АНАЛОГИ ГОРМОНА ПАРАЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Российский патент 2003 года по МПК C07K14/635 A61K38/29 A61P19/10 

Данная заявка является составной частью заявки на патент США 08/779768, поданной 7 января 1997 года, которая в настоящее время находится на стадии ожидания решения.

Предпосылки изобретения
Паращитовидный гормон (РТН) является полипептидом, вырабатываемым паращитовидными железами. Зрелая циркулирующая форма данного гормона состоит из 84 аминокислотных остатков. Биологическая активность РТН может быть воспроизведена пептидным фрагментом, включающим N-концевую часть (например, аминокислотные остатки 1-34). Белок, родственный паращитовидному гормону (обозначаемый "PTHrP") - это белок, состоящий из 139-173 аминокислот, по N-концевой части гомологичный РТН. РТНrР проявляет многие общие с РТН биологические функции, включая связывание на общем рецепторе PTH/PTHrP (Tregear et al. , 1983, Endocrinology, 93, 1349). Были описаны пептиды РТН, происходящие от большого числа организмов, например, человека, быка, крысы, домашней курицы (Nissenson et al., 1993, Receptor, 3: 993).

Для РТН была продемонстрирована активность по улучшению и массы, и качества костей (Dempster et al., 1993, Endocrine Rev., 14: 690; Riggs, 1991, Amer. J. Med., 91 [suppl. 5B]: 37S). Был продемонстрирован анаболический эффект перемежающегося введения РТН у мужчин и женщин с диагнозом остеопороза как при наличии, так и при отсутствии конкурирующего противорезорбционного лечения (Slovik et al. , 1986, J. Bone Miner, Res., 1: 377; Reeve et al., 1990, Brit. Med. J., 301: 314; Hesch et al., 1989, Calcif. Tissue Intern., 44: 176).

Резюме изобретения (см. в конце описания).

За исключением N-концевой аминокислоты, все сокращенные обозначения (например, А1а или A₁) аминокислот в настоящем изобретении соответствуют структуре -NH-CH(R)-СО-, при том, что R - это боковая цепь аминокислоты (например, СН₃ для аланина). Для N-концевой аминокислоты сокращение обозначает структуру ==N-CH(R)-СО-, при том, что R - это боковая цепь аминокислоты. Сокращения β-Nal, Nle, Dap, Cha, Nva, Amp, Pal, Ahc и Aib обозначают следующие α-аминокислоты: β-(2-нафтил)аланин, норлейцин, α,β-диаминопропионовая кислота, циклогексилаланин, норвалин, 4-аминофенилаланин, β-(3-пиридинил)аланин, 1-амино-1-циклогексанкарбоновая кислота и α-аминоизобутановая кислота, соответственно. Под аббревиатурой Асс понимается аминокислота, выбираемая из группы, которая включает 1-амино-1-циклопропанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклобутанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклопентанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклогексанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклогептанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклооктанкарбоновую кислоту и 1-амино-1-циклононанкарбоновую кислоту. В приведенной выше формуле гидроксиалкил, гидроксифенилалкил и гидроксинафтилалкил могут включать от 1 до 4 гидроксикомпонентов. Также COE₁ обозначает -C=О-E₁. Примеры -C=О-E₁ включают ацетил и фенилпропионил, но не ограничиваются ими.

Пептид по настоящему изобретению обозначается в данном тексте также и в другом формате, например, [Ahc^7,11] hPTH (1-34)NH₂, при том, что замещенные аминокислоты из естественной последовательности обозначены в квадратных скобках (например, Ahc⁷ вместо Leu⁷ и Ahc¹¹ вместо Leu¹¹ в составе hPTH). Сокращение hPTH обозначает РТН человека, hPTHrP обозначает РТНrР человека, rРТН обозначает РТН крысы и bРТН обозначает РТН быка. Цифры в круглых скобках обозначают число аминокислот, входящих в состав данного пептида: например, hPTH(1-34) ообозначает аминокислоты от 1-й до 34-й в последовательности пептида РТН человека. Последовательности hPTH(1-34), hPTHrP(1-34), bРТН(1-34) и rРТН(1-34) приведены у Nissenson et al., 1993, Receptor, 3: 1993. Обозначение "NH₂" в формуле РТН(1-34)NH₂ определяет то, что С-конец данного пептида амидирован. С другой стороны, РТН(1-34) обозначает наличие на С-конце свободной аминокислоты.

