Изобретение относится к медицине, биотехнологии и пищевой промышленности и может быть использовано при получении лекарственных средств и биологически активных добавок, предназначенных для непосредственного потребления или в качестве добавки к продуктам питания с целью нормализации полезной микрофлоры желудочно-кишечного тракта и снижения риска развития дисбактериозов.
В последние десятилетия состояние здоровья населения по данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) и РАМН имеет тенденцию к ухудшению и характеризуется увеличением числа лиц, страдающих различньми заболеваниями. По данным института питания АМН в России наблюдается ухудшение состояния всех категорий населения, что связывают в первую очередь с уменьшением адаптивной мощности человека, проявляющейся в снижении иммунитета, изменении состава полезной микрофлоры в желудочно-кишечном тракте человека; возникновении ряда заболеваний под действием техногенных факторов, химической нагрузки, эмоциональных стрессов и других неблагоприятных факторов. Сложившаяся ситуация требует обязательного применения средств, способствующих восстановлению и поддержанию иммуннобиологического гомеостаза человека, к одним из которых относят средства, включающие в состав пробиотические культуры.
Бифидо- и лактобактерии относят к пробиотическим культурам, оказывающим благоприятное действие на организм, в частности они способствуют не только восстановлению аутофлоры, но и нормальному функционированию как отдельных органов, так и организма человека в целом. Следует отметить, что естественная флора тонкой кишки здорового человека главным образом представлена лактобациллами (в частности, ацидофильными бактериями), а толстой кишки - бифидобактериями.
Общеизвестно, что пробиотические культуры положительно влияют на здоровье человека (1, 2, 3). Для оказания такого действия на организм следует использовать штаммы микроорганизмов или их консорциумы, обладающие устойчивым комплексом полезных свойств и прошедшие проверку в условиях in vivo.
В настоящее время созданы отечественные препараты на основе одного вида бактерий с использованием одного штамма “Бифидумбактерин” - штамм В. bifidum, “Лактобактерин” - L. plantarum, колибактерин - штамм Е. Coli; одного вида бактерий и нескольких штаммов: “Бифилонг”, консорциум из 2 штаммов бифидобактерий; нескольких видов бактерий: “Бификол” - бифидобактерий и Е. coli, “Бифилакт” - бифидобактерии и лактобактерии (4, 5, 6). В связи с необходимостью оздоровления более широкого круга населения возникает потребность не только в лечебных препаратах, но и других профилактических средствах дисбактериозов, например пищевых добавках с представителями полезной микрофлоры желудочно-кишечного тракта здорового организма. В тоже время способ получения микробиологической основы должен предусматривать возможность ее использования как в лечебных целях, так и при изготовлении пищевых добавок, имеющих профилактическое действие.
Наиболее близким к изобретению по совокупности существенных признаков является способ получения сухого бактериального препарата “Бифацид” (7), предусматривающий приготовление питательной среды, термическую обработку ее, охлаждение до температуры инкубирования, раздельное культивирование конкретных штаммов ацидофильных бактерий и бифидобактерий, смешивание их в равных соотношениях, сублимационное высушивание. Недостатком является то, что осуществляется совместное высушивание клеток культур бифидо- и лактобактерий при одних и тех же режимах, что позволяет получать продукт в небольших емкостях (флаконах, бутылках), но не дает возможности изготовления других лекарственных форм (капсулы, суппозитории, пакеты и др.) из-за сложности дозирования количества жизнеспособных клеток бактерий в готовой лекарственной форме.
Проведение процесса сушки при усредненных режимах приводит к гибели и тех и других видов культур ввиду их различной термоустойчивости, в результате содержание активных живых клеток бифидо- и лактобактерий падает до 108 КОЕ в 1 г сухой биомассы, что снижает эффективность получения на ее основе лечебно-профилактических средств и биологически активных добавок.
Задачей настоящего изобретения является совершенствование способа получения сухой биомассы бифидо- и лактобактерий и создание на ее основе средства лечебно-профилактического назначения и биологически активной добавки для коррекции нарушений микрофлоры желудочно-кишечного тракта при явлениях дисбактериоза и инфекционных заболеваниях, которые обеспечат быстрое и эффективное восстановление нормальной микрофлоры тонкого и толстого отделов кишечника, устойчивое поддержание ее колонизационной резистентности у людей различных возрастных групп, а также разработка сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий с повышенным содержанием активных жизнеспособных клеток.
