ПЕПТИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ СРОДСТВОМ К РЕЦЕПТОРУ ПАРАТГОРМОНА (РТН) И СТИМУЛИРУЮЩИЕ АКТИВНОСТЬ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ Российский патент 2000 года по МПК A61K38/29 C07K14/635 

Паратиреоидный гормон (ПТГ) представляет собой полипептид, вырабатываемый паращитовидными железами. Зрелая циркулирующая форма гормона включает 84 аминокислотных остатка. Биологическое действие ПТГ может воспроизводиться пептидным фрагментом его N-концевых групп (например, аминокислотными остатками 1-34). Родственный паратиреоидному гормону протеин (ПТГрП) содержит 139 - 179 аминокислотных групп, обладающих N-концевой гомологичностью к ПТГ. Биологическая эффективность ПТГ обусловлена ПТГрП, в том числе связыванием с общим рецептором ПТГ/ПТГрП [Tregear et al. Endocrinol., 93, 1349, (1983)]. Осуществлена характеристика ПТГ пептидов различных особей, например человека, коров, крыс, цыплят [Nissenson et al., Receptor, 3, 193, (1993)].

ПТГ вызывает как нарастание костной массы, так и улучшение ее качества [Dempster et al. Endocrine Rev., 14, 690, (1993); Riggs, Amer. J. Med., 91 (Suppl. 5В.): 37S (1991)]. Анаболический эффект у мужчин и женщин с заболеванием остеопорозом отмечается при периодическом приеме ПТГ независимо от того, получают ли они или нет одновременно антирезорпционную терапию [Slovic et al., J. Bone Miner. Res., 1, 377 (1986); Reeve et al., Br. Med. J., 301, 314 (1990); и Hesch R. D. et al., Calcif. Tissue Int'l, 44, 176 (1989)].

В соответствии с одним из аспектов изобретения оно относится к разновидностям пептидов ПТГ (1-34) общей формулы:

где A₁ означает Ser, Ala или Dap;
A₃ означает Ser, Thr или Aib;
A₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или napa-X-Phe,
где X, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
A₇ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe,
где X, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
A₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Cha или Nle;
A₁₁ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe,
где X, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
A₁₂ означает Gly или Aib;
A₁₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe,
где X, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
A₁₆ означает Ser, Asn, Ala или Aib;
A₁₇ означает Ser, Thr или Aib;
A₁₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Nle, Cha или Aib;
A₁₉ означает Glu или Aib;
A₂₁ означает Val, Cha или Met;
A₂₃ означает Trp или Cha;
A₂₄ означает Leu или Cha;
A₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg, Gln или Cha;
A₂₈ означает Leu или Cha;
A₃₀ означает Asp или Lys;
A₃₁ означает Val, Nle, Cha или дилетирован;
A₃₂ означает His или дилетирован;
A₃₃ означает Asn или дилетирован;
A₃₄ означает Phe, Туг, Amp, Aib или дилетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означают водород, C(1-12)алкил, C(2-12)алкенил, C(7-20)фенилалкил, C(11-20)нафтилалкил, C(1-12)гидроксиалкил, C(2-12)гидроксиалкенил, C(7-20)гидроксифенилалкил или C(11-20)гидроксинафтилалкил; или один и только один из R₁ и R₂ представляет собой группу COE₁, где E₁ означает C(1-12)алкил, C(2-12)алкенил, C(7-20)фенилалкил, C(11-20)нафтилалкил, C(1-12)гидроксиалкил, C(2-12)гидроксиалкенил, C(7-20)гидроксифенилалкил или C(11-20)гидроксинафтилалкил; и
R₃ означает гидроксил, амино-, C(1-12) алкокси- или -NH-Y-CH₂-Z группу, где Y в свою очередь означает C(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил, карбоксил или CONH₂;
при условии, что (i) по крайней мере одна из A₅, A₇, A₈, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₁, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉ и A₃₄ означает Aib; или (ii) по крайней мере A₁ означает Dap, A₇ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe, A₁₅ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe, A₂₇ означает hArg или A₃₁ означает Nle; или их фармацевтически приемлемой соли.

Подгруппа соединений, охватываемых указанной выше формулой, включает те, у которых по крайней мере одна из A₅, A₇, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₁, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha. Например, A₃ означает Ser, A₅ означает Ile, A₇ означает Leu или Cha; A₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; A₁₁ означает Leu или Cha; A₁₂ означает Gly; A₁₅ означает Leu или Cha; A₁₆ означает Asn или Aib; A₁₇ означает Ser; A₁₈ означает Met или Nle; A₂₁ означает Val; A₂₇ означает Lys, hArg или Cha; A₃₁ означает Val, Nle или Cha; A₃₂ означает His; A₃₃ означает Asn: A₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; и R₃ означает аминогруппу;
при условии, что по крайней мере одна из A₅, A₇, A₈, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₁, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉ и A₃₄ означает Aib. При необходимости, по крайней мере, одна из A₇ и A₁₁ может быть Cha; или по крайней мере одна из A₁₅, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha.

В другой подгруппе соединений по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉ и A₃₄ означает Aib. Например, A₃ означает Ser или Aib; A₅ означает Ile; A₇ означает Leu или Cha; A₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; A₁₁ означает Leu или Cha; A₁₅ означает Leu или Cha; A₁₆ означает Asn или Aib: A₁₈ означает Met, Aib или Nle; A₂₁ означает Val; A₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; A₃₁ означает Val, Nle или Cha; A₃₂ означает His; A₃₃ означает Asn; A₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; и R₃ означает аминогруппу; при условии, что по крайней мере одна из A₅, A₇, A₈, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₁, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉ и A₃₄ означает Aib. Если необходимо, по крайней мере одна из A₇ и A₁₁ может быть Cha; или по крайней мере одна из A₁₅, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha.