Каждый из пептидов по настоящему изобретению способен стимулировать рост костей у подопытного субъекта (т.е. у млекопитающего, например, у человека-пациента). Таким образом, они применимы для лечения остеопороза и ломкости костей при введении отдельно или наряду с проведением антирезорбционного лечения, например, с применением бифосфонатов и кальцитонина.

Пептиды по настоящему изобретению могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемых солей. Примеры таких солей включают, при этом данным перечнем не ограничиваясь, те соли, которые образуют органические кислоты (например, уксусная, молочная, малеиновая, лимонная, яблочная, аскорбиновая, янтарная, бензойная, метансульфоновая, толуолсульфоновая или памоевая кислоты), неорганические кислоты (соляная кислота, серная кислота или фосфорная кислота) или полимерные кислоты (например, танниновая кислота, карбоксиметилцеллюлозная, полиактовая, полигликолевая или сополимеры полиактогликолевых кислот).

Терапевтически эффективное количество пептида по настоящему изобретению и фармацевтически пригодный носитель (например, карбонат магния, лактоза или фосфолипид, с которым лекарственное соединение может образовывать мицеллу) вместе образуют терапевтическую композицию (например, пилюлю, таблетку, капсулу или жидкий препарат) для введения (например, перорально, внутривенно, трансдермально, через легкие, вагинально, подкожно, назально, с помощью лекарственного электрофореза или внутритрахейно) пациенту. Пилюля, таблетка или капсула, предназначенная для перорального введения, может быть покрыта веществом, защищающим активное начало композиции от действия желудочной кислоты или кишечных ферментов в желудке в течение времени, достаточного для перемещения в нерасщепленном виде из желудка в тонкий кишечник. Терапевтическая композиция также может быть в биодеградируемой или небиодеградируемой форме, предназначенной для постепенного выделения препарата, вводимого подкожно или внутримышечно. См., например, патенты США 3773919 и 4767628 и заявку РСТ WO 94/15587. Непрерывное введение также может быть обеспечено путем использования имплантируемого или внешнего насоса (например, насоса INFUSAID^ТМ). Введение также может осуществляться прерывисто, например, путем инъекций раз в день или непрерывно низшими дозами, например, в виде композиции с отсроченным выделением.

Доза пептида по настоящему изобретению для лечения перечисленных выше заболеваний или расстройств варьируется в зависимости от способа введения, возраста и веса тела пациента и от состояния подвергаемого лечению пациента и в конечном счете выбирается по решению лечащего врача или ветеринара.

Также в объеме настоящего изобретения представляется пептид, описываемый вышеприведенной генетической формулой, предназначенный для использования в лечении заболеваний, связанных с дефицитом роста костей или подобного, например, при остеопорозе и ломкости костей.

Другие параметры и достоинства настоящего изобретения будут ясны из подробного описания и из формулы изобретения.

Подробное описание изобретения
Основываясь на приведенном здесь описании, настоящее изобретение может быть использовано в полном своем объеме. Следующие специфические примеры приведены как исключительно иллюстративные и не органичивающие остальные аспекты изобретения в любом направлении его использования. Далее все цитируемые в данном тексте публикации включены в виде библиографических ссылок.

Структура
Для РТН(1-34) и РТНrР(1-34) было описано наличие двух амфофильных α-спиральных доменов: см., например, Barden et al. (1992), Biochemistry, 32; 7126. Первая α-спираль образуется между аминокислотными остатками 4 и 13, в то время как вторая α-спираль образуется на участке между аминокислотами 21 и 29. Некоторые пептиды по настоящему изобретению включают замены одного или большего числа аминокислотных остатков на Асс в пределах этих сегментов РТН(1-34) и РТНrР(1-34) или рядом с ними, например, Ahc⁷ и Ahc¹¹ в пределах первой α-спирали или Ahc²⁷ и Ahc²⁸ в пределах второй α-спирали.

