СПОСОБ ЗАГОТОВКИ ЭРИТРОЦИТОВ Российский патент 2006 года по МПК A61K35/18 A61M1/38 

Изобретение относится к медицине, в частности к трансфузиологии, и может быть использовано для получения эритроцитсодержащих компонентов.

Известен способ получения эритроцитов методом фракционирования доз консервированной донорской крови (Инструкция по фракционированию консервированной крови на клеточные компоненты и плазму. МЗ СССР, 11.06.1987 г.). При таком способе на первом этапе от донора одномоментно заготавливают 450 мл ±10% цельной крови. В дальнейшем консервированную донорскую кровь подвергают центрифугированию с получением из каждой дозы заготовленной крови по одной дозе плазмы (200-300 мл) и эритроцитной массы (200-250 мл).

Недостатком такого способа являются: нерациональность использования донорского контингента на фоне его значительного сокращения, большие объемы списания эритроцитных сред по истечению сроков годности, недостаточная обеспеченность лечебного процесса эритроцитсодержащими компонентами с редким фенотипом и др.

Известны способы селективного получения компонентов крови (плазмы, тромбоцитов, лейкоцитов и др.) непосредственно от доноров, получившие общее название методов плазмоцитафереза (Руководство по трансфузионной медицине // Под ред. Сведенцова Е.П. - Киров, 1999. - 716 с., ил.). Их основной отличительной особенностью является то, что от каждого донора проводится заготовка не цельной крови, а только определенного ее компонента. Остающиеся после переработки донорской крови компоненты возвращаются (реинфузируются) в венозное русло донора. Последнее обстоятельство позволяет при каждой донации получать компоненты крови в увеличенных (и даже лечебных) дозах. Это достигается либо использованием специальных аппаратов-сепараторов клеток крови, либо методом фракционирования донорской крови с помощью центрифуг и полимерных гемоконтейнеров.

По виду получаемого компонента методы плазмоцитафереза подразделяются на плазмаферез (заготовка плазмы) и цитаферез - тромбоцитаферез (заготовка концентратов тромбоцитов), лейкоцитаферез (заготовка концентратов лейкоцитов) и т.п. В зависимости от технических средств, с помощью которых производится заготовка компонентов крови, выделяют аппаратные и неаппаратные (прерывистые, дискретные или ручные) способы афереза.

В настоящее время с помощью сепараторов клеток крови можно заготовить все компоненты крови. Дискретные способы получения разработаны для таких компонентов, как плазма, тромбоциты.

Заготовку двух доз эритроцитов непосредственно от доноров осуществляют с помощью аппаратного эритроцитафереза (Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components. Recommendation №R (95) 15/ 8th edition, Council of Europe Publishing. - Strasbourg, 2002). Таким способом, используя современные сепараторы клеток крови (Haemonetics MCS Plus, Amicus, Cobe Spectra и др.), за одну операцию получают две дозы (400-420 мл) эритроцитов. Продолжительность процедуры составляет в среднем 30-35 мин с учетом реинфузии плазмы и лейкоцитарно-тромбоцитарного слоя (ЛТС). В зависимости от способа и используемого аппарата получают "две дозы эритроцитов" или "две дозы эритроцитов, обедненных лейкоцитами" в ресуспендирующем растворе.

Недостатком указанного способа является очень высокая стоимость как оборудования (сепараторы клеток крови), так и расходных материалов (одноразовые системы магистралей к сепараторам), что резко ограничивает его широкое внедрение в производственную практику учреждений службы крови страны.

Цель изобретения: снижение себестоимости заготовки эритроцитсодержащих компонентов (далее просто эритроцитов) и широкое внедрение этого способа в производственную практику учреждений службы крови.

Цель достигается тем, что заготовка эритроцитов осуществляется способом двойного дискретного цитафереза.

Способ реализуется следующим образом. Получение эритроцитов осуществляют с помощью рефрижераторных центрифуг (ЦЛП 3-3,5 и др.), а также полимерных контейнеров для заготовки крови и ее компонентов (Гемакон" 500/300, Гемакон" 500/300/300, контейнеров с ресуспендирующим раствором - Teruflex 450 CPD/S.A.G.M, Terumo, Япония и т.п.).