В еще одной подгруппе соединений по крайней мере одна из A₅, A₇, A₈, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₁, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ и A₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉ и A₃₄ означает Aib. Например, A₃ означает Ser или Aib; A₅ означает Ile; A₇ означает Leu или Cha; A₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; A₁₁ означает Leu или Cha; A₁₅ означает Leu или Cha; A₁₆ означает Asn или Aib; A₁₈ означает Met, Aib или Nle; A₂₁ означает Val; A₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; A₃₁ означает Val, Nle или Cha; A₃₂ означает His; A₃₃ означает Asn; A₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; и R₃ означает аминогруппу. При необходимости, по крайней мере одна из A₇ и A₁₁ означает Cha, и по крайней мере одна из A₁₆, A₁₉ и A₃₄ означает Aib; или по крайней мере одна из A₂₄, A₂₈ и A₃₁ означает Cha, и по крайней мере одна из A₁₆ и A₁₇ означает Aib.

Еще в одной подгруппе по крайней мере A₁ означает Dap, A₇ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe, A₁₃ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe. Например, A₁ означает Ser, Gly или Dap; A₃ означает Ser или Aib; A₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; A₁₆ означает Asn или Aib; A₁₈ означает Met, Aib или Nle; A₂₁ означает Val; A₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; A₃₁ означает Val, Nle или Cha; A₃₂ означает His, A₃₃ означает Asn, A₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; и R₃ означает аминогруппу.

Примеры пептидов по настоящему изобретению, соответствующих указанной формуле, приведены в приложении 1.

В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к пептидам, отвечающим следующей формуле:

где A₁ означает Ala, Ser или Dap;
A₃ означает Ser или Aib;
A₅ означает His, Ile или Cha;
A₇ означает Leu, Cha, Nle, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-X-Phe, где X в свою очередь означает H, OH, галоген или метил;
A₈ означает Leu, Met или Cha;
A₁₀ означает Asp или Asn;
A₁₁ означает Lis, Leu, Cha, Phe или β-Nal;
A₁₂ означает Gly или Aib;
A₁₄ означает Ser или His;
A₁₅ означает Ile или Cha;
A₁₆ означает Gln или Aib;
A₁₇ означает Asp или Aib;
A₁₈ означает Leu, Aib или Cha;
A₁₉ означает Arg или Aib;
A₂₂ означает Phe, Glu, Aib или Cha;
A₂₃ означает Phe, Leu, Lys или Cha;
A₂₄ означает Leu, Lys или Cha;
A₂₅ означает His, Aib или Glu;
A₂₆ означает His, Aib или Lys;
A₂₇ означает Leu, Lys или Cha;
A₂₈ означает Ile, Leu, Lys или Cha;
A₂₉ означает Ala, Glu или Aib;
A₃₀ означает Glu, Cha, Aib или Lys;
A₃₁ означает Ile, Leu, Cha, Lys или дилетирован;
A₃₂ означает His или дилетирован;
A₃₃ означает Tyr или дилетирован;
A₃₄ означает Ala или дилетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означает водород, C(1-12)алканил, C(7-20)фенилалкил, C(11-20)нафтилалкил, C(1-12)гидроксиалкил, C(2-12)гидроксиалкенил, C(7-20)гидроксифенилалкил или C(11-20)гидроксинафтилалкил; или один и только один из R₁ и R₂ представляет собой группу COE₁, где E₁ означает C(1-12)алкил, C(2-12)алкил, C(2-12)алкенил, C(7-20)фенилалкил, C(11-20)нафтилалкил, C(1-12)гидроксиалкил, C(2-12)гидроксиалкенил, C(7-20)гидроксифенилалкил или C(11-20)гидроксинафтилалкил; и
R₃ означает гидроксил, амино-, C(1-12)алкокси- или NH-Y-CH₂-Z-группу, где Y в свою очередь означает C(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил, карбоксил или CONH₂;
при условии, что (i) по крайней мере одна из A₅, A₇, A₈, A₁₁, A₁₅, A₁₈, A₂₂, A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈, A₃₀ или A₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из A₃, A₁₂, A₁₆, A₁₇, A₁₈, A₁₉, A₂₂, A₂₅, A₂₆, A₂₉, A₃₀ или A₃₄ означает Aib; или (ii) по крайней мере одна из A₂₃, A₂₄, A₂₇, A₂₈ или A₃₁ означает Lys; или к их фармацевтически приемлемой соли. В одном из примеров осуществления по крайней мере одна из A₇ и A₁₁ означает Cha. В другом примере по крайней мере одна из A₁₆ и A₁₉ означает Aib. Конкретные примеры пептидов приведенной выше формулы (см. приложение 2) включают, но не ограничиваются ими.