Синтез
Пептиды по настоящему изобретению могут быть получены с помощью стандартного синтеза в твердой фазе: см., например, Stewart et al., 1984, Solid Phase Synthesis (Pierce Chemical Co., 2d ed.). Далее следует описание того, как был получен пептид [Glu^22,25, Leu^23,28, Lys^26,30, Aib²⁹, Ahc³¹] hPTH (1-34) NH₂. Другие пептиды по настоящему изобретению могут быть получены аналогичным путем рядовым специалистом в данной области техники.

1-[N-трет-бутоксикарбониламино]-1-циклогексанкарбоновая кислота (Вос-Аhс-ОН) была синтезирована следующим образом:
19,1 г (0,133 моль) 1-амино-1-циклогексанкарбоновой кислоты (Acros Organics, Fisher Scientific, Питтсбург, Пенсильвания, США) растворяли в 200 мл диоксана и 100 мл воды. К ним добавляли 67 мг 2N NaOH. Раствор охлаждали на бане с ледяной водой. 32,0 г (0,147 моль) ди-трет-бутилдикарбоната добавляли к этому раствору. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем удаляли диоксан при пониженном давлении. К оставшемуся водному раствору добавляли 200 мл этилацетата. Смесь охлаждали на бане с ледяной водой. Значение рН водного слоя доводили примерно до 3 путем добавления 4N НС1. Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (1х100 мл). Объединяли два органических слоя и промывали водой (2х150 мл), высушивали с использованием безводного МgSO₄, отфильтровывали и концентрировали досуха в условиях пониженного давления. Остаток перекристаллизовали из смеси этилацетата и гексана. Было получено 9,2 г чистого продукта, выход составил 29%. Другие защищенные аминокислоты Асс могут быть получены аналогичным способом рядовым специалистом в данной области техники.

Пептид был синтезирован с использованием пептидного синтезатора Applied Biosystems (Foster City, CA), модель 430А, который был модифицирован для условий ускоренного Вос-химического твердофазного синтеза пептидов: см. Schnoize et al., 1992, Int. J. Peptide Protein Res., 90: 180. Использовали 4-метилбензгидриламиновую смолу (МВНА) (Peninsula, Belmont, CA) с замещением 0,93 ммоль/г. Вос-аминокислоты (Bachem, Torrance, CA; Nova Biochem., La Jolla, CA) были использованы со следующей защитой боковых цепей: Boc-Ala-OH, Boc-Arg(Tos)-OH, Boc-Asp (OcHex) -ОН, Вос-Glu(OcHex)-OH, Boc-His(DNP)-OH, Boc-Val-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Gly-OH, Boc-Gln-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Lys(2C1Z)-OH, Boc-Ahc-OH, Boc-Thr(Bzl)-OH, Boc-Ser(Bzl)-OH и Boc-Aib-OH. Синтез осуществляли в масштабе 0,14 ммоль. Группы Вос удаляли с помощью обработки 100%-ной TFA дважды по 1 минуте. Вос-аминокислоты (2,5 ммоль) были предварительно активированы HBTU (2,0 ммоль) и DIEA (1,0 мл) в 4 мл DMF и объединялись без предварительной нейтрализации пептидно-смоляной TFA-соли. Время соединения составляло 5 минут, за исключением Boc-Aib-OH и ее следующего остатка Boc-Leu-OH, а также Вос-Аhс-ОН и ее следующего остатка Boc-Lys(2Clz)-ОН, при том, что время соединения для этих четырех остатков составляло 2 часа.

