клетки (CD8+ и CD16+), и снижается уровень клеток, несущих маркеры активации (CD25+ и CD95+) (таблица 1). Представленные данные приведены в нижеследующих таблицах.

При проведении курса лечения, включающего ЛАК-терапию на лимфе и АЛХТ, у этих больных происходит повышение функциональной активности Т- и В-клеток, снижение исходно высокого уровня CD16+ клеток. Исходно повышенный уровень CD8+ клеток снижается, исходно низкий возрастает (см. таблицу 2). Отмеченное снижение в периферической крови содержания CD16+ клеток можно объяснить их миграцией в очаг.

Изобретение "Способ лечения рака яичников" имеет изобретательский уровень, так как для специалиста онкогинеколога и клинического иммунолога явным образом не следует из уровня развития медицины, в частности онкогинекологии, при лечении распространенных форм рака яичников.

Изобретение "Способ лечения рака яичников" является не очевидным, не следующим из уровня медицины в области лечения распространенных форм рака яичников, не известно ни в мировой, ни в СНГ и России медицинской литературе.

Изобретение является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, в медицинских учреждениях, занимающихся лечением онкологических заболеваний, НИИ онкологии, онкодиспансерах.

"Способ лечения рака яичников" выполняется следующим образом:
Под клиническим наблюдением находилось 8 больных эпителиальным раком яичников IV стадии в возрасте 48-65 лет. Первым этапом комплексной терапии у них проводилось дренирование грудного лимфатического протока и получение 1000-2000 мл лимфы, которая была разделена на 2 равные порции. Для проведения АЛХТ одну из них инкубировали в течение 30-60 минут с цитостатиками (CAP схема в дозе: циклофосфан - 500 мг/м², адриабластин - 40 мг/м², цисплатин - 100 мг/м²) и вводили больной внутривенно, капельно в тот же день на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии (ондансетрон - 8 мг). Другую порцию лимфы инкубировали с 2 млн. ME ронколейкина (рекомбинантного ИЛ-2) в течение 24 часов при температуре 37^oС в полной питательной среде, содержащей 199 глутамин аутосыворотки в качестве ростовых факторов, после чего отмывали от среды и вводили больной внутривенно, капельно во второй день цикла неоадъювантной химиотерапии.

До и через 2 недели после лечения у больных изучали иммунный статус, проводили определение СА-125, УЗИ и ФЛО контроль.

Результаты клинического применения АЛХТ и ЛАК свидетельствуют о том, что у больных повышалась исходно низкая функциональная активность Т- и В-лимфоцитов. Кроме того, отмечалось снижение уровня клеток, экспрессирующих рецепторы CD8+ и CD16+, что на фоне регрессии опухоли мы объясняли их миграцией из периферической крови в очаг.

В клинической картине мы констатировали резорбцию плеврита в 3-х случаях, купирование выраженных периферических отеков у 1 больной, болевого синдрома - у 4-х и явлений динамической кишечной непроходимости - у 5 больных. У всех 8 больных в последующем выполнена циторедуктивная операция в полном объеме. У 4-х больных размеры резидуальной опухоли были менее 2 см.

Таким образом, наше клиническое применение заявляемого способа подтверждает высокую эффективность сочетания АЛХТ+ЛАК.

Примеры конкретного применения "Способа лечения рака яичников"
Клинический пример 1
Больная Я. , ист.б. 11107/л, 48 лет, поступила в гинекологическое отделение РНИОИ 8.09.00 г. с клиническим диагнозом: рак яичников IV ст., метастазы в пупок, паховые лимфоузлы слева, правосторонний экссудативный плеврит, частичная кишечная непроходимость.

12.09.00 дренирован грудной лимфатический проток, собрано 1600 мл лимфы. 14.09.00 после инкубации в течение суток 400 мл лимфы с 2 млн. ME ронколейкина и последующим культивированием клеток проведен курс АЛХТ, в/в капельно введено на 800 мл лимфы 800 мг циклофосфана, 50 мг доксорубицина, 150 мг цисплатина на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии ондансетроном (8 мг). В результате проведенной неоадъювантной иммунохимиотерапии состояние больной значительно улучшилось: индекс Корновского повысился с 60 до 80 баллов, резорбировался экссудат в правой плевральной полости, нормализовался стул, размеры метастаза в паховый лимфоузел слева уменьшились с 4,0х2,0 см до 1,5х0,7 см.