За исключением N-концевых аминокислот все сокращения аминокислот (например, Ala или A₁), используемые в настоящем описании, обозначают структуру -NH-CH(R)-CO-, где R означает боковую цепь аминокислоты (например, CH₃ для Ala). В случае N-концевой аминокислоты сокращения обозначают структуру = N-CH(R)-CO-, где R - боковая цепь аминокислоты. β-Nal, Nle, Dap, Cha, Nva, Amp, Pal и Aib представляют собой соответственно сокращения следующих α-аминокислот: β-(2-нафтил)аланин, норлейцин, α, β-диаминопропионовой кислоты, циклогексилаланин, норвалин, 4-аминофенилаланин, 3- пиридинилаланин и α-аминоизомасляной кислоты. В приведенной выше формуле гидроксиалкил, гидроксифенилалкил и гидроксинафтилалкил могут содержать 1-4 гидроксильных заместителей. Также COE₁ означает группу -C=O•E₁. Примеры -C=O•E₁ включают, но не ограничиваются ими, ацетил и фенилпропионил.

Пептид по настоящему изобретению обозначают в тексте также иным способом, например [Cha^7,11]hПТГрП(1-34)NH₂, с замещенными аминокислотами в естественной последовательности, указанными в квадратных скобках (например, Cha⁷ вместо Leu⁷ и Cha¹¹ вместо Leu¹¹ в hПТГ). Сокращение hПТГ используется для обозначения ПТГ человека, hПТГрП означает ПТГрП человека, rПТГ означает крысиный ПТГ и bПТГ означает коровий ПТГ. Цифры в круглых скобках указывают число аминокислот, присутствующих в пептиде (например, hПТГ(1-34) означает аминокислоты от 1 до 34 в пептидной последовательности ПТГ человека). Последовательности для hПТГ(1-34), hПТГрП(1-34), bПТГ(1-34), rПТГ(1-34) указаны у Ниссенсена с сотр. [Nissenson et al., Receptor, 3, 193 (1993)]. Обозначение "NH₂" в ПТГ(1-34)NH₂ указывает, что концевой атом углерода у пептида амидирован. С другой стороны, ПТГ(1-34) имеет концевой атом углерода свободной кислоты.

Каждый из пептидов по настоящему изобретению способен стимулировать рост костей у субъектов (то есть у млекопитающих, таких как человек). Так, они эффективны при лечении остеопороза и переломов костей, при этом терапия может осуществляться с использованием одних пептидов или одновременно с антирезорпционной терапией, например, бисфосфонатами и кальцитонином.

Пептиды по настоящему изобретению могут изготовляться в виде фармацевтически приемлемых солей. Примерами таких солей могут служить, но не ограничиваясь только ими, соли органических кислот (например, уксусной, молочной, малеиновой, лимонной, яблочной, аскорбиновой, янтарной, бензойной, метансульфокислоты, толуолсульфокислоты или пальмитиновой кислоты), соли неорганических кислот (например, соляной кислоты, серной кислоты или фосфорной кислоты) и соли полимерных кислот (например, дубильной кислоты, карбоксиметилцеллюлозы, полимолочной кислоты, полигликолевой кислоты или сополимеры полимолочной-гликолевой кислот).

Терапевтически эффективное количество пептида по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель (например, карбонат магния, лактоза или фосфолипид, с которым терапевтическое соединение может образовывать мицеллы) вместе образуют терапевтический состав (например, пилюли, таблетки, капсулы или жидкости) для введения пациентам (например, через рот, внутривенно, через кожу, подкожно, через легкие, вагинально, назально, йонофоретически или через трахею). Вводимые через рот пилюли, таблетки или капсулы могут покрываться веществом, которое защищает активный состав от желудочного сока или кишечных ферментов в желудке в течение промежутка времени, достаточного, чтобы поступить в тонкий кишечник непереваренным. Терапевтический состав также может быть в форме биорасщепляемого или бионерасщепляемого состава пролонгированного действия для подкожного или внутримышечного введения. Смотри, например, патенты СШA 3773919 и 4767628 и PCT Заявку N WO 94/15587. Продолжительное введение может также обеспечиваться при применении имплантируемого или наружного насоса (например, насоса марки INFUSAID). Введение лекарства может осуществляться одномоментно, например в виде разовой суточной инъекции, или длительно с низкой дозировкой, например состав пролонгированного действия.

Дозировка пептида по настоящему изобретению при лечении вышеупомянутых заболеваний или нарушений меняется в зависимости от принятой схемы лечения, возраста и массы пациента и его состояния и в конечном счете будет определяться лечащим врачом или ветеринаром.

В объем притязаний по настоящему изобретению также включается пептид, соответствующий приведенной выше общей формуле, для применения при лечении заболеваний или нарушений, связанных с недостатком роста костей или аналогичными причинами, например остеопорозом или переломами.

Остальные признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из подробного описания и формулы патентных притязаний.

На основе настоящего описания заявляемое изобретение может использоваться исключительно широко. Следующие конкретные примеры рассматриваются лишь в качестве иллюстрации и ни в коей мере как ограничение прав на изобретение.

Структура
Известно, что ПТГ(1-34) имеет две амфолитические альфа-спиральные зоны. Смотри, например, Бардена [Barden et al. Biochem., 32, 7126 (1992)]. Первая α-спираль образуется между аминокислотными остатками 4-13, вторая α-спираль образуется между 21-29 остатками аминокислот. У некоторых пептидов по настоящему изобретению Cha замещено одним или несколькими остатками в пределах или вблизи этих двух зон ПТГ(1-34), например Cha⁷ и Cha¹¹ в пределах первой α-спирали или Cha²⁷ и Cha²⁸ в пределах второй α-спирали.

Также настоящее изобретение включает производные ПТГ(1-34) с замещенными Aib на остаток, смежный с α-спиралями, например, Aib¹⁶, Aib¹⁹ и Aib³⁴; hArg²⁷ и Nle³¹; или с замещенными Dpa на N-концевой остаток.