По окончании сборки пептидной цепи смолу обрабатывали раствором 20% меркаптоэтанола и 10% DIEA в DMF в течение 2х30 минут с целью удаления группы DNP в боковой цепи гистидина. Затем N-концевую группу Вос удаляли путем обработки 100%-ной TFA в течение 2х2 минуты. Частично освобожденная от защиты смесь пептида и смолы промывали с использованием DMF и DCM и высушивали в условиях пониженного давления. Окончательное расщепление выполняли путем перемешивания пептида-смолы в 10 мл HF, содержащей 1 мл анизола и 24 мг дитиотреитола при 0^oС в течение 75 минут. HF удаляли потоком азота. Остаток промывали эфиром (6х10 мл) и экстрагировали 4N НОАс (6х10 мл).

Смесь пептидов в водном экстракте очищали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (ВЭЖХ) с использованием обратно-фазной колонки Vydac^TM C₁₈ (Nest Group, Southborough, MA). Колонку элюировали в линейном градиенте (10-45% раствора В в течение более 130 минут) при скорости потока 10 мл/мин (раствор А - 0,1%-ная водная TFA; раствор В - ацетонитрил, содержащий 0,1% TFA). Фракции отбирали и тестировали методом аналитической ВЭЖХ. Те фракции, которые содержали чистый продукт, объединяли и лиофилизировали до высыхания. Было получено 85 мг белого твердого вещества. По данным аналитической ВЭЖХ чистота продукта превысила 99%. Анализ на масс-спектрометре с электрораспылением позволил определить молекулярную массу 3972,4 (что соответствует расчетной молекулярной массе 3972,7).

Синтез и очистка [Cha²², Leu^23,28,31, Glu²⁵, Lys^26,30, Ahc²⁷, Aib²⁹] hPTHrP(1-34)NH₂ были проведены тем же способом, что и описанный выше синтез пептида [Glu^22,25, Leu^23,28, Lys^26,30, Aib²⁹, Ahc³¹]hPTHrP(1-34)NH₂. Защищенная аминокислота Boc-Cha-OH была закуплена у Bachem (СА). Чистота конечного продукта превысила 99%, по данным масс-спектрометрии с электронным распылением молекулярная масса составила 3997,2 (расчетная молекулярная масса составляет 3996,8).

Полные названия соединений, упомянутых выше в виде сокращений, следующие: Вос - трет-бутилоксикарбонил, HF - фтористоводородная кислота, Fm - формил, Хал - ксантил, Bzl - бензил, Tos - тозил, DNP - 2,4-динитрофенил, DMF - диметилформамид, DCM - дихлорметан, HBTU - 2-(1H-бензтриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметил-уроний -гексафторфосфат, DIEA - диизопропилэтиламин, НОАс - уксусная кислота, TFA - трифторуксусная кислота, 2Clz - 2-хлорбензил-оксикарбонил и OcHex - О-циклогексил.

Радикалы R₁ и R₂ в приведенной выше общей формуле могут быть присоединены к свободному амину N-концевой аминокислоты с использованием стандартных методов, известных в данной области техники. Например, алкильные группы, такие как C_1-12-алкил, могут быть присоединены с использованием реакции алкилирования. Гидроксиалкильные группы, например, C_1-12-гидроксиалкил, также могут быть присоединены с применением восстановительного алкилирования, при том, что свободная гидроксильная группа защищена трет-бутиловым эфиром. Ацильные группы, например, COE₁, могут быть присоединены путем присоединения свободной кислоты, например, E₁COOH, к свободному амину N-концевой аминокислоты путем смешения полной смолы с тремя молярными эквивалентами свободной кислоты и диизопропилкарбодиимида в метиленхлориде на 1 час и включения полученной смолы в этапы (a)-(f) описанной выше программы промывки. Если свободная кислота включает свободную гидроксильную группу, например, п-гидроксифенилпропионовая кислота, то соединение должно быть проведено с дополнительным добавлением 3 молярных эквивалентов НОВТ.

Другие пептиды по настоящему изобретению могут быть получены аналогичным способом рядовым специалистом в данной области техники.

