РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PACYCLANS ДЛЯ ПЕРЕНОСА И ЭКСПРЕССИИ В КЛЕТКАХ ESCHERICHIA COLI ГЕНА L-АСПАРАГИНАЗЫ ERWINIA CAROTOVORA (ECAR-LANS) И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ECAR-LANS ИЗ БИОМАССЫ ШТАММА E.COLI-ПРОДУЦЕНТА Российский патент 2004 года по МПК C12N15/55 C12N15/70 C12N9/82 C12P21/02 

Описание патента на изобретение RU2224797C2

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)н

Похожие патенты RU2224797C2

название год авторы номер документа
ГЕН L-АСПАРАГИНАЗЫ ERWINIA CAROTOVORA И ШТАММ ESCHERICHIA COLI ВКПМ № В-8174 - ПРОДУЦЕНТ L-АСПАРАГИНАЗЫ ERWINIA CAROTOVORA 2001
  • Эльдаров М.А.
  • Жгун А.А.
  • Гервазиев Ю.В.
  • Александрова С.С.
  • Омельянюк Н.М.
  • Арчаков А.А.
  • Скрябин К.Г.
  • Соколов Н.Н.
RU2221868C2
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pACYC-LANS(KM), ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3), ТРАНСФОРМИРОВАННЫЙ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК pACYC-LANS(KM), И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ L-АСПАРАГИНАЗЫ Erwinia carotovora 2010
  • Сидорук Константин Васильевич
  • Богуш Владимир Григорьевич
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Гончарова Ольга Владимировна
  • Чугунова Надежда Михайловна
  • Покровская Марина Владимировна
  • Александрова Светлана Серебеджановна
  • Омельянюк Наталья Михайловна
  • Соколов Николай Николаевич
RU2441916C1
РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫЙ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ С ХИТИНСВЯЗЫВАЮЩИМ ДОМЕНОМ (DAOcbd) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pVR1, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ ЕГО СИНТЕЗ В КЛЕТКАХ Escherichia coli, И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ Escherichia coli С 41(DE3)/pVR1 - ПРОДУЦЕНТ DAOcbd 2006
  • Редо Вадим Александрович
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Хатунцева Светлана Анатольевна
  • Жгун Александр Александрович
  • Зейналов Орхан Ахмед Оглы
  • Скрябин Константин Георгиевич
RU2310688C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУБСТАНЦИИ РЕКОМБИНАНТНОЙ L-АСПАРАГИНАЗЫ ERWINIA CAROTOVORA 2010
  • Карасев Виктор Семенович
  • Бочкова Ольга Петровна
  • Чугунов Александр Михайлович
  • Мелик-Нубаров Николай Сергеевич
  • Гроздова Ирина Дмитриевна
  • Черновская Татьяна Вениаминовна
  • Денисов Лев Александрович
  • Руденко Елена Георгиевна
  • Морозова Елена Леонидовна
  • Богуш Владимир Григорьевич
  • Сидорук Константин Васильевич
  • Колтун Игорь Олегович
  • Скатова Галина Евгеньевна
  • Абакумова Ольга Юрьевна
  • Подобед Ольга Владимировна
  • Соколов Николай Николаевич
RU2441914C1
Модифицированный ген рас бактерий Escherichia coli, кодирующий предшественник фермента с активностью пенициллин G ацилазы, рекомбинантный штамм Escherichia coli - продуцент пенициллин G ацилазы и способ микробиологического синтеза этого фермента 2015
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Скляренко Анна Владимировна
  • Думина Мария Владимировна
  • Сатарова Дженни Эрнстовна
  • Жгун Александр Александрович
  • Медведева Наталья Викторовна
  • Яроцкий Сергей Викторович
RU2624022C1
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pETTvDAO2, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ СИНТЕЗ ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ (DAO) ДРОЖЖЕЙ Trigonopsis variabilis В КЛЕТКАХ Escherichia coli И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ Escherichia coli C41(DE3)/pETTvDAO2 - ПРОДУЦЕНТ DAO 2006
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Редо Вадим Александрович
  • Жгун Александр Александрович
  • Зейналов Орхан Ахмед Оглы
  • Скрябин Константин Георгиевич
RU2310687C1
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pSVH0106, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ СИНТЕЗ Gl7ACA-АЦИЛАЗЫ В КЛЕТКАХ Escherichia coli, И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)/pSVH0106-ПРОДУЦЕНТ Gl7ACA-АЦИЛАЗЫ 2005
  • Хатунцева Светлана Анатольевна
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Зейналов Орхан Ахмед Оглы
  • Скрябин Константин Георгиевич
RU2300566C2
РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫЙ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК G17ACA-АЦИЛАЗЫ С ХИТИН-СВЯЗЫВАЮЩИМ ДОМЕНОМ (BrdG17ACA-cbd), РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pSVH0108, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ ЕГО СИНТЕЗ В КЛЕТКАХ Escherichia coli, И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ Escherichia coli BL21(DE3)/pSVH0108-ПРОДУЦЕНТ BrdG17ACA-cbd 2006
  • Хатунцева Светлана Анатольевна
  • Эльдаров Михаил Анатольевич
  • Зейналов Орхан Ахмед Оглы
  • Скрябин Константин Георгиевич
RU2388826C2
МОДИФИЦИРОВАННЫЙ ГЕН tsA, КОДИРУЮЩИЙ ТЕРМОСТАБИЛЬНУЮ L-АСПАРАГИНАЗУ ИЗ АРХЕИ THERMOCOCCUS SIBIRICUS, РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ ESCHERICHIA COLI - ПРОДУЦЕНТ ТЕРМОСТАБИЛЬНОЙ L-АСПАРАГИНАЗЫ И СПОСОБ ОЧИСТКИ ЭТОГО ФЕРМЕНТА 2022
  • Думина Мария Владимировна
  • Жгун Александр Александрович
  • Александрова Светлана Серебеджановна
  • Покровская Марина Владимировна
  • Соколов Николай Николаевич
  • Жданов Дмитрий Дмитриевич
RU2794225C1
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PTLS, СОДЕРЖАЩАЯ ГЕН ОДНОЦЕПОЧЕЧНОГО АНТИТЕЛА ПРОТИВ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА, И ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI-ПРОДУЦЕНТ ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ АНТИТЕЛ ПРОТИВ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА 1998
  • Николенко Г.Н.
  • Тикунова Н.В.
  • Головин С.Я.
  • Протопопова Е.В.
  • Локтев В.Б.
  • Ильичев А.А.
  • Деев С.М.
RU2158309C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 224 797 C2