Синтез
Пептиды по настоящему изобретению могут получаться стандартным синтезом в твердой фазе [см. например, Stewart J.M. et al., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Co. , 2d ed. 1984] . Ниже приводится описание получения [Aib³⁴] hПТГ(1-34)NH₂. Получение других пептидов по настоящему изобретению аналогично описанному выше и не представляет какой-либо сложности для специалистов в данной области.

Пептид синтезирован на Прикладных Биосистемах (Фостер Сити, Калифорния) в пептидном синтезаторе модели 430A, который усовершенствовали для ускорения синтеза пептида в твердой фазе трет-бутилоксикарбонилом (Boc) [см. Schnoize et al. , Int.J.Peptide Protein Res. 90, 180 (1992)]. Использовали 4-метилбензгидриламиновую (MBHA) смолу (Пенинсула, Белмонт, Калифорния) с замещением 0,93 ммоля/г. Применяли Boc-аминокислоты (Бэчем, Калифорния, Торренс, Калифорния; Nova Biochem., ЛаДжолла, Калифорния), имеющие следующую защиту боковых цепей: Boc-Arg(Tos)-OH, Boc-Asp(OcHx1)-ОН, Boc-Asn(Xan)-OH, Boc-Glu(OсHx1)-OH, Boc-His(DNP)-OH, Boc-Asn-GH, Boc-Val-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Ser-OH, Boc-Gly-OH, Boc-Met-OH, Boc-Gln-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Lys(2CIZ)-OH, Boc-Ser(Bzl)-OH и Boc-Trp(Fm)-ОН. Синтез проводили на 0,14 ммоля. Boc-группы удаляли обработкой 100%-ной трифторуксусной кислотой (TFA) дважды по одной минуте. Boc-аминокислоты (2,5 ммоля) предварительно активировали 2,0 ммолями гексафторфосфата 2- (1H-бензтриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (HBTU) и 1,0 мл диизопропилэтиламина (DIEA) в 4 мл диметилформамида (DMF) и сочетали без предварительной нейтрализации полипептидной соли трифторуксусной кислоты (TFA). Продолжительность сочетания составляла 5 мин, за исключением Boc-Aib(Xan)-OH, и следующего остатка, Boc-Asn(Xan)-OH, для которых длительность сочетания равна 20 мин.

В конце построения пептидной цепи смолу обрабатывали раствором 20% меркаптоэтанола/10% диизопропилэтиламина в диметилформамиде (DMF) дважды по 30 мин для удаления динитрофенил-группы (DNP) в His-боковой цепи. N-концевую трет-бутилоксикарбонильную (Boc)-группу затем удаляли двукратной обработкой 100%-ной трифторуксусной кислотой (TFA) по две минуты. После нейтрализации пептидной смолы 10% диизопропилэтиламином в диметилформамиде (1 х 1 мин) формил-группу в боковой цепи Trp удаляли двукратной обработкой по 30 мин раствором 15% этаноламина/15% воды/70% диметилформамида. Частично депротектинированную пептидную смолу промывали в диметилформамиде и метиленхлориде и сушили под вакуумом. Окончательное удаление достигали перемешиванием пептидной смолы в 10 мл фтористого водорода, содержащего 1 мл анизола, при 0^oC в течение 75 мин. HF удаляли в токе азота. Остаток промывали эфиром (6 раз по 10 мл) и экстрагировали 4N уксусной кислотой (6 раз по 10 мл).

Смесь пептида в водном экстракте очищали на препаративном жидкостном хроматографе высокого давления (ПЖX) с обращаемой фазой, используя колонку C₁₈ Vydac (Nest Group, Southborough, MA). Колонку элюировали с линейным градиентом (10% - 45%) раствора B в течение 130 мин при скорости потока 10 мл/мин. Раствор A - 0,1% водный трифторуксусной кислоты TFA; раствор B - ацетонитрил, содержащий 0,1% трифторуксусной кислоты TFA. Фракции собирали и проверяли на аналитическом жидкостном хроматографе высокого давления. Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и лиофилизовали досуха. Получали 62,3 мг белого твердого вещества. Чистота продукта по данным аналитической ГЖХ выше 99%. По данным электронной масс-спектрометрии установлено, что молекулярная масса продукта равна 4054,7 (что совпадает с расчетной молекулярной массой 4054,7).

Синтез и очистку [Cha^7,11] hПТГ(1-34)NH₂ осуществляли по аналогии с [Aib³⁴] hПТГ(1-34)NH₂. Защищенная аминокислота трет-бутилоксикарбонил-Cha-OH поступала из Baсhem, шт. Калифорния. Чистота конечного продукта выше 98%, молекулярная масса продукта по данным масс-спектрометрии равна 4197,0 (расчетная величина равна 4196,9).

Ниже приводится полная расшифровка использованных выше сокращений: Boc означает трет-бутилоксикарбонил; HF означает фтористый водород, Fm означает формил; Xan означает ксантил; Bzl означает бензил; Tos означает тозил; DNP означает 2,4- динитрофенил, DMF означает диметилформамид, DCM означает дихлорметан; HBTU означает гексафторфосфат 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония; DIAE означает диизопропилэтиламин; HOAc означает уксусную кислоту; TFA означает трифторуксусную кислоту; 2CIZ означает 2-хлорбензилоксикарбонил и OcHx1 означает О-циклогексил.