Способ заключается в следующем: у донора производят эксфузию стандартной дозы крови (450 мл ±10%) в контейнер с консервантом. Степень наполнения контейнера определяют с помощью специальных автоматических весов для взятия крови. При отсутствии специального оборудования для этих целей могут быть использованы весы электронные бытовые. После первичной паспортизации консервированную донорскую кровь подвергают центрифугированию в одном из общепринятых режимов для разделения крови на плазму и эритроциты с учетом технических возможностей имеющейся центрифуги. Для получения должного гематокрита и сохранения полноценности клеток концентрата эритроцитов фактор разделения должен быть не менее 2000 g. При этом произведение фактора разделения (g) на время центрифугирования в минутах (плато) должно быть не менее 28000 и не более 40000. Температура центрифугирования устанавливается в пределах +22-24°С.

Во избежание повторных пункций иглу из вены не извлекают, к ней подсоединяют заранее подготовленную инфузионную систему с 0,9% раствором натрия хлорида. Капельное введение раствора проводят до начала реинфузии аутокомпонентов. После центрифугирования с помощью плазмоэкстрактора плазму и ЛТС переводят в пустой сателлитный (спаренный) мешок. Контейнер с эритроцитами в объеме 180-220 мл герметизируют и паспортизируют. Плазму с ЛТС через систему для переливания крови реинфузируют донору. Переливанием аутокомпонентов завершается 1-й цикл операции. В процессе проведения первого цикла с целью предупреждения дополнительного снижения исходного гематокрита скорость введения устанавливают с таким расчетом, чтобы за первый цикл объем переливания не превышал 20-30 мл физиологического раствора. По завершению переливания аутоплазмы с ЛТС проводят второй (аналогичный) цикл. Общий объем вводимого за донацию 0,9% раствора натрия хлорида составляет 400-500 мл. С целью профилактики возникновения цитратной интоксикации реинфузию аутокомпонентов проводят со скоростью не более 30-40 мл/мин.

Таким образом, от одного донора за 87,5±5,4 мин можно заготовить две дозы концентрата эритроцитов (КЭ) с гематокритом 0,95-0,98 и общим объемом 360-420 мл. Из КЭ путем добавления в контейнер с эритроцитами аутоплазмы или ресуспендирующего раствора можно получить соответственно две дозы "эритроцитной массы с удаленным ЛТС" или две дозы "эритроцитной взвеси с удаленным ЛТС". Приготовление указанных эритроцитсодержащих компонентов проводят на основании соответствующих инструкций. При необходимости КЭ после окончательной паспортизации подвергают криоконсервированию при ультранизких температурах в жидком азоте (-196°С) для длительного хранения.

Качество получаемых этим способом эритроцитов по всем параметрам соответствует международным стандартам (Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components. Recommendation №R (95) 15/ 8th edition, Council of Europe Publishing. - Strasbourg, 2002).

Комплектование доноров проводят в соответствии с требованиями приказа МЗ РФ №364 от 14.09.2002 г. "Об утверждении порядка медицинского обследования доноров крови и ее компонентов". Дополнительными критериями допуска к двойному эритроцитаферезу являются: уровень общего гемоглобина в крови доноров - не менее 150 г/л, гематокрит - не менее 0,42 л/л, масса тела - 65 кг и более. Допустимый объем двух доз концентрата эритроцитов, получаемых от одного донора, составляет не менее 360 и не более 420 мл. При массе тела донора 65-75 кг максимальный объем эритроцитов не должен превышать 400 мл, при массе тела свыше 75 кг - 420 мл.

Повторные донации двух доз эритроцитов могут проводиться с интервалом в 6 месяцев. При необходимости (повышенная потребность в эритроцитах, в частности у доноров с редким фенотипом крови, в экстренных случаях и т.п.) интервалы между донациями можно сокращать до 4-5 месяцев. В таких случаях рекомендуется проведение предварительного лабораторного контроля уровня запасов железа по содержанию сывороточного ферритина. При выявлении признаков дефицита этого металла необходимо назначение заместительной терапии препаратами железа. Через один месяц после эксфузии двух доз эритроцитов доноры могут быть допущены к плазмаферезу и тромбоцитаферезу на общих основаниях. Лейкоцитаферез может быть проведен не ранее чем через 2 месяца после двойного эритроцитафереза.