Реферат патента 2004 года РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PACYCLANS ДЛЯ ПЕРЕНОСА И ЭКСПРЕССИИ В КЛЕТКАХ ESCHERICHIA COLI ГЕНА L-АСПАРАГИНАЗЫ ERWINIA CAROTOVORA (ECAR-LANS) И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ECAR-LANS ИЗ БИОМАССЫ ШТАММА E.COLI-ПРОДУЦЕНТА

Изобретение относится к генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано в медико-биологической промышленности. Сконструирована рекомбинантная плазмида (pACYCLANS), содержащая природную последовательность гена L-аспарагиназы Erwinia carotovora (ECAR-LANS), которая находится под контролем промотора и терминатора РНК-полимеразы фага Т7 и кодирует полноразмерный предшественник фермента с сигнальным пептидом для экспорта белка в периплазму с последующим процессингом. Путем трансформации указанной плазмидой штаммов Е.coli, способных синтезировать РНК-полимеразу фага Т7, получают штаммы-продуценты, в которых содержание рекомбинантной L-аспарагиназы составляет от 8 до 12%. Для выделения и очистки фермента из биомассы используют разрушение клеток с помощью ультразвуковой дезинтеграции, фракционирование сульфатом аммония и хроматографию на SP-сефарозе FF. Изобретение обеспечивает получение с высоким выходом очищенного препарата L-аспарагиназы. 2 с.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Формула изобретения RU 2 224 797 C2

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pACYCLANS для переноса и экспрессии в клетках Escherichia coli гена L-аспарагиназы Erwinia carotovora (ECAR-LANS), имеющая размер 5,8 т.п.н. и состоящая из следующих элементов: фрагмента BamH I-Pst I размером 3 т.п.н. плазмиды рАСYC 177, фрагмента Nhе I-BamH I размером 1,3 т.п.н. плазмиды рBADLANS′, содержащего ген ECAR-LANS с нуклеотидной последовательностью SEQ ID №1, фрагмента Bgl II-Xba I размером 0,2 т.п.н. плазмиды рЕТ23(а), фрагмента BamHI-Рst I размером 1,3 т.п.н. плазмиды рЕТ23(а).2. Способ получения рекомбинантной L-аспарагиназы, включающий стадии культивирования штамма-продуцента в оптимальных для синтеза указанного фермента условиях и последующего выделения и очистки продукта, отличающийся тем, что в качестве штамма-продуцента используют штамм Е.coli, трансформированный рекомбинантной плазмидной ДНК по п.1, а для выделения и очистки фермента применяют разрушение клеток с помощью ультразвуковой дезинтеграции, фракционирование сернокислым аммонием и хроматографию на SP-сефарозе FF.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2004 года RU2224797C2

ЛОГОМЕТР С ИЗМЕНЯЮЩИМСЯ ТОКОМ 0
SU211639A1
Торфодобывающая машина с вращающимся измельчающим орудием 1922
  • Рогов И.А.
SU87A1
US 6251388, 09.06.1998
ДИМЕР "КЛЕВЕРНОГО" ПЕПТИДА 1995
  • Тим Ларс
  • Вельдике Хелле Фабрисиус
  • Нильсен Пер Франклин
RU2162857C2
КОЧЕТОВ Г.А
Практическое руководство по энзимологии
- М., 1980.

RU 2 224 797 C2

Авторы

Эльдаров М.А.

Жгун А.А.

Гервазиев Ю.В.

Александрова С.С.

Богуш В.Г.

Сидорук К.В.

Свешникова Е.В.

Борисова А.А.

Омельянюк Н.М.

Арчаков А.И.

Скрябин К.Г.

Соколов Н.Н.

Даты

2004-02-27Публикация

2002-04-04Подача