Заместители R₁ и R₂ в общей формуле могут быть присоединены к свободному амину N-концевой аминокислоты стандартными приемами, хорошо известными в химии. Например, алкильные группы, такие как C(1-12)алкилы, могут быть присоединены восстановительным алкилированием. Гидроксиалкильные группы, например C(1-12)гидроксиалкил, также могут быть присоединены восстановительным алкилированием при условии, если свободная гидроксильная группа экранирована трет-бутиловым сложным эфиром. Ацильные группы, например COE₁, могут присоединяться по реакции сочетания свободной кислоты, например E₁COOH, к свободному амину N-концевой аминокислоты при смешении полученной смолы с 3 молярными эквивалентами как свободной кислоты, так и диизопропилкарбодиимида в метиленхлориде в течение одного часа и прохождении полученной смолы через стадии вышеописанной программы промывки от (a) до (f). Если свободная кислота содержит свободную гидроксильную группу, например пара-гидроксифенилпропионовая кислота, то сочетание будет протекать с дополнительными 3 молярными эквивалентами HOBT.

Специалистам в данной области не составит труда аналогичным образом синтезировать другие пептиды по настоящему изобретению.

Функциональные анализы
A. Связывание с рецептором паратиреоидного гормона
Пептиды по настоящему изобретению испытаны на их способность присоединяться к рецептору ПТГ, присутствующему в SaOS-2 (человеческие клетки остеосаркомы). SaOS-2 клетки (Американская коллекция культур, Роквилл, шт. Мэриленд; ATCC#HTB 85) сохраняли в среде RPMI 1640 (Сигма, Сан-Луис, шт. Монтана) с добавкой 10% плодной сыворотки коров (FBS) и 2 мМ глутамина при 37^oC в увлажненной атмосфере воздуха с 5% углекислого газа. Среду меняли каждые три-четыре дня и клетки субкультурировали каждую неделю путем трипсинизации.

SaOS-2 клетки выдерживали в течение четырех дней до слияния. Среду заменяли на 5% FBS в RPMI 1640 и инкубировали в течение двух часов при комнатной температуре с 10 х 10 cpm моно-¹²⁵I- [Nle^8,18,Tyr³⁴(3-¹²⁵I)]bПТГ(1-34)NH₂ в присутствии совместимых пептидов по настоящему изобретению при разных концентрациях в интервале от 10^-11 М до 10^-4 М. Клетки промывали четыре раза PBS, охлажденным льдом, и лизировали 0,1 М едкого натра и подсчитывали радиоактивность клеток с помощью счетчика излучения. Синтез моно-¹²⁵I-[Nle^8,18, Tyr³⁴(3- ¹²⁵I)]bПТГ(1-34)NH₂ проводили по Гольдману М.Е. с сотр. [Goldman М.Е. et al., Endocrinol., 123, 1468 (1988)].

Опыты по определению связывания проводили с разными пептидами по настоящему изобретению и для каждого пептида рассчитывали значения IC₅₀ (половина максимального ингибирования связывания моно-¹²⁵I-[Nle^8,18,Tyr³⁴(3-¹²⁵I)]bПТГ (1-34)NH₂.

Как следует из таблицы 1, все испытанные пептиды обладают высоким сродством связывания относительно рецептора ПТГ на SaOS-2 клетке.

Б. Стимулирование активности аденилатциклазы
Измерена способность пептидов по настоящему изобретению вызывать в SaOS-2 клетках биологическую реакцию. Более конкретно, определяли любое стимулирование аденилатциклазы по уровню синтеза cAMP (аденозин 3',5'-монофосфата) в соответствии с Родэном и Голдманом [Rodan et al., J.Clin. Invest, 72, 1511 (1983); Goldman, et al., Endocrinol., 123, 1468 (1988)].

Конфлюэнтные SaOS-2 клетки в 24 бюксах выдерживали с [³H]аденином, имеющим радиоактивность 1,85•10⁴ с^-1 (0,5 мкКюри) (26,9 Кюри/ммоль, New England Nuclear, Бостон, Массачусетс) в свежей среде при 37^oC в течение двух часов и дважды промывали солевым раствором Хэнкса (Гибко, Гайтерсбург, шт. Мэриленд). Клетки обрабатывали 1 мМ IBMX [изобутилметилксантин. Сигма, Сан-Луис, шт. Монтана] в свежей среде в течение 15 мин, и пептиды по настоящему изобретению добавляли в среду и выдерживали в течение 5 мин. Реакцию обрывали добавлением 1,2 М трихлоруксусной кислоты (TCA) (Сигма, Сан-Луис, Монтана) с последующей нейтрализацией образца 4N KOH. cAMP выделяли методом двухколоночной хроматографии [Salmon et al. Anal. Blochem. 58, 541 (1974)]. Радиоактивность подсчитывали сцинцилляционным счетчиком (Жидкостной Сцинцилляционный Счетчик 2200CA, Паккард. Доунерс Грув, шт. Иллинойс).

В Таблице 1 приведены соответствующие величины EC₅₀ (половина максимального стимулирования аденилатциклазы). Было установлено, что все испытанные пептиды являются эффективными стимуляторами активности аденилатциклазы, которая является биохимическим указателем, непосредственным сигналом относительно пролиферации остеобластных клеток (например, роста костей).

Необходимо иметь в виду, что, хотя изобретение описывается с подробными ссылками на конкретные примеры его осуществления, их описание имеет своей целью проиллюстрировать изобретение без ограничения объема патентных притязаний. Патентные притязания охватывают другие стороны, преимущества и модификации.