Сущность предлагаемого технического решения заключается в том, что в способе получения сухой биомассы предусматривается использование различных питательных сред и высушивание, обеспечивающих получение биомассы каждого вида сочетающихся между собой микроорганизмов, смешивание сухой биомассы консорциума с определенными ингредиентами, позволяющее получать лекарственные формы и биологически активные добавки с заданными стабильными показателями качества. При этом проводится раздельное культивирование для каждого вида пробиотической культуры (Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus и других) на более благоприятных средах, отвечающих современным требованиям для штаммов-пробиотиков, концентрирование клеток с последующим раздельным высушиванием в рациональных условиях.
Таким образом описывается
лечебно-профилактический биопрепарат для профилактики и лечения дисбактериозов и инфекционных болезней желудочно-кишечного тракта у детей и взрослых, содержащий сухую биомассу консорциума бактерий штаммов Bifidobakterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus АТ-41 с содержанием бифидобактерий В-1 108-1010 КОЕ и лактобактерий АТ-41 108-1010 КОЕ в 1 г сухой биомассы, полученную путем раздельного культивирования лиофилизированных культур штамма В-1 в синтетической питательной среде и штамма АТ-41 в органической питательной среде с дальнейшим раздельным культивированием полученных активизированных культур, концентрированием полученной жидкой биомассы каждого штамма и смешиванием с защитной средой, раздельным высушиванием методом сублимации, смешиванием полученных сухих биомасс и вспомогательных веществ, используемых при создании лекарственных форм для придания им технологических свойств при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Сухая биомасса консорциума
бифидобактерий и лактобацилл - 0,5-10,0
Вспомогательные вещества - до 100,0
Описывается также
биологически активная добавка для профилактики дисбактериозов и восстановления нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта после антибиотикотерапии и других неблагоприятных воздействий у людей различных возрастных групп, содержащая сухую биомассу консорциума бактерий штаммов Bifidobacterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus АТ-41 с содержанием бифидобактерий В-1 108-1010 КОЕ и лактобактерий АТ-41 108-1010 КОЕ в 1 г сухой биомассы, полученную путем раздельного культивирования лиофилизированных культур штамма В-1 в синтетической питательной среде и штамма АТ-41 в органической питательной среде с дальнейшим раздельным культивированием полученных активизированных культур, концентрированием полученной жидкой биомассы каждого штамма, смешиванием с защитной средой, раздельным высушиванием методом сублимации и смешиванием полученных сухих биомасс, а также вспомогательных веществ при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Сухая биомасса консорциума
бифидо- и лактобактерий - 0,5-10,0
Вспомогательных веществ - до 100,0
Описывается также
сухая биомасса консорциума штаммов бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis В-1 и лактобактерий Lactobacillus acidophilus АТ-41 для изготовления лечебно-профилактических препаратов, биологически активных добавок и лекарственных средств с содержанием бифидобактерий В-1 108-1010 КОЕ и лактобактерий АТ-41 108-1010 КОЕ в 1 г сухой биомассы, полученная путем раздельного культивирования лиофилизированных культур штамма В-1 в синтетической питательной среде и штамма АТ-41 в органической питательной среде с дальнейшим раздельным культивированием полученных активизированных культур, концентрированием полученной жидкой биомассы каждого штамма, смешиванием с защитной средой, раздельным высушиванием методом сублимации и смешиванием полученных сухих биомасс.
Описывается также
способ получения сухой биомассы консорциума штаммов бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis В-1 и лактобактерий Lactobacillus acidophilus АТ-41 по п.3, характеризующийся тем, что лиофилизированные культуры штаммов В-1 и АТ-41 подвергают раздельному культивированию, причем штамм В-1 культивируют в синтетической питательной, среде, штамм АТ-41 культивируют в органической питательной среде, полученные активизированные культуры подвергают дальнейшему раздельному культивированию, полученную жидкую биомассу каждого штамма концентрируют, смешивают с защитной средой и раздельно высушивают методом сублимации, после чего полученные сухие биомассы бифидо- и лактобактерий смешивают для получения сухого консорциума.