Проведенное клиническое исследование по изучению влияния заготовки двух доз эритроцитов с помощью двойного дискретного эритроцитафереза свидетельствует о безопасности указанного способа и отсутствии неблагоприятного его влияния на состояние здоровья и работоспособность доноров при соблюдении вышеуказанных требований.

Предлагаемый способ заготовки эритроцитов является экономически более выгодным, чем аппаратный эритроцитаферез (ЭА). Для сравнения можно привести следующие данные: стоимость современных сепараторов клеток крови для проведения донорского цитафереза колеблется в пределах 60000-130000 долларов США, стоимость расходных одноразовых систем-магистралей к сепараторам на одну операцию аппаратного цитафереза составляет от 130 до 300 долларов США (в зависимости от типа сепаратора). К этому следует добавить, что отечественная промышленность в настоящее время не производит подобной аппаратуры. Стоимость основного оборудования (рефрижераторные центрифуги) для проведения операций дискретного плазмоцитафереза значительно дешевле и составляет в среднем от 5000 до 25000 $ (в зависимости от фирмы-производителя и технической оснащенности). Тем более, что практически все учреждения службы крови укомплектованы необходимыми центрифугами. Стоимость расходной полимерной аппаратуры для проведения одной операции двойного дискретного цитафереза колеблется в пределах 10-20 $. Следует отметить также, что все оборудование и расходные материалы, необходимые для заготовки эритроцитов предлагаемым способом, выпускаются отечественными производителями.

Более длительная продолжительность дискретного ЭА в сравнении с аппаратным способом компенсируется возможностью одновременного проведения заготовки эритроцитов у нескольких доноров (у 4-6 и более доноров в зависимости от технических возможностей центрифуг).

Разрабатываемый способ является принципиально новым для службы крови в Российской Федерации. Его внедрение в практику работы позволит увеличить в 2 раза объем гемоэксфузии от одного донора, что повысит обеспеченность военных лечебных учреждений эритроцитсодержащими компонентами, особенно редких групп крови; будет способствовать повышению безопасности и эффективности гемотрансфузионной терапии. Организация донорства эритроцитов с использованием предлагаемого способа прерывистого эритроцитафереза позволит эффективно и рационально использовать донорские кадры, сократить количество нереализуемых эритроцитсодержащих компонентов, списываемых и уничтожаемых по истечении срока годности.

Изобретение относится к медицине, в частности к трансфузиологии, и может быть использовано для получения эритроцитсодержащих компонентов. Способ заготовки эритроцитов заключается в заборе крови, разделении ее на фракции центрифугированием, с последующим хранением эритроцитарной массы, при этом кровь забирают у одного донора в количестве 450 мл ± 10% в контейнер с консервантом, центрифугируют при 2000 g и более, при этом произведение фактора разделения (g) на время центрифугирования в минутах выдерживают от 28000 до 40000 при температуре 22-24°С; осуществляют реинфузию плазмы и лейкотромбоцитарного слоя и повторно проводят отмеченную операцию, осуществляя капельное внутривенное введение 0,9% раствора натрия хлорида в интервалах между эксфузией крови и реинфузией аутокомпонентов и после нее. Способ обеспечивает снижение себестоимости заготовки эритроцитсодержащих компонентов и широкое внедрение способа в производственную практику учреждений службы крови.

Способ заготовки эритроцитов путем забора крови, разделения ее на фракции центрифугированием с последующим хранением эритроцитарной массы, отличающийся тем, что кровь забирают у одного донора в количестве 450 мл ± 10% в контейнер с консервантом, центрифугируют при 2000 g и более, при этом произведение фактора разделения (g) на время центрифугирования в минутах выдерживают от 28000 до 40000 при температуре 22-24°С, осуществляют реинфузию плазмы и лейкотромбоцитарного слоя и повторно проводят отмеченную операцию, осуществляя капельное внутривенное введение 0,9% раствора натрия хлорида в интервалах между эксфузиией крови и реинфузией аутокомпонентов и после нее.