Изобретение относится к области медицины, в частности к аналогам паратгормона. Пептидные варианты фрагмента (1-34) паратиреоидного гормона, в которых по крайней мере одним аминокислотным остатком в положениях 7, 11, 23, 24, 27, 28 и 31 является циклогексилаланин, или по крайней мере одним аминокислотным остатком в положениях 3, 16, 17, 18, 19 и 34 является α-аминоизомасляная кислота, или альтернативно по крайней мере аминокислотным остатком в положении 1 является α,β-диаминопропионовая кислота, аминокислотным остатком в положении 27 является гомоаргинин, или аминокислотным остатком в положении 31 является норлейцин. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств для терапии нарушений паращитовидной железы. 5 с. и 27 з.п.ф-лы, 1 табл.

1. Пептид, обладающий высоким сродством к рецептору паратиреоидного гормона (РТН) и обладающий способностью стимулировать активность аденилатциклазы, общей формулы

где А₁ означает Ser, Ala или Dap;
А₃ означает Ser, Thr или Aib;
А₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₇ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Cha или Nle;
А₁₁ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₁₂ означает Gly или Aib;
А₁₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₁₆ означает Ser, Asn, Ala или Aib;
А₁₇ означает Ser, Thr или Aib;
А₁₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Nle, Cha или Aib;
А₁₉ означает Glu или Aib;
А₂₁ означает Val, Cha или Met;
А₂₃ означает Trp или Cha;
А₂₄ означает Leu или Cha;
А₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg, Gln или Cha;
А₂₈ означает Leu или Cha;
А₃₀ означает Asр или Lys;
А₃₁ означает Val, Nle, Cha или дилетирован;
А₃₂ означает His или дилетирован;
А₃₃ означает Asn или дилетирован;
А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp, Aib или дилетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означают водород, С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил или один и только один из R₁ и R₂ представляют собой группу СОЕ₁, где Е₁ означает С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил;
R₃ означает гидроксил, амино-, С(1-12)алкокси- или NН-Y-СН₂-Z группу, где Y, в свою очередь, означает С(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил или СОNН₂, при условии, что по крайней мере одна из А₅, А₇, А₈, А₁₁, А₁₅, А₁₈, А₂₁, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ и А₃₁ означает Cha или по крайней мере одна из А₃, А₁₂, А₁₆, А₁₇, А₁₈, А₁₉ и А₃₄ означает Aib; если А₁₂ не Aib, А₃₄ является Tyr,
или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Пептид по п.1, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇, А₁₁, А₁₅, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ и А₃₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 3. Пептид по п. 2, отличающийся тем, что А₃ означает Ser; А₅ означает Ile; А₇ означает Leu или Cha; А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; А₁₁ означает Leu или Cha; А₁₂ означает Gly; А₁₅ означает Leu или Cha; А₁₆ означает Asn или Aib; А₁₇ означает Ser; А₁₈ означает Met или Nle; А₂₁ означает Val; А₂₇ означает Lys, hArg или Cha; А₃₁ означает Val, Nle или Cha; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Asn; А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород и R₃ означает аминогруппу, или его фармацевтически приемлемая соль. 4. Пептид по п.3, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇ и А₁₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 5. Пептид по п. 4, отличающийся тем, что указанный пептид является [Cha^7,11] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11, Nlе^8,18, Tyr³⁴]hПТГ(1-34)NН₂; [Cha¹¹] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11,15]hПТГ(1-34)NН₂ или [Cha⁷]hПТГ(1-34)NН₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 6. Пептид по п. 3, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₁₅, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ и А₃₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 7. Пептид по п. 6, отличающийся тем, что указанный пептид является [Cha²³] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha²⁴]hПТГ(1-34)NН₂; [Nlе^8,18, Cha²⁷]hПТГ(1-34)NН₂; [Cha²⁸] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha³¹] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^24,28,31]hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^24,28,31, Lys³⁰] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^28,31]hПТГ(1-34)NН₂ или [Cha¹⁵] hПТГ(1-34)NН₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 8. Пептид по п.1, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₃, А₁₂, А₁₆, А₁₇, А₁₈, А₁₉ и А₃₄ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 9. Пептид по п.8, отличающийся тем, что А₃ означает Ser или Aib; А₅ означает Ile; А₇ означает Leu или Cha; А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; А₁₁ означает Leu или Cha; А₁₅ означает Leu или Cha; А₁₆ означает Asn или Aib; А₁₈ означает Met, Aib или Nle; А₂₁ означает Val; А₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; А₃₁ означает Val, Nle или Cha; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Asn; А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; R₃ означает аминогруппу, или его фармацевтически приемлемая соль. 10. Пептид по п. 9, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₃, А₁₂, А₁₆, А₁₇, А₁₉ и А₃₄ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 11. Пептид по п. 4, отличающийся тем, что указанный пептид является [Aib¹⁶]hПТГ(1-34)NН₂; [Aib¹⁹]hПТГ(1-34)NН₂; [Aib³⁴]hПТГ(1-34)NН₂; [Aib^16,19] hПТГ(1-34)NН₂; [Aib³]hПТГ(1-34)NН₂; [Aib¹⁷]hПТГ(1-34)NН₂;[Aib¹²] hПТГ(1-34)NН₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 12. Пептид по п. 1, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇, А₁₁, А₁₅, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ или А₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из А₃, А₁₂, А₁₆, А₁₇, А₁₈, А₁₉ и А₃₄ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 13. Пептид по п. 2, отличающийся тем, что А₃ означает Ser или Aib; А₅ означает Ile; А₇ означает Leu или Cha; А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; А₁₁ означает Leu или Cha; А₁₅ означает Leu или Cha; А₁₆ означает Asn или Aib; А₁₈ означает Met, Aib или Nle; А₂₁ означает Val; А₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; А₃₁ означает Val, Nle или Cha; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Asn; А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; R₃ означает аминогруппу, или его фармацевтически приемлемая соль. 14. Пептид по п.13, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇ и А₁₁ означает Cha, и по крайней мере одна из А₁₆, А₁₉ и А₃₄ означает Aib или его фармацевтически приемлемая соль. 15. Пептид по п. 14, отличающийся тем, что указанный пептид является [Cha^7,11, Nle^8,18, Aib^16,19, Tyr³⁴]hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11, Nle^8,18,31, Aib^16,19, Tyr³⁴] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11, Aib ¹⁹]hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11, Aib ¹⁶] hПТГ(1-34)NН₂; [Cha^7,11, Nle^8,18, Aib³⁴] hПТГ(1-34)NН₂; или [Cha^7,11, Aib ¹⁹, Lys³⁰]hПТГ(1-34)NН₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 16. Пептид по п.13, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₂₄, А₂₈ и А₃₁ означает Cha, и по крайней мере одна из А₁₆ и А₁₇ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 17. Пептид по п. 16, отличающийся тем, что указанный пептид является [Cha²⁸, Nle^8,18, Aib^16,19, Tyr³⁴] hПТГ(1-34)NН₂ или [Cha²⁸, Aib^16,19] hПТГ(1-34)NН₂, или его фармацевтически приемлемая соль. 18. Пептид, обладающий высоким сродством к рецептору паратиреоидного гормона (РТН) и обладающий способностью стимулировать активность аденилатциклазы общей формулы