Функциональные тесты
А. Связывание на рецепторе РТН
Пептиды по настоящему изобретению были протестированы по их способности связываться рецепторами РТН, имеющимися на остеосаркомных клетках SaOS-2 человека. Клетки SaOS-2 (Американская коллекция типовых культур, Роквилль, Мэриленд: АТСС НТВ-85) поддерживали в среде RPMI-1640 (Sigma, St. Louis, МО) с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS) и 2 мМ глутамина при 37^oС во влажной атмосфере при содержании 5% СO₂ в воздухе. Культуральную среду заменяли каждые три-четыре дня, а клетки пересевали каждую неделю с использованием обработки трипсином.

Клетки SaOS-2 поддерживали в течение четырех дней до того момента, когда они достигали стадии слияния. Культуральную среду замещали средой RPMT-1640 с добавлением 5% FBS и инкубировали в течение 2 часов при комнатной температуре с 10х10⁴ спМ моно-¹²⁵I-[Nie^8,18, Туr³⁴ (3-¹²⁵I)] bРТН (1-34) NH₂ в присутствии конкурирующего пептида по настоящему изобретению при различных его концентрациях в диапазоне от 10^-11 М до 10^-4 М. Клетки промывали четырежды охлажденным на льду фосфатным буфером и лизировали 0,1 М NaOH, а радиоктивность, связанную с данными клетками, определяли с помощью сцинтилляционного счетчика. Синтез моно-¹²⁵I- [Nle^8,18, Туг³⁴ (3-¹²⁵I)] bРТН (1-34) NH₂ был осуществлен так, как это было описано у Goldman et al., 1988, Endoсrinology, 123: 1468.

Тест на связывание был осуществлен с различными пептидами по настоящему изобртенеию, и для каждого пептида был определен показатель Kd (50% максимального подавления связывания моно-¹²⁵I- [Nle^8,18, Туг³⁴ (3-¹²⁵I)] bРТН (1-34) NH₂).

Как показано в табл. 1, все тестированные пептиды обладали высокой аффинностью связывания на рецепторе РТН клеток SaOS-2.

В. Стимуляция активности аденилатциклазы
Была измерена способность пептидов по настоящему изобретению индуцировать биологический ответ в клетках SaOS-2. Более подробно, любую стимуляцию аденилатциклазной активности определяли путем измерения интенсивности синтеза цАМФ (аденозин-3',5'-монофосфата), так, как это ранее было описано у Rodan et al., 1983, J. Clin. Invest., 72: 1511 и у Goldman et al., 1988, Endocrinology, 123, 1468. Слившиеся клетки SaOS-2 на 24-луночных планшетах инкубировали с ³H-аденином, 0,5 микрокюри (26,9 Kи/ммоль, New England Nuclear, Boston, MA), в свежей культуральной среде при 37^oС в течение 2 часов и дважды промывали сбалансированным солевым раствором Хенкса (Gibco, Gaithersburg, MD). Клетки обрабатывали 1 мМ изобутилметилксантином (IBMX; Sigma, St. Louis, МО) в свежей культуральной среде в течение 15 минут, а пептиды по настоящему изобретению добавляли в эту среду для 5-минутной инкубации. Реакцию останавливали путем добавления 1,2 М трихлоруксусной кислоты (ТСА) (Sigma, St. Louis, МО) с последующей нейтрализацией пробы 4N едкого кали. цАМФ выделяли с использованием метода двухколоночной хроматографии (Salmon et al., 1974, Anal. Biochem., 58, 541). Радиоактивность определяли с помощью сцинтилляционного счетчика (жидкостный сцинтилляционный счетчик 2200СА, PACKARD, Downers Grove, IL).

Соответствующие значения EC₅₀ (50% максимального уровня стимуляции аденилатциклазной активности) были определены для тестированных пептидов: они показаны в табл. 1. Для всех тестированных пептидов продемонстрирован потенциал по стимуляции аденилатциклазной активности, которая соответствует биохимическому пути, индикаторному по проксимальному сигналу пролиферации остеобластов (т.е. роста костей).