26.09.00 выполнена циторедуктивная операция в объеме лапаратомии с иссечением пупка, подвлагалищной ампутации матки с придатками, экстирпации большого сальника, левосторонней паховой лимфаденэктомии.

Размеры резидуальной опухоли <1 см (за счет мелкой диссеминации по брюшине дугласова пространства).

Послеоперационный гистоанализ 58601-608: серозная паппилярная цистаденокарцинома с наличием неоммамных телец, очагами некроза, выраженной дистрофией опухолевых клеток.

Течение послеоперационного периода гладкое.

Клинический пример 2
Больная М., 46 лет, и.б. 4544/л, поступила в гинекологическое отделение РНИОИ 8.12.00 с клиническим диагнозом: рецидив рака яичников II ст., клиническая группа 2, состояние после надвлагалищной ампутации матки с придатками, резекции большого сальника 23.03.00 (в г. Волгодонск), 3-х курсов химиотерапии циклофосфаном. п/о г. ан. 11143-67: серозная паппилярная цистаденокарцинома. 13.12.00 при УЗИ в полости малого таза определяется солидно-кистозного строения опухолевое образование 9,39х8,40 см, 15.12.00 дренирован грудной лимфатический проток, налажен сбор лимфы.

По описанной методике 10.12.00 проведен курс аутолимфохимиотерапии. На аутолимфе введено 600 мг циклофосфана, 150 мг цисплатина, 2 млн.ед. ронколейкина. Лечение больная перенесла удовлетворительно.

По данным УЗИ от 15.01.01 размеры рецидивной опухоли 4,35х3,8 см, т.е. отмечена регрессия опухоли > чем на 50%.

Технико-экономическая эффективность "Способа лечения рака яичников" заключается в том, что использование в способе сочетания аутолимфохимиотерапии и ЛАК-терапии на лимфе в предоперационном периоде и на этапах лечения распространенных форм рака яичников позволяет улучшить непосредственное состояние больных, уменьшить степень распространенности опухолевого процесса, количества метастазов, размеры резицируемой опухоли. Степень регрессии опухоли достигает 50%, что позволяет переводить больных из неоперабельного в операбельное состояние. Генерация ЛАК на основе лимфоцитов лимфы грудного протока позволяет получить значительное количество лимфоцитов без процедуры многократного цитофореза и обойтись одним курсом ЛАК-терапии вместо 3-4-х, принятых при генерации ЛАК из клеток крови, способствует максимальной элиминации опухолевых клеток, оказывая противоопухолевое воздействие, как при неоадъювантной химиотерапии второй-третьей линии.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогинекологии, и может быть использовано для лечения рака яичников. Предложено больным раком яичников III-IV стадий в предоперационном периоде и/или на этапах противоопухолевого лечения проводить забор центральной лимфы в объеме 1000-2000 мл, делить лимфу на 2 равные порции, одну часть лимфы инкубировать в течение 30-60 мин с цитостатиками в дозах: циклофосфан 500 мг/м², адриабластин 40 мг/м², цисплатин 100 мг/м² и вводить больной внутривенно, капельно в тот же день на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии, другую порцию лимфы инкубируют с 2 млн. ME ронколейкина в течение 24 ч, при температуре 37^oС, в полной питательной среде, отмывают от среды и вводят больной внутривенно, капельно на второй день после химиотерапии. Способ позволяет уменьшить степень распространенности опухолевого процесса, количество метастазов, размеры резицируемой опухоли. 2 табл.

Способ лечения рака яичников, включающий противоопухолевое воздействие, иммунотерапию и операцию, отличающийся тем, что больным раком яичников III-IV стадией в предоперационном периоде и/или на этапах противоопухолевого лечения проводят забор центральной лимфы в объеме 1000-2000 мл, делят лимфу на 2 равные порции, одну часть лимфы инкубируют в течение 30-60 мин с цитостатиками в дозах: циклофосфан 500 мг/м², адриабластин 40 мг/м², цисплатин 10О мг/м² и вводят больной внутривенно, капельно в тот же день на фоне гипергидратации, форсированного диуреза, антиэметической терапии, другую порцию лимфы инкубируют с 2 млн. ME ронколейкина в течение 24 ч, при температуре 37^oС, в полной питательной среде, отмывают от среды и вводят больной внутривенно, капельно на второй день после химиотерапии.