где А₁ означает Dаp;
А₃ означает Ser, Thr или Aib;
А₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₇ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой Н, ОН, галоген или метил;
А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Cha или Nle;
А₁₁ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₁₂ означает Gly или Aib;
А₁₅ означает Leu, Nle, Ile, Cha, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₁₆ означает Ser, Asn, Ala или Aib;
А₁₇ означает Ser, Thr или Aib;
А₁₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile, Nle, Cha или Aib;
А₁₉ означает Glu или Aib;
А₂₁ означает Val, Cha или Met;
А₂₃ означает Trp или Cha;
А₂₄ означает Leu или Cha;
А₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg, Gln или Cha;
А₂₈ означает Leu или Cha;
А₃₀ означает Asр или Lys;
А₃₁ означает Val, Nle, Cha или делетирован;
А₃₂ означает His или делетирован;
А₃₃ означает Asn или делетирован;
А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp, Aib или делетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означают водород, С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил или один и только один из R₁ и R₂ представляют собой группу СОЕ₁, где Е₁ означает С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил;
R₃ означает гидроксил, амино-, С(1-12)алкокси- или NН-Y-СН₂-Z группу, где Y, в свою очередь, означает С(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил, карбоксил или СОNН₂-группу,
при условии, что по крайней мере А₁ означает Dap, А₇ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe; А₁₅ означает β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe; А₂₇ означает hArg, или А₃₁ означает Nle, или его фармацевтически приемлемая соль. 19. Пептид по п.18, отличающийся тем, что А₁ означает Ser, Gly или Dap; А₃ означает Ser или Aib; А₈ означает Met, Nva, Leu, Val, Ile или Nle; А₁₆ означает Asn или Aib; А₁₈ означает Met, Aib или Nle; А₂₁ означает Val; А₂₇ означает Lys, Aib, Leu, hArg или Cha; А₃₁ означает Val, Nle или Cha; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Asn; А₃₄ означает Phe, Tyr, Amp или Aib; R₁ означает водород; R₂ означает водород; R₃ означает аминогруппу, или его фармацевтически приемлемая соль. 20. Пептид по п.19, отличающийся тем указанный пептид является [Nle³¹] hПТГ(1-34)NН₂; [hArg²⁷] hПТГ(1-34)NН₂ или [Dap¹, Nle^8,18, Tyr³⁴]hПТГ(1-34)NН₂, или фармацевтически приемлемая соль. 21. Пептид, обладающий высоким сродством к рецептору паратиреоидного гормона (РТН) и обладающий способностью стимулировать активность аденилатциклазы, общей формулы