Другие варианты
Должно быть понятно, что, хотя изобретение описано в связи с конкретными подробностями, такие описания предназначены для иллюстрирования изобретения и при этом никак не ограничивают объем изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации включены в формулу изобретения.

Результаты приведены в табл. А, В, С.

Изобретение относится к пептиду формулы (R₁)(R₂)A₁ - Val - A₃ - Glu - A₅ - Gln - A₇ - A₈ - His - Asn - A₁₁ - A₁₂ - Lys - His - A₁₅ - A₁₆ - A₁₇ - A₁₈ - A₁₉ - Arg -A₂₁ - A₂₂ - A₂₃ - A₂₄ - Arg - Lys - A₂₇ - A₂₈ - A₂₉ - A₃₀ - A₃₁ - A₃₂ - A₃₃ - A₃₄ - R₃, где A₁ - это Ser; A₃ - это Ser или Aib; A₅ - это Ile; A₇ - это Leu или Сha; A₈ - это Мet или Nle; A₁₁ - это Leu или Cha; A₁₂ - это Gly или Aib; A₁₅ - это Leu или Cha; A₁₆ - это Asn или Aib; A₁₇ - это Ser или Aib; A₁₈ - это Met, Nle или Aсс; A₁₉ - это Glu или Aib; A₂₁ - это Val; A₂₂ это Aсс, Glu или Сha; A₂₃ - это Тrp, Aсс, Cha или Leu; A₂₄ - это Leu, Acc или Cha; A₂₇ - это Lys, Leu, hArg, Aсс или Cha; A₂₈ - это Leu, Aсс или Cha; A₂₉ - это Glu, Gln или Aib; A₃₀ - это Asp, Lys, Nle или Aсс; A₃₁ - это Val, Leu, Nle, Aсс или Сha; A₃₂ - это His; A₃₃ - это Asn; A₃₄ - это Phe, Tyr или Aib; каждый из радикалов R₁ и R₂, независимо друг от друга, - Н; и R₃ - NH₂, при условии, что по крайней мере одна из аминокислот A₅, A₇, А₈, А₁₁, А₁₂, А₁₅, А₁₈, А₂₁, А₂₂, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈, А₂₉ и А₃₁ есть Aсс, или его фармацевтически приемлемой соли, которые являются аналогами гормона паращитовидной железы. Соединения обладают высокой степенью связывания рецепторами РТН и стимулируют активность аденилатциклазы. 3 с. и 12 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Пептид по формуле (I)