Новый биопрепарат для профилактики и лечения дисбактериозов и инфекционных болезней желудочно-кишечного тракта у детей и взрослых содержит сухую биомассу консорциума бифидобактерий штаммов Bifidobacterium adolescentis B-1 и Lactobacillus acidophilus АТ-4 и вспомогательные вещества - витамины, микрокристаллическую целлюлозу, пектин, гидрофосфат кальция, лактозу, вкусоароматическую добавку.
В качестве пектина он может содержать пектин яблочный при следующем соотношении компонентов, мас.%:
- сухая биомасса консорциума бифидобактерий
штаммов Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus AT-41 0,5-10,0;
- витамины 0,4-1,2;
- микрокристаллическая целлюлоза 5,0-15,0;
- пектин яблочный 5,0-15,0;
- гидрофосфат кальция (СаНРO4×2Н2О) 5,0-15,0;
- вкусоароматическая добавка 0,5-1,5
- лактоза до 100.
Новая биологически активная добавка к пище для снижения риска развития дисбактериозов и как дополнительный источник бифидо- и лактобактерий, способствующих восстановлению нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта после антибиотикотерапии и других неблагоприятных воздействий у людей различных возрастных групп, содержащая сухую биомассу консорциума бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis B-1 и Lactobacillus acidophilus AT-41, витаминны, микрокристаллическую целлюлозу, пектин, гидрофосфат кальция, лактозу, вкусоароматическую добавку.
В качестве пектина она может содержать пектин яблочный при следующем соотношении компонентов, маc.%:
- сухая биомасса консорциума штаммов
Bifidobacterium adolescentis B-1 и Lactobacillus
acidophilus AT-41 0,5-10,0;
- витамины 0,4-1,2;
- микрокристаллическая целлюлоза 5,0-15,0;
- пектин яблочный 5,0-15,0;
- гидрофосфат кальция (СаНРO4×2H2O) 5,0-15,0;
- вкусоароматическая добавка 0,5-1,5
- лактоза до 100.
В состав описываемой сухой биомассы консорциума входят следующие штаммы:
1. Штамм Bifidobacterium adolescentis B-1, получен из производственного штамма Bifidobacterium adolescentis MC-42 методом экспериментальной селекции путем многократного высушивания исходной культуры распылительным способом, после полного восстановления активности клеток, рассева и отбора наиболее активного штамма по производственно-ценным показателям, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов Государственного НИИ генетика за номером ЦМПП В 2944.
2. Штамм лактобактерий Lactobacillus acidophilus AT-41, выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов Государственного НИИ генетика за номером ВКПМ В 6545.
Особенностью данного консорциума, повышающей биологическую ценность биопрепарата и биологически активной добавки к пище является содержание в нем штаммов тех видов, которые наиболее физиологичны для тонкого и толстого отделов кишечника людей различных возрастных групп, а именно штаммов бифидобактерий и ацидофильных бактерий, обладающих природной устойчивостью к ряду антибиотиков, широко используемых в медицинской практике, и высокой антагонистической активностью по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам.
Сухую биомассу бифидо- и лактобактерий получают путем двукратного раздельного культивирования входящих в него штаммов на питательных средах с накоплением биомассы каждого штамма до lg 8-9, с последующим концентрированном, смешением с защитной средой, сублимационным высушиванием при рациональных режимах для каждого вида бактерий и смешением сухой биомассы обоих штаммов.
Получение сухой биомассы предлагаемым способом позволяет в дальнейшем четко нормировать содержание жизнеспособных клеток бактерий при получении лекарственного средства и биологически активной добавки, способных обеспечить высокий пробиотический эффект и нормализацию микробиоценозов желудочно-кишечного тракта у людей различных возрастных групп при клиническом использовании в составе биопрепарата и биологически активной добавки.
Изучение биологической ценности и непатогенности биопрепарата проводили на экспериментальных животных на базе кафедры гигиены питания Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова.
