СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ВОЗМОЖНОСТИ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ЦИРРОЗА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВИРУСНОМ ГЕПАТИТЕ Российский патент 2005 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, гепатологии, и касается способов возможности прогнозирования возникновения цирроза при хроническом вирусном гепатите.

Известен способ прогнозирования возможности возникновения цирроза при хронических заболеваниях печени, заключающийся в определении концентрации фосфолипидов в мембранах эритроцитов в расчете на гемоглобин, и при значениях 0,45-1,47 ммоль диагностируют цирроз печени [1].

Недостатком данного способа является недостаточная его точность, так как определяется концентрация только общих фосфолипидов в крови. Этот способ улавливает только грубые изменения, так как представляет собой сумму фракций фосфолипидного спектра.

Относительное содержание фракций внутри фосфолипидного спектра разных категорий больных и в разный период болезни может сильно отличаться и имеет важное значение для оценки степени изменения биохимических процессов, а значит, и для диагностики [2]. Кроме того, определение фосфолипидов в эритроцитах, которые не относятся к иммунокомпетентным клеткам крови, малоинформативно, так как у больных хроническими гепатитами развивается инфильтрация печени иммунокомпетентными клетками [3], а циррозы печени вообще являются аутоиммунными заболеваниями [4].

Наиболее близким является способ прогнозирования возможности возникновения цирроза при хроническом вирусном гепатите, включающий проведение пункционной биопсии печени и постановку диагноза хронического активного гепатита, в результате чего прогнозируют вероятность возникновения цирроза печени [5].

Однако данный способ недостаточно точен, так как не учитывает состояние перекисного окисления липидов в печени и состояние антиоксидантной защиты.

Технический результат - повышение точности способа.

Указанный технический результат достигается тем, что согласно способу прогнозирования возможности возникновения цирроза печени при хроническом вирусном гепатите проводят пункционную биопсию и определяют в биоптате печени продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК), активность антаоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД), рассчитывают коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ),·100, где ДК - содержание диеновых конъюгатов, СОД - активность супероксиддисмутазы, КАТ - активность каталазы, и при его значениях более 65 прогнозируют высокую вероятность возникновения цирроза печени, при 46-65 - умеренную, при 14-45 - низкую, а при значении менее 14 - отсутствие вероятности возникновения цирроза печени.

Новыми, ранее не известными признаками заявленного способа являются определение в биоптате печени продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновых конъюгатов (ДК), активности антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД), расчет коэффициента по формуле К=ДК/СОД·КАТ),·100, где ДК - содержание диеновых конъюгатов, СОД - активность супероксиддисмутазы, КАТ - активность каталазы, и прогнозирование при значениях коэффициента более 65 высокой вероятности возникновения цирроза печени, при 46-65 - умеренной, при 14-45 - низкой, а при значении менее 14 - отсутствие вероятности возникновения цирроза печени. Данные отличительные признаки не найдены в проанализированной авторами литературе и не являются очевидными из уровня техники для специалиста.

Способ разработан на основе анализа процессов перекисного окисления липидов и системы антиоксидазной защиты в ткани печени. Он апробирован в клинической практике.

Таким образом, заявленное техническое решение соответствует критериям изобретения “новизна”, “изобретательский уровень”, “промышленно применимо”.

Способ осуществляют следующим образом: у больного хроническим вирусным гепатитом наряду с общеклиническими методами исследования проводят пункционную биопсию печени по Менгиги, полученный биоптат в 0,9% растворе натрия хлорида замораживают и определяют в нем продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые коньюгаты (ДК), активность антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД), рассчитывают коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ)·100, где ДК - содержание диеновых коньюгатов, СОД - активность супероксиддисмутазы, КАТ - активность каталазы. При значениях более 65 прогнозируют высокую вероятность возникновения цирроза печени, при 46-65 - умеренную, при 14-45 - низкую, а при значении менее 14 - отсутствие вероятности возникновения цирроза печени.

Конкретные примеры выполнения способа

Пример 1. Больной П. болен хроническим гепатитом В, 32 года, в анамнезе - эпизод внутривенного введения наркотических веществ, течение 8 лет в крови определяются антитела к HBcorAg IgG, HBsAg, повышение трансаминаз в 1,5-2 раза, гепатомегалия, принимал эссенциале курсами. Жалобы на слабость, субфебрилитет, тяжесть в правом подреберье. При обследовании в стационаре выявлено ПЦР к ДНК HBV, повышение активности трансаминаз в 2,5 раза, альфа-фетопротеин - 5 мкмоль/л (норма - до 4 мкмоль/л) при гистологическом исследовании печени - хронический гепатит В, умеренной степени активности, степень фиброза – минимальная. Проведены общеклиническое исследование и пункционная биопсия печени по Менгиги, полученный биоптат был заморожен в 0,9% растворе натрия хлорида и в нем определены продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК),активность антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД). Затем рассчитан коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ)·100. Коэффициент К=74,3, была прогнозирована высокая степень риска развития цирроза печени.

Больному была назначена монотерапия интерфероном в дозе 3 млн. ед. 3 раза в неделю. Через 3 месяца положительной динамики нет, сохраняется синдром цитолиза, в крови HBsAg, ПЦР к ДНК HBV, альфа-фетопротеин-4 мкмоль/л. Больному показана комбинированная терапия, однако от дальнейшего лечения пациент отказался.

Через 3 года П. обратился за медицинской помощью с жалобами на кровоточивость десен, слабость, снижение работоспособности. При обследовании: повышение активности трансаминаз в 2 раза, снижение ПТИ до 70%, ПЦР к ДНК HBV, на УЗИ - Печень неоднородная, уплотнена, край острый, расширены вортная и селезеночная вены. На сцинтиграфии - неравномерное распределение РФП, накопление РФП в селезенке - 60%, в печени - 40%, проведена лапароскопия, печень плотная, бугристая, на гистологии - цирроз печени.