где А₁ - это Ser;
А₃ - это Ser или Aib;
А₅ - это Ile;
А₇ - это Leu или Сha;
А₈ - это Мet или Nle;
А₁₁ - это Leu или Cha;
А₁₂ - это Gly или Aib;
А₁₅ - это Leu или Cha;
А₁₆ - это Аsn или Аib;
А₁₇ - это Ser или Aib;
А₁₈ - это Met, Nle или Асс;
А₁₉ - это Glu или Aib;
А₂₁ - это Val;
А₂₂ - это Асс, Glu или Сha;
А₂₃ - это Тrp, Асс, Cha или Leu;
А₂₄ - это Leu, Acc, или Cha;
А₂₇ - это Lys, Leu, hArg, Асс или Cha;
А₂₈ - это Leu, Асс или Cha;
А₂₉ - это Glu, Gln или Aib;
А₃₀ - это Аsp, Lys, Nle или Асс;
А₃₁ - это Val, Leu, Nle, Асс или Сha;
А₃₂ - это His;
А₃₃ - это Asn;
А₃₄ - это Phe, Tyr или Aib;
каждый из радикалов R₁ и R₂, независимо друг от друга, -Н;
R₃ - NH₂,
при условии, что по крайней мере одна из аминокислот А₅, А₇, А₈, А₁₁, А₁₂, А₁₅, А₁₈, А₂₁, А₂₂, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈, А₂₉ и А₃₁ есть Асс,
или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Пептид по п.1 при том, что А₃ - это Ser; А₅ - это Ile; А₇ - это Leu или Сha; А₈ - это Met или Nle; А₁₁ - это Leu или Cha; А₁₂ - это Gly; А₁₅ - это Leu или Сha; А₁₆ - это Asn или Aib; А₁₇ - это Ser; А₁₈ - это Асс, Met или Nle; А₂₁ - это Val; А₂₇ - это Lys, hArg, Асс или Cha; А₂₉ - это Аib; А₃₁ - это Val, Leu, Nle, Асс или Сha; А₃₂ - это His; А₃₃ - это Asn; А₃₄ - это Phe, Tyr или Aib; каждый из радикалов R₁ и R₂, независимо друг от друга, -Н; R₃ - NH₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 3. Пептид по п.2 при том, что А₅ - это Ile; А₇ - это Leu или Сha; А₈ - это Мet или Nle; А₁₁ - это Leu или Cha; А₁₂ - это Gly; А₁₅ - это Leu или Cha; А₁₈ - это Met или Аhc; А₂₁ - это Val; А₂₂ - это Glu или Ahc; А₂₃ - это Trp, Аhc или Сha; А₂₄ - это Leu, Аhc или Cha; А₂₇ - это Lys, hArg, Аhc или Cha; А₂₈ - это Leu, Ahc или Cha; А₂₉ - это Aib; А₃₁ - это Val, Leu, Nle, Ahc или Cha; R₁ - Н; R₂ - Н; R₃ - NH₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 4. Пептид по п.3 при том, что по крайней мере одна из аминокислот А₇, А₁₁, А₁₅, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ или А₃₁ - это Cha. 5. Пептид по п.3 при том, что по крайней мере одна из аминокислот А₁₆, А₁₇, А₁₉, А₂₉ или А₃₄ - это Aib. 6. Пептид по п.1 при том, что упомянутый пептид - это [Аhc²³]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁴] hPTH (1-34)NH₂; [Nle^8,18, Ahc²⁷]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁸]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc³¹] hPTH (1-34)NH₂; NH₂; [Аhc^24,28,31] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^24,28,31, Lys³⁰] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^28:31]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^24,27, Aib²⁹, Lys³⁰]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^24,27, Aib²⁹, Lys³⁰, Leu³¹]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁷] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^24,27]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^24,27, Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁴, Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁷, Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc¹⁸] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc^18,27, Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂; или [Аhc^18,24,27, Aib²⁹] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²², Leu²⁷, Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²⁴, Leu²⁷, Aib²⁹] hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²²]hPTH (1-34)NH₂; [Аhc²², Aib²⁹]hPTH (1-34)NH₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 7. Пептид по формуле (II)