Всего было 4 группы животных: I - получали сухое обезжиренное молоко; II - получали биопрепарат, содержащий бифидобактерий; III - получали биопрепарат, содержащий лактобактерии (ацидофильные палочки); IV - получали биопрепарат, содержащий бифидо- и лактобактерии.
В течение эксперимента гибели животных не отмечалось, животные всех групп были активными и хорошо поедали корм. Животные, получавшие сухое обезжиренное молоко (контроль), прибавили в весе меньше, чем животные II, III и IV групп (табл.1). Из табл.1 видно, что коэффициент эффективности белка биопрепарата выше, чем в I, II и III группах животных.
Были проведены исследования усвоения азота животными. Исследования показали, что усвоение азота животными IV группы выше, чем у животных I-III групп.
Проведенные исследования позволили определить перевариваемость, биологическую ценность и утилизацию белка. Все эти три показателя были выше в IV группе и составили соответственно: (97,8±1,6)%, (85,1±1,5)% и (83,2±0,9)%. Полученные данные позволили заключить, что именно сочетание ацидофильных бактерий и бифидобактерий способствует лучшему перевариванию и усвоению белка организмом животных. Этот вывод подтверждается и показателем утилизации белка, который учитывает и перевариваемость, и биологическую ценность.
При изучении гематологических показателей крови у животных установлено, что эти показатели находились на одном уровне и в пределах физиологической нормы (табл.2).
Гематологические показатели крови животных
Отсутствие изменений в гематологических показателях крови и гибели животных также свидетельствует о непатогенности штаммов, входящих в биопрепарат.
Результаты клинических испытаний биопрепарата
Клинические испытания биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий проводились в два этапа: на первом этапе апробация проводилась под руководством Института питания РАМН, а на втором этапе - государственные клинические испытания под руководством ГИСК им. Тарасевича.
Биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий назначался на фоне общепринятой комплексной терапии ежедневно в течение 7-30 дней (в зависимости от возраста и степени заболевания), в растворенном виде по 5 доз за 20-30 мин до еды 2 раза в день - для детей и взрослых людей от 1 года до 35 лет и по 2,5 дозы 2 раза в день во время приема пищи - для детей грудного возраста. Эффективность лечения оценивали по следующим критериям: срокам уменьшения кратности и нормализации стула, восстановлению массы тела грудного ребенка, восстановлению полезной микрофлоры кишечника, общему состоянию больных.
На первом этапе клинические испытания проводились на базе 6-ой детской инфекционно-клинической больницы г. Москвы и санатория “Раннее детство”. Динамика кишечной микрофлоры была прослежена у 35 детей в возрасте от 1 месяца до 3х лет и у 32 человек в возрасте от 3 лет и старше. Клинические испытания, проведенные на первом этапе, показали, что у больных, получавших биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий уменьшение кратности стула и нормализация его происходили в более ранние сроки, чем при приеме "Бифидумбактерина". Результаты динамики кишечной микрофлоры свидетельствовали о том, что после курса лечения биопрепаратом на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий произошли положительные изменения микробиоценоза кишечника: нормализация бифидофлоры и лактобактерий, исчезновение или снижение количества бактерий рода протея, клебсиелл, грибов (кандида), стафилококка и других видов посторонней микрофлоры.
На втором этапе клинические испытания биопрепарата были проведены на 148 взрослых больных и 381 больном ребенке в 11 лечебных учреждениях России. В качестве контрольного препарата служил двухкомпонентный препарат “Бификол” (содержащий штамм бифидобактерий вида бифидум и кишечной палочки М-17). У новорожденных и детей первых месяцев жизни в качестве контроля использовали препараты: бифидумбактерин и лактобактерин. Все препараты были зашифрованы и разосланы в лечебные учреждения, где проводились клинические испытания в соответствии с Государственной программой испытаний, утвержденной в установленном порядке.
Результаты клинических испытаний рассматривались отдельно в группах: 1 - больных новорожденных детей; 2 - больных детей с острыми кишечными инфекциями; 3 - детей с хронической патологией пищеварительного тракта; 4 - взрослых больных, преимущественно страдавших хронической гастроэнтерологической патологией.