Пример 2. Больной С. В анамнезе - гемотрансфузии по поводу кровопотери при травме (10 лет назад). Трансаминазы повышаются периодически в течение 8 лет. Жалобы на слабость, утомляемость, болезненность в правом подреберье. При обследовании в стационаре антитела к вирусному гепатиту С, ПЦР к РНК HCV положительна, трансаминазы повышены в 1,5 раза, альфа-фетопротеин - 5.4 мкмоль/л, УЗИ - без особенностей. При пункционной биопсии хронический гепатит С умеренной степени активности, степень фиброза умеренная. В сыворотке крови выявлено повышение содержания МДАсп в 6,1 раза, снижение МДАинд/МДАсп в 3,2 раза, повышение активности каталазы в 2,3 раза и снижение активности супероксиддисмутазы в 8,4 раза.

Проведены общее клиническое исследование и пункционная биопсия печени по Менгиги, полученный биоптат был заморожен в 0,9% растворе натрия хлорида и в нем определены продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК), активность антиоксидантных ферментов: каталазы(КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД). Затем рассчитан коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ)·100. Коэффициент К был равен 55,8. Была прогнозирована умеренная степень риска развития цирроза печени.

Была назначена терапия реафероном в дозе 6 млн. ед. 3 раза в неделю. Через 3 месяца эффект от терапии положительный, синдрома цитолиза нет, ПЦР к РНК HCV отрицательна. Терапию решено продолжить до года.

Через 8 месяцев после окончания лечения больной был обследован в стационаре, проведена повторная биопсия печени, диагностирован хронический гепатит С минимальной степени активности, степень фиброза сохранялась умеренная.

Пример 3. Пациент Р. В анамнезе - опийная наркомания 4 года назад. В крови антитела к ВГС, ПЦР к РНК HCV, повышение трансаминаз в 2 раза, альфа-фетопротеин - 5,2 мкмоль/л. Проведена пункционная биопсия печени, при гистологическом исследовании - хронический гепатит С, умеренной степени активности, с отсутствием фиброза.

Проведены общеклиническое исследование и пункционная биопсия печени по Менгиги, полученный биоптат был заморожен в 0,9% растворе натрия хлорида и в нем определены продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК), активность антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД). Затем рассчитан коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ)·100.

Коэффициент К=24,6, была прогнозирована низкая степень возможности развития цирроза.

Была назначена терапия интроном в дозе 3 млн. ед. 3 раза в неделю. Через 3 месяца эффект от терапии положительный: синдрома цитолиза нет, ПЦР к РНК HCV отрицательна. Терапию решено продолжить до года.

Через год синдрома цитолиза нет, ПЦР к РНК HCV отрицательна, проведена контрольная пункционная биопсия, на гистологии данных за гепатит нет, коэффициент К=13,4, риска возникновения цирроза нет. Констатировано выздоровление.

Данным способом было обследовано 27 человек, у 7 человек была прогнозирована высокая степень риска развития цирроза печени, у 5 - цирроз печени, и у 2 - высокая степень фиброза. Прогноз подтвержден в динамике у всех пациентов клинически и гистологически.

Таким образом, как показали клинические исследования, предлагаемый способ обладает высокой точностью и достоверностью.

Литература

1. Авторское свидетельство №1142105, МПК А 61 В 10/00, 1985.

2. Никитин Ю.П., Курилович С.А., Давидик Г.С. Печень и липидный обмен. - Новосибирск. - 1985; Phillips G.В. // J. Clin. Invest. - 1960. - Vol.39. - P.1639-1650.

3. Кошиль О.И. Руководство по инфекционным болезням. - С.-Петербург. - 1996, - с.268.

4. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. - С.-Петербург. - 1996. - 306 с.

5. Руководство по медицине. Диагностика и терапия. / Под. Ред. Р.Беркоу и др. - М.: Мир, 1997, т.1, с.587-634. (прототип).

6. Дунаевский О.А. Вирусные гепатиты и дифференциальная диагностика заболеваний печени. Тверь. - 1993 - 263 с.

Изобретение относится к области медицины, а именно к инфекционным болезням, гепатологии, и предназначено для прогнозирования возникновения цирроза при хроническом вирусном гепатите. В биоптате печени определяют продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК); активность антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД). Рассчитывают коэффициент по формуле К=ДК/(СОД·КАТ)·100, где ДК - содержание диеновых конъюгатов, СОД - активность супероксиддисмутазы, КАТ - активность каталазы. При значениях коэффициента более 65 прогнозируют высокую вероятность возникновения цирроза печени, при 46-65 - умеренную, при 14-45 - низкую, а менее 14 - отсутствие вероятности возникновения цирроза печени. Способ позволяет повысить точность прогнозирования.

Способ прогнозирования возможности возникновения цирроза при хроническом вирусном гепатите, включающий проведение пункционной биопсии печени, отличающийся тем, что в биоптате печени определяют продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ): диеновые конъюгаты (ДК); активность антиоксидантных ферментов: каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД), рассчитывают коэффициент по формуле

К=ДК/(СОД·КАТ)·100,

где ДК - содержание диеновых конъюгатов;

СОД - активность супероксиддисмутазы;

КАТ - активность каталазы,

и при его значениях более 65 прогнозируют высокую вероятность возникновения цирроза печени, при 46-65 - умеренную, при 14-45 - низкую, а при значении менее 14 - отсутствие вероятности возникновения цирроза печени.