при том, что А₁ - это Ala или Ser;
А₃ - это Ser или Aib;
А₅ - это His;
А₇ - это Leu или Сha;
А₈ - это Leu;
А₁₀ - это Аsp;
А₁₁ - это Lys или Cha;
А₁₂ - это Gly или Aib;
А₁₄ - это Ser;
А₁₅ - это Ile или Cha;
А₁₆ - это Gln или Аib;
А₁₇ - это Asp или Aib;
А₁₈ - это Leu или Асс;
А₁₉ - это Arg или Aib;
А₂₂ - это Phe, Glu, Асс или Сha;
А₂₃ - это Phe, Leu, Асс или Сha;
А₂₄ - это Leu, Acc или Cha;
А₂₅ - это His, Lys, Aib или Glu;
А₂₆ - это His или Lys;
А₂₇ - это Leu, Lys, Асс или Cha;
А₂₈ - это Ile, Leu, Асс или Cha;
А₂₉ - это Ala, Glu или Aib;
А₃₀ - это Glu, Nle, Асс или Lys;
А₃₁ - это Ile, Leu, Cha или Асс;
А₃₂ - это His;
А₃₃ - это Thr;
А₃₄ - это Ala;
каждый из радикалов R₁ и R₂, независимо друг от друга, -Н;
R₃ - NH₂;
при условии, что по крайней мере одна из аминокислот А₁₈, А₂₂, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈, А₃₀ и А₃₁ - это Асс,
или его фармацевтически приемлемая соль. 8. Пептид по п.7 при том, что А₁ - это Ala; А₃ - это Ser; А₅ - это His; А₇ - это Leu; А₈ - это Leu; А₁₀ - это Asp; А₁₁ - это Lys; А₁₂ - это Gly; А₁₄ - это Ser; А₁₅ - это Ile; А₁₆ - это Gln; А₁₇ - это Asp; А₁₈ - это Leu или Асс; А₁₉ - это Arg, или его фармацевтически приемлемая соль. 9. Пептид по п.8 при том, что А₂₂ - это Glu, Асс или Cha; А₂₃ - это Leu, Асс или Сha; А₂₄ - это Leu, Асс или Сha; А₂₅ - это Aib, Lys или Glu; А₂₆ - это Lys; А₂₇ - это Leu, Асс или Cha; А₂₈ - это Ile, Leu, Асс или Cha; А₃₁ - это Leu, Ile, Сha или Асс; А₃₂ - это His; А₃₃ - это Thr; А₃₄ - это Ala, или его фармацевтически приемлемая соль. 10. Соединение по п.9 при том, что А₅ - это His; А₇ - это Leu; А₈ - это Leu; А₁₁ - это Lys; А₁₂ - это Gly; А₁₅ - это Ile; А₁₈ - это Leu, или его фармацевтически приемлемая соль. 11. Пептид по п.10 при том, что А₂₂ - это Glu, Ahc или Cha; А₂₃ - это Leu, Ahc или Cha; А₂₄ - это Leu, Ahc или Cha; А₂₇ - это Leu, Ahc или Cha; А₂₈ - это Ile, Leu, Ahc или Cha; А₂₉ - это Ala, Ahc или Glu; А₃₀ - Nle, Glu, Ahc или Lys, или А₃₁ - это Leu, Ile, Cha или Ahc, или его фармацевтически приемлемая соль. 12. Пептид по п.11 при том, что по крайней мере одна из аминокислот А₂₂, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ или А₃₁ - это Cha. 13. Пептид по п.11 при том, что по крайней мере одна из аминокислот А₂₅ или А₂₉ - это Aib. 14. Пептид по п. 7 при том, что упомянутый пептид - это [Glu^22,25, Leu^23,28, Lys^26,30, Aib²⁹, Ahc³¹] hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,25, Ahc²³, Lys^26,30, Leu^28,31, Aib²⁹]hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Lys^26,30, Ahc²⁷, Aib²⁹] hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,25,29, Leu^23,28,31, Lys²⁶, Ahc³⁰] hPTHrP(1-34)NH₂; [Gha²², Leu^23,28,31, Glu²⁵, Lys^26,30, Ahc²⁷, Aib²⁹] hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Ahc²⁴, Lys^26,30, Aib²⁹ ]hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,29, Leu^23,28,31, Aib²⁵, Lys^26,30, Ahc²⁷]hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu²², Leu^23,28,31, Aib^25,29, Lys^26,30, Ahc²⁷] hPTHrP(1-34)NH₂; [Ahc²², Leu^23,28,31, Glu²⁵, Lys^26,30, Aib²⁹]hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu^22,25, Leu^23,31, Lys^26,30, Ahc²⁸, Aib²⁹] hPTHrP(1-34)NH₂; [Gha²², Ahc²³, Glu²⁵, Lys^26,30, Leu^28,31, Aib²⁹] hPTHrP(1-34)NH₂; [Glu²², Leu^23,28,31, Ahc^24,27, Lys^25,26 Aib²⁹]hPTHrP(1-34)NH₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 15. Пептид формулы [Cha^7,11,15] hPTHrP(1-34)NH₂ или Leu²⁷, Aib²⁹]hPTH (1-34) NH₂, или его фармацевтически приемлемая соль.

Приоритет по пунктам:
07.01.1997 по пп.1-15;
07.03.1997 по пп.1-15 (уточнение радикалов).