Клинические испытания биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий на первой группе больных показали, что у 90% новорожденных после отмены препарата отмечен переход к нормобиоценозу или компенсированной форме дисбиоза 1-ой степени (от исходной 3 и 4-ой степени дисбиоза). Наиболее выраженные положительные сдвиги наблюдались в анаэробном компоненте с нормализацией титров бифидобактерий в 87% и лактобактерий - 77,4%, а также полной элиминацией клостридий. У большинства больных детей, принимавших “Бифацид” к 6-7 суткам происходило улучшение аэробного компонента: у 77,4% - полностью элиминирована гемолитическая микрофлора, снизился уровень энтеробактерий, грибов, кокковых микроорганизмов. Тогда как в контрольной группе новорожденных детей, получавших коммерческий бифидумбактерин, сроки клинического и микробиологического положительного эффекта проявлялись только к 3-4 недели, а при необходимости одновременного лечения с антибиотиками, полностью не наступали до их отмены. Повышение титра бифидобактерий происходило лишь на 1-2 порядка, т.е. преимущественно не достигая нормального количества, а повышение содержания лактобацилл у большинства больных первой группы вообще не отмечалось.
У второй группы бипрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий применяли для 98 больных детей (первого года жизни - 49 человек, от 1 года до трех - 20 и старше трех лет - 29), имевших кишечные расстройства инфекционной этиологии и наблюдавшихся одновременно с группой сравнения из 59 больных, получавших “Бификол”, а также 30 больных, которых лечили общепринятой антибактериальной терапией. По степени тяжести кишечного процесса преобладали среднетяжелые (59 больных) и тяжелые формы (15 больных). Бактериологическими и серологическими методами у больных установлены: шигеллез, сальмонеллез, ротавирусная инфекция, эшерихиоз, а также заболевания, вызванные условно-патогенными микроорганизмами. Большинство больных детей имели сочетание с острым респираторным заболеванием и отягощающие факторы. По заключению специалистов лечебных учреждений лечение препаратом на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий было самым эффективным, составив в первом учреждении в среднем 94,1%, во втором - 92% к окончанию курса. В третьем учреждении при сравнении больных, принимавших биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий, и контрольной группы, получавшей антибиотики, различия в продолжительности диарейного синдрома были очень значительными, составив в первом случае в среднем - 4,9, а в контроле - 9,5 дней. Результаты сравнения эффективности лечения больных приведены в табл.3.
У третьей группы больных биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий был апробирован на 79 больных, а в контрольных группах “Бификол” получали 44 больных, Бифидумбактерин - 18, Лактобактерин - 20 и не получали биопрепаратов - 20. Возраст больных колебался от 1 года до 14 лет. Больные были с хронической гастроэнтерологической патологией, проявляющейся в виде болей в животе, снижении аппетита, рвоты, изжоги, метеоризма, неустойчивости стула, недомогании, быстрой утомляемости, отставании масса-ростовых показателей и др., и у некоторых больных одновременно наблюдались аллергические заболевания (бронхиальная астма, атопический дерматит, эксудативный диатез, медикаментозная и пищевая аллергия). При эндоскопическом обследовании детей старших возрастных групп выявлены воспалительные изменения слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и в 78% установлен реактивный панкреатит. Результаты сравнения клинической и микробиологической эффективности лечения больных приведены в табл.4.
Апробация биопрепарата у четвертой группы проведена на 148 взрослых больных, страдавших хронической патологией желудочно-кишечного тракта с давностью процесса от 3 до 10 лет и более. Кроме того, у 46 больных преобладали кожные заболевания в виде атопического дерматита или обострения истинной экземы. Биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий получали 90 больных, а в контрольной группе 58 больных получали Бификол. Возраст больных колебался от 18 до 68 лет. Наблюдения за больными проведены в трех лечебных учреждениях.
