ВЫДЕЛЕННАЯ И ОЧИЩЕННАЯ МОЛЕКУЛА НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (ВАРИАНТЫ), ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР, ВЫДЕЛЕННЫЙ И ОЧИЩЕННЫЙ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНЫЙ БЕЛОК (HMW) НЕТИПИЧНЫХ HAEMOPHILUS, КОНЪЮГАТ, СИНТЕТИЧЕСКИЙ ПЕПТИД Российский патент 2003 года по МПК C12N15/31 C12N15/74 C07K14/195 

Текст описания в факсимильном виде (см. чертежи) Т Т Ты

Изобретение относится к генной инженерии. Выделенная и очищенная молекула нуклеиновой кислоты кодирует высокомолекулярный белок (HMW) HMW3 или HMW4 штамма нетипируемых Haemophilus. Нуклеотидные последовательности ДНК и аминокислотные последовательности белка HMW3 и HMW4 приведены в описании. Плазмидный вектор для трансформации Haemophilus influenzae получен на основе pHMWl включением в него ДНК. Конъюгат состоит из белка HMW и антигена, гаптена или полисахарида и позволяет получить к последним иммунный ответ. Синтетический пептид состоит из 6-150 аминокислот и соответствует защитному эпитопу белка HMW3 или HMW4 нетипичной Haemophilus influenzae. Защитный эпитоп распознается одним из моноклональных антител - AD6 и 10С5. Новые высокомолекулярные белки нетипичной Haemophilus позволяют получать иммунный ответ на антиген, гаптен или полисахарид, будучи использованы в качестве молекул-переносчиков. 6 с. и 1 з.п.ф-лы, 23 ил., 3 табл.

1. Выделенная и очищенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая высокомолекулярный белок (HMW) HMW3 или HMW4 штамма нетипичных Haemophilus, характеризуемая (a) последовательностью ДНК, показанной на фигуре 8 (SEQ ID No: 7), кодирующей белок HMW3, обладающий аминокислотной последовательностью, приведенной на фигуре 10 (SEQ ID No: 9), или (b) последовательностью ДНК, показанной на фигуре 9 (SEQ ID No: 8), кодирующей белок HMW4, обладающий аминокислотной последовательностью, приведенной на фигуре 10 (SEQ ID No: 10). 2. Выделенная и очищенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая высокомолекулярный белок (HMW) штамма нетипичных Haemophilus, которая выбрана из группы, состоящей из (a) последовательностей ДНК, как показано на любой одной из фигур 8 и 9 (SEQ ID No: 7 и 8); (b) последовательностей ДНК, кодирующей аминокислотную последовательность, которая показана на фигуре 10 (SEQ ID No: 9 и 10). 3. Плазмидный вектор, полученный на основе pHMWl, для трансформации Haemophilus influenzae, включающий ДНК по п.2. 4. Выделенный и очищенный высокомолекулярный белок (HMW) нетипичных Haemophilus или его фрагмент, сохраняющий иммунологическую способность защищать от заболевания, вызываемого штаммом нетипичных Haemophilus, который характеризуется, как минимум, одним поверхностно расположенным В-клеточным эпитопом, распознаваемым моноклональным антителом AD6, выбираемый из группы, содержащей HMW3, кодируемый последовательностью ДНК, показанной на фигуре 8 (SEQ ID No: 7), обладающий аминокислотной последовательностью, представленной на фигуре 10 (SЕQ ID No: 9) и имеющий средний молекулярный вес 125 кД, и HMW4, кодируемый последовательностью ДНК, показанной на фигуре 9 (SEQ ID No: 8), обладающий аминокислотной последовательностью, представленной на фигуре 10 (SEQ ID No: 10) и имеющий молекулярный вес 123 кД. 5. Конъюгат, включающий белок по п.4, соединенный с антигеном, гаптеном или полисахаридом для вызова иммунного ответа к указанному антигену, гаптену или полисахариду. 6. Конъюгат по п.5, отличающийся тем, что указанный полисахарид представляет собой защитный полисахарид против Haemophilus influenzae тип b. 7. Синтетический пептид, характеризуемый аминокислотной последовательностью, содержащей, как минимум, шесть аминокислот, но не более, чем 150 аминокислот и соответствующий, как минимум, одному защитному эпитопу высокомолекулярного белка HMW3 или HMW4, как определено в п.4, нетипичной Haemophilus influenzae, который (эпитоп) распознается, как минимум, одним из моноклональных антител - AD6 и 10С5.