СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2005 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к ветеринарной вирусологии и иммунологии, и может быть использовано при диагностике инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота животных.

Известен способ диагностики крупного рогатого скота, включающий отбор крови животного, подготовку образца крови для фотометрического анализа. В качестве образца используют гемолизат крови, а коэффициент поглощения регистрируют при длине волны 422 нм. При величине его более 2 животное считают здоровым, в противном случае диагностируют лейкоз (см. патент РФ №2144189, по кл. G 01 N 33/53, 2000).

Данный способ отличается трудоемкостью и наличием дорогостоящего оборудования.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому решению является способ выявления больных лейкозом крупного рогатого скота, при котором выявляют положительно реагирующих в РИД животных. Дополнительно проводят подготовку пробы сыворотки крови методом разведения. и при получении положительного результата в РИД при разведении ее в титре 1:8 и выше животное признается больным лейкозом крупного рогатого скота (см. патент РФ №2200955, кл. G 01 N 33/53, 2003).

Недостатком данного способа является невозможность выявления животных-вирусоносителей, титр ВЛКРС - специфических антител которых не достаточен для их идентификации в РИД. Такие животные продолжают оставаться в оздоравливаемом стаде и служат потенциально опасным источником инфекции.

Известна инактивированная вакцина против лейкоза крупного рогатого скота, изготовленная в лаборатории лейкозов ВИЗВ им. Я.Р.Коваленко. Получение вакцины включает культивирование вируссодержащих лейкоцитов периферической крови крупного рогатого скота, больного лейкозом в гематологической стадии, инактивацию и получение антигена (см. патент РФ №2202367, по кл. МКИ А 61 К 39/12, 2003).

Задачей заявляемого изобретения является выявление животных-вирусоносителей на более ранней стадии заболевания, а именно в инкубационном периоде.

Поставленная задача решается предлагаемым способом диагностики лейкоза крупного рогатого скота, включающим серологическое исследование сыворотки крови в реакции иммунной диффузии. Дополнительно проводят серологическое исследование крови серонегативных животных после провокации их иммунного ответа путем трехкратного введения инактивированной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в дозе 2 мл с интервалом в 14 дней. Животные, имеющие положительный в РИД результат после провокации, признаются инфицированными вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

Новым в предложенном способе является то, что повторное исследование в РИД серонегативных животных проводят после провокации их иммунного ответа путем трехкратного введения инактивированной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в дозе 2 мл с интервалом в 14 дней, при получении положительного ответа в РИД животное признают инфицированным вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

Предлагаемый способ выявления ВЛКРС-инфицированных, но серонегативных до этого животных основан на принципе вторичного иммунного ответа, при котором выделение ВЛКРС-специфичного препарата вызывает ускорение антителообразования. Это делает возможным выявления животных-вирусоносителей в РИД.

Пример осуществления способа.

Сначала в оздоравливаемом стаде проводится серологическое исследование в РИД поголовье крупного рогатого скота старше 5 месяцев. Серопозитивных животных элиминируют (убой, откорм, отделение до отела и т.д.).

Далее серонегативные животные подвергаются трехкратному введению вышеуказанной инактивированной тканевой вакцины против лейкоза крупного рогатого скота. Введение осуществляется подкожным методом в область средней трети шеи в дозе 2 мл с интервалом между введениями в 14 дней.

Через 7 дней после третьего введения вакцины всех животных, подвергнутых вакцинации, исследуют в РИД. Вновь выделенных животных, имеющих положительный результат в РИД после провокации иммунитета, признают серопозитивными, т.е. ВЛКРС-инфицированными.

Данный способ ранней диагностики скрытых вирусоносителей был опробован на поголовье более 400 голов в 4 неблагополучных по лейкозу хозяйствах Вологодской области (коровы, нетели и телки старше 5 месяцев).

Как показали результаты серологических исследований, данный способ серологической диагностики, включающий провокацию иммунного ответа, позволяет в среднем выявить дополнительно 3,57% вирусоносителей среди серонегативных коров и нетелей и 6,12% среди серонегативных телок старше пятимесячного возраста.

Предложенный способ ускоряет выявление и изъятие из оздоравливаемого стада животных-вирусоносителей, сокращает период оздоровления от лейкоза и материальные затраты на проведение разделительных оргзоотехнических мероприятий, доступен практическим ветеринарным врачам, врачам-серологам районных и областных лабораторий.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота включает выявление положительно реагирующих в РИД животных и проведение дополнительного серологического исследования в РИД, причем повторное серологическое исследование серонегативных животных проводят после провокации иммунного ответа путем трехкратного введения инактивированной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в дозе 2 мл с интервалом в 14 дней и при получении положительного результата в РИД животное диагностируют как инфицированное. Способ ускоряет выявление животных-вирусоносителей, сокращает период оздоровления хозяйств от лейкоза, позволяет снизить материальные затраты на оздоровление.

Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота, включающий выявление положительно реагирующих в РИД животных и проведение дополнительного серологического исследования в РИД, отличающийся тем, что повторное серологическое исследование серонегативных животных проводят после провокации иммунного ответа путем трехкратного введения инактивированной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в дозе 2 мл с интервалом в 14 дней и при получении положительного результата в РИД животное диагностируют как инфицированное.