Патология пищеварительного тракта диагностировалась как воспалительные заболевания толстой кишки, хронический панкреатит, язвенная болезнь. Диагнозы были верифицированы с помощью клинико-лабораторного обследования, эндоскопического, рентгенологического и ультразвукового методов. У всех больных наблюдались: метеоризм, боли в животе, чередование неустойчивого стула с запорами, снижение аппетита. Все больные неоднократно лечились до проведения клинических испытаний и во время проведения апробации получали общепринятую диету и медикаментозную терапию.
В результате использования биопрепаратов происходило улучшение клинических показателей. Через две недели исчезали тошнота, метеоризм, уменьшались боли в животе, нормализовались испражнения, улучшалось общее состояние. Клинические показатели приведены в табл.5.
У большинства больных, получавших биопрепараты, нормализация испражнений происходила к 10 дню лечения. Положительный эффект получили при приеме препаратов в отношении нормализации показателей микрофлоры кишечника (табл.6 и 7).
В представленной таблице показаны различия между больными, получавшими и не получавшими биопрепараты, при хронической патологии пищеварительного тракта.
Частота нарушений бифидо- и лактофлоры в зависимости от вида лечения больных четвертой группы
Данные таблицы 7 свидетельствуют о преимуществе назначения биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий, обусловленном большим восстановлением уровня бифидо- и лактофлоры.
За время всех видов клинических испытаний биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий отмечена его удовлетворительная переносимость, побочных явлений не наблюдалось. Во всех группах больных наблюдалось улучшение общего состояния, аппетита, происходила нормализация температуры тела и нормализация стула, а также проявлялась клиническая и микробиологическая эффективность данного препарата. На основании полученных результатов биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий может быть использован при лечении детей и взрослых, больных острыми кишечными инфекциями и страдающих хронической патологией пищеварительного тракта, для коррекции биоценоза кишечника. При хорошей эффективности биопрепарат оказался безвредным. Особая эффективность применения биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий проявилась у новорожденных и детей раннего возраста, у больных острыми кишечными инфекциями. При хронической патологии пищеварительного тракта по эффективности биопрепарат на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий не уступал Бификолу, однако превосходил его по положительному влиянию на биоценоз кишечника, нормализуя содержание бифидо- и лактобактерий.
Отчет о результатах проведенных Государственных клинических испытаний биопрепрата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий был заслушан на заседании Комитета медицинских иммунобиологических препаратов ГИСК им. Тарасовича, на котором принято постановление: считать целесообразным внедрение биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий в практику здравоохранения.
Пример 1. Получение сухой биомассы бифидо- и лактобактерий на основе использования штаммов Bifidobacterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus AT-41.
1-й пассаж.
Лиофилизированные культуры штаммов Bifidobacterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus AT-41 в количестве 0,1 г сухой биомассы вносят каждый отдельно в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведении до 10-7 и 10-8. Выращивают 24-72 часа при температуре (37±1)° С.
2-й пассаж.
Выросшую культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в среду накопления и раздельно культивируют 16-18 часов при температуре (37±1)° С.
Получение биомассы.
Посевную культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в отдельные ферментеры со средой выращивания и культивируют при (37±1)° С. Содержание каждого вида пробиотических микроорганизмов в полученной биомассе составляет lg 8-9 в 1 см3.
Затем полученную жидкую биомассу каждого штамма концентрируют, смешивают с защитной средой и высушивают сублимационно. Полученную сухую биомассу, включающую в своем составе бифидобактерии и лактобактерии, используют для приготовления биопрепарата и биологически активной добавки к пище. Содержание бифидобактерий и ацидофильных бактерий в 1 г сухой биомассы составляет lg 9-10.
Пример 2. Получение биопрепарата на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий.
Сухую биомассу консорциума бифидобактерий и ацидофильных бактерий из примера 1 в количестве по 0,5 кг каждой; 10,0 кг микрокристаллической целлюлозы; 0,8 кг витаминного комплекса; 67,2 кг лактозы, 10,0 кг яблочного пектина и 10,0 кг гидрофосфата кальция, 1,0 кг вкусоароматической добавки (апельсин) загружают в смеситель и тщательно перемешивают в течение 20-30 мин до получения однородного порошка, который расфасовывают в герметически запаянные флаконы, ампулы или стики.