где А₁ означает Ala, Ser или Dap;
А₃ означает Ser или Aib;
А₅ означает His, Ile или Cha;
А₇ означает Leu, Cha, Nle, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₈ означает Leu, Met или Cha;
А₁₀ означает Asр или Asn;
А₁₁ означает Lys, Leu, Cha, Phe или β-Nal;
А₁₂ означает Gly или Aib;
А₁₄ означает Ser или His;
А ₁₅ означает Ile или Cha;
А₁₆ означает Gln или Aib;
А₁₇ означает Asp или Aib;
А₁₈ означает Leu, Aib или Cha;
А₁₉ означает Arg или Aib;
А₂₂ означает Phe, Glu, Aib или Cha;
А₂₃ означает Phe, Leu, Lys или Cha;
А₂₄ означает Leu, Lys или Cha;
А₂₅ означает His, Aib или Glu;
А₂₆ означает His, Aib или Lys;
А₂₇ означает Leu, Lys или Cha;
А₂₈ означает Ile, Leu, Lys или Cha;
А₂₉ означает Ala, Glu или Aib;
А₃₀ означает Glu, Cha, Aib или Lys;
А₃₁ означает Ile, Leu, Cha, Lys или делетирован;
А₃₂ означает His или делетирован;
А₃₃ означает Thr или делетирован;
А₃₄ означает Ala, Aib или делетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означают водород, С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил или один и только один из R₁ и R₂ представляют собой группу СОЕ₁, где Е₁ означает С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил; и
R₃ означает гидроксил, амино-, С(1-12)алкокси- или NН-Y-СН₂-Z группу, где Y, в свою очередь, означает С(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил, карбоксил или СОNН₂-группу; при условии, что по крайней мере одна из А₅, А₇, А₈, А₁₁, А₁₅, А₁₈, А₂₂, А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈, А₃₀ или А₃₁ означает Cha, или по крайней мере одна из А₃, А₁₂, А₁₆, А₁₇, А₁₈, А₁₉, А₂₂, А₂₅, А₂₆, А₂₉, А₃₀ или А₃₄ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 22. Пептид по п.21, отличающийся тем, что А₂₂ означает Рhе или Cha; А₂₃ означает Phe или Cha; А₂₅ означает His; А₂₆ означает His; А₂₇ означает Leu или Cha; А₂₈ означает Ile или Cha; А₂₉ означает Ala; А₃₀ означает Glu или Lys; А₃₁ означает Ile или Cha; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Thr; А₃₄ означает Ala, или его фармацевтически применяемая соль. 23. Пептид по п.22, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇ и А₁₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 24. Пептид по п.22, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₁₆ и А₁₉ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 25. Пептид по п.21, отличающийся тем, что А₂₂ означает Glu, Aib или Cha; А₂₃ означает Leu, Lys или Cha; А₂₅ означает Aib или Glu; А₂₆ означает Aib или Lys; А₂₈ означает Leu, Lys или Cha; А₂₉ означает Glu или Aib; А₃₀ означает Cha, Aib или Lys; А₃₁ означает Leu, Cha или Lys; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Thr; А₃₄ означает Ala, или его фармацевтически приемлемая соль. 26. Пептид по п.25, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇ и А₁₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 27. Пептид по п.25, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₁₆ и А₁₉ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 28. Пептид, обладающий высоким сродством к рецептору паратиреоидного гормона (РТН) и обладающий способностью стимулировать активность аденилатциклазы, общей формулы

где А₁ означает Ala, Ser или Dap;
А₃ означает Ser или Aib;
А₅ означает His, Ile или Cha;
А₇ означает Leu, Cha, Nle, β-Nal, Trp, Pal, Phe или пара-Х-Phe, где Х, в свою очередь, представляет собой гидроксил, галоген или метил;
А₈ означает Leu, Met или Cha;
А₁₀ означает Asр или Asn;
А₁₁ означает Lys, Leu, Cha, Phe или β-Nal;
А₁₂ означает Gly или Aib;
А₁₄ означает Ser или His;
А₁₅ означает Ile или Cha;
А₁₆ означает Gln или Aib;
А₁₇ означает Asp или Aib;
А₁₈ означает Leu, Aib или Cha;
А₁₉ означает Arg или Aib;
А₂₂ означает Phe, Glu, Aib или Cha;
А₂₃ означает Phe, Leu, Lys или Cha;
А₂₄ означает Leu, Lys или Cha;
А₂₅ означает His, Aib или Glu;
А₂₆ означает His, Aib или Lys;
А₂₇ означает Leu, Lys или Cha;
А₂₈ означает Ile, Leu, Lys или Cha;
А₂₉ означает Ala, Glu или Aib;
А₃₀ означает Glu, Cha, Aib или Lys;
А₃₁ означает Ile, Leu, Cha, Lys или делетирован;
А₃₂ означает His или делетирован;
А₃₃ означает Thr или делетирован;
А₃₄ означает Ala, Aib или делетирован;
каждый из R₁ и R₂ независимо друг от друга означают водород, С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил или один и только один из R₁ и R₂ представляют собой группу СОЕ₁, где Е₁ означает С(1-12)алкил, С(2-12)алкенил, С(7-20)фенилалкил, С(11-20)нафтилалкил, С(1-12)гидроксиалкил, С(2-12)гидроксиалкенил, С(7-20)гидроксифенилалкил или С(11-20)гидроксинафтилалкил;
R₃ означает гидроксил, амино-, С(1-12)алкокси- или NН-Y-СН₂-Z группу, где Y, в свою очередь, означает С(1-12)углеводородный остаток, и Z означает водород, гидроксил, карбоксил или СОNН₂-группу; при условии, что по крайней мере одна из А₂₃, А₂₄, А₂₇, А₂₈ или А₃₁ означает Lys, или его фармацевтически приемлемая соль. 29. Пептид по п.28, отличающийся тем, что А₂₂ означает Glu, Aib или Cha; А₂₃ означает Leu, Lys или Cha; А₂₅ означает Aib или Glu; А₂₆ означает Aib или Lys; А₂₈ означает Leu, Lys или Cha; А₂₉ означает Glu или Aib; А₃₀ означает Cha, Aib или Lys; А₃₁ означает Leu, Cha или Lys; А₃₂ означает His; А₃₃ означает Thr; А₃₄ означает Ala, или его фармацевтически приемлемая соль. 30. Пептид по п.29, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₇ и А₁₁ означает Cha, или его фармацевтически приемлемая соль. 31. Пептид по п.29, отличающийся тем, что по крайней мере одна из А₁₆ и А₁₉ означает Aib, или его фармацевтически приемлемая соль. 32. Соединение формулы [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30] hПТГpП(1-34)NН₂.