Пример 3. Получение биологически активной добавки к пище на основе сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий.
Сухую биомассу консорциума бифидобактерий и ацидофильных бактерий из примера 1 в количестве 0,5 и 1,0 кг; 10,0 кг микрокристаллической целлюлозы; 0,8 кг витаминного комплекса; 66,7 кг лактозы; 10,0 кг яблочного пектина; 10,0 кг гидрофосфата кальция; 1,0 кг вкусоароматической добавки (апельсин) загружают в смеситель и тщательно перемешивают в течение 20-30 мин до получения однородного порошка, который расфасовывают в герметически запаянные флаконы, ампулы или стики.
Литература
1. Патент 5589168 США, А 23 С 009/12, C 12 R 001/46 Probiotic/Allen; William D.; Linggood; Margaret А. - Заявл. 02.09.1994; опубл. 31.12.1996.
2. Доронин А.Ф., Шендеров Б.А. Функциональное питание. - М.: ГРАНТЪ, 2002, - 296 с.
3. Ганина В.И. Пробиотики. Назначение, свойства и основы биотехнолоогии. - М.: МГУПБ, 2001, – 169 с.
4. Гончарова Г.И. Бифидофлора человека и необходимость ее оптимизации // Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве: Сб. научн. тр. МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского. - М., 1986, с.10-17.
5. Горская Е.М., Лизько Н.Н., Ленцнер А.А., Бондаренко В.М., Соколова К.Я., Лихачева А.Ю. Биологическая характеристика штаммов лактобацилл, перспективных в качестве эубиотиков // Журн. микробиол. - 1992. - №3, - с.17-20.
6. Патент России №2196174, 10.01.2003.
7. Патент №2083666 РФ, С 12 N 1/20, А 23 С 9/12. Способ получения сухого бактериального препарата “Бифацид” / Ганина В.И., Семенихина В.Ф., Иноземцева В.Ф. и др. - Заявл. 27.07.1995; опубл. 10.07.1997. Бюл. №19 (прототип).
Изобретение относится к области медицины, биотехнологии и пищевой промышленности и касается лечебно-профилактического биопрепарата для профилактики и лечения дисбактериозов и инфекционных заболеваний желудочно-кишечного тракта, содержащего сухую биомассу консорциума бифидобактерий штамма Bifidobacterium adolescentis В-1 и лактобацилл штамма Lactobacillus acidophilus AT-41, полученную путем раздельного культивирования лиофилизированных культур указанных штаммов с дальнейшим раздельным культивированием полученных активизированных культур, концентрированием полученной жидкой биомассы каждого штамма и смешиванием с защитной средой, раздельным высушиванием и смешиванием полученных сухих биомасс, а также вспомогательных веществ; изобретение касается также биологически активной добавки, включающей указанную сухую биомассу консорциума бифидо- и лактобактерий, сухой биомассы консорциума бифидо- и лактобактерий, а также способа получения указанной сухой биомассы. Изобретение позволяет получать препараты с повышенным содержанием активных жизнеспособных клеток. 4 н.п. ф-лы, 7 табл.
Сухая биомасса консорциума
бифидобактерий и лактобацилл 0,5-10,0
Вспомогательные вещества Остальное
Сухая биомасса консорциума
бифидобактерий и лактобактерий 0,5-10,0
Вспомогательные вещества До 100,0
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУХОГО БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА "БИФАЦИД" | 1995 |
|
RU2083666C1 |
| Штамм @ @ @ -1,используемый для приготовления закваски | 1983 |
|
SU1169989A1 |
| ЕР 0555618 А2, 18.06.1993 | |||
| ГАНИНА В.И | |||
| и др | |||
| Изучение антагонистической активности и идентификации бифидобактерий и молочнокислых палочек, рекомендуемых для получения продуктов лечебно-профилактического назначения и пробиотиков | |||
| Биотехнология, М | |||
| Металлический водоудерживающий щит висячей системы | 1922 |
|
SU1999A1 |
| Прибор для нагревания перетягиваемых бандажей подвижного состава | 1917 |
|
SU15A1 |
| ШЕВЕЛЕВА С.А | |||
| Пробиотики, | |||
