СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ НЕМАТОДОЗОВ ПОРОСЯТ Российский патент 2006 года по МПК A61K35/66 A61K36/06 A61K35/74 A61P33/00 A61P33/10 

Изобретение относится к микробиологии и фармакотерапии и может быть использовано для терапии и лечебно-профилактических мероприятий при глистных заболеваниях (нематодозах поросят).

Для лечения и химиопрофилактики кишечных нематодозов сельскохозяйственных животных в последнее время существует множество специфических препаратов, обладающих различным терапевтическим эффектом и продолжительностью применения (панакур, тетрамизол, ивертин, аверсект, мебендазол и мн. др.).

Однако применение антгельминтиков зачастую приводит к нарушению нормального, эволюционно сложившегося гомеостаза желудочно-кишечного тракта животных, что, в свою очередь, способствует развитию дисбактериозов (Акимкин В.Г., Заболотнова Г.И., Антонова Г.К. и др. ЖМИ, 1997. - №2. - С.85-86; Акбаев М.Ж. Материалы научной сессии РАСХН. Т.2 1999, стр.56-59; Алексеева С.М., Иванова О.М., Цыдынов В.Ц. Улан-Удэ, 2003. - С.20-23). Последние связаны со многими симптомокомплексами, проявления которых многообразны, начиная с расстройства желудочно-кишечного тракта, нарушений обмена веществ, а в некоторых случаях развития хронических системных заболеваний (Алексеева С.М., Иванова О.М., Цыдынов В.Ц. Материалы международной конференции. - Улан-Удэ, 2003. - С.116-117; Алексеева С.М., Иванова О.М., Цыдынов В.Ц. Материалы международной научно-практической конференции. - Ульяновск, 2003. - С.204-205; Аманов И.О., Гариб Ф.Ю. и др. Антибиотики и химиотерапия. - 1989. - Т.34. №6. - С.453-456).

Задачей изобретения является повышение терапевтического эффекта. Задача решается путем одновременного использования антгельминтика аверсекта-2 и пробиотика коредона в дозе 50 мг/кг живой массы в течение 5 дней.

Аверсект-2 - 1% инъекционный раствор аверсектина С, вырабатываемого Streptomyces avermitilis BKM AC 1301 на водоспиртовой основе для подкожного введения. В дозе 3 мг/кг по ДВ примененный подкожно однократно свиньям проявляет 100% эффективность против нематод и вшей, а при двукратном введении с интервалом 8 дней - против клещей.

Коредон представляет собой пробиотик, средство профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний с синдромом диареи, а также профилактики иммунодефицитных состояний животных. Состоит из иммобилизованной, высушенной споровой биомассы бактерий Bacillus subtilis штаммов ВГНКИ-01.12.02-деп, ВГНКИ-01.12.01-деп, Bacillus licheniformis штамм ВГНКИ-01.12.03-деп и вспомогательных веществ.

Обладает высокой антагонистической активностью к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и антивирусной активностью, эффективный антиаллерген, нормализует микрофлору кишечника и устраняет дисбактериоз. Способствует стимуляции клеточных и гуморальных факторов иммунитета, стимулирует регенерационные процессы в организме, нормализует обмен веществ

Коредон относится к малоопасным веществам (IV класс опасности по ГОСТ 12.1.008-76).

Пример 1. Испытания in vitro.

В опыте использовали культуру Е. coli, выделенную от поросят с клиническими признаками дисбактериоза (угнетение, понижение аппетита, расстройство желудочно-кишечного тракта). Чувствительность Е. coli к химиотерапевтическим средствам изучали дискодиффузионным методом на мясопептонном агаре (МПА). Для этого из односуточной культуры микроорганизмов готовили взвесь (1,0×10⁹ м. т./мл) в физиологическом растворе по ОСМ ГИСК им. Л.А.Тарасевича. Взвесь в дозе 0,5 мл равномерно распределяли по поверхности питательной среды.

Для определения антибактериального действия антигельминтиков бумажные диски пропитывали 0,5 и 1% растворами ивертина, панакура и тетрамизола.

Инкубирование проводили в аэробных условиях в течение 24 часов при 37°С. Измерение диаметра зон задержки роста проводили с точностью до одного миллиметра с помощью линейки. Полученные данные сравнивали с табличными значениями и определяли категорию чувствительности микроорганизмов: чувствительные, умеренно чувствительные и нечувствительные.

Полученные результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1
Чувствительность Е.coli к антгельминтикамАнтгельминтикиКонцентрацияЗона задержки роста, ммИвертин0,5%9,01,0%17,0Панакур0,5%22,01,0%24,0Тетрамизол0,5%16,01,0%21,0

Из таблицы 1 видно, что культура Е. coli обладает различной степенью чувствительности к антгельминтикам, которая повышается с увеличением концентрации растворов. Наибольшую чувствительность установили к 1% раствору панакура (зона задержки роста - 24,0 мм), наименьшую - к 0,5% раствору ивертина (зона задержки роста - 9,0 мм).

Таким образом, можно сказать, что приведенные антгельминтные препараты обладают антибактериальной активностью и способны привести к дисбактериозу организма, ослабленного глистной инвазией.

Пример 2. Производственные испытания.

Для проведения опыта были сформированы четыре группы поросят крупной белой породы, в возрасте двух месяцев, живой массой 20-25 кг. Первую группу (контроль) составили здоровые агельминтные животные в количестве пяти голов. Вторая группа (экспериментальная, пять голов) - поросята, по результатам копрогельминтологических исследований были инвазиированы аскаридами и трихоцефалами. Третья группа (экспериментальная, пять голов) - поросята, у которых копрогельминтологическими исследованиями выявились аскариды и трихоцефалы и была проведена дегельминтизация аверсектом-2 (согласно наставлению). Четвертая группа (экспериментальная, пять голов) - поросята, которым проводили лечебную дегельминтизацию аверсектом-2 (согласно наставлению) и параллельно задавали внутрь пробиотик коредон в дозе 50 мг/кг 1раз в сутки.

Результаты лечения приведены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2
Гематологические и биохимические показатели сыворотки крови поросят экспериментальных группПоказатели1 группа (контроль)2 группа (инвазир.)3 группа (прототип)4 группа (предлагаемый)3 сутки5 сутки15 сутки3 сутки5 сутки15 суткиГемоглобин, г %9,5±0,386,89±0,126,63±0,166,35±0,116,80±0,16,8±0,28,1±0,39,3±0,4Эритроциты, млн/мкл6,80±0,365,82±0,145,64±0,125,72±0,105,81±0,126,0±0,16,2±0,26,86±0,3Лейкоциты, тыс/мкл12,73±0,8220,5±1,2821,2±0,9222,9±1,0224,2±1,519,8±1,215,4±0,412,84±0,2Лейкограмма, %: базофилы0,1±0,120,5±1,280,5±0,050,5±0,050,6±0,040,5±0,010,6±0,030,5±0,3эозинофилы1,0±0,111,97±0,062,5±0,033,5±0,055,8±0,091,3±0,012,8±0,071±0,01Нейтрофилы: юные0,5±0,081,5±0,061,4±0,021,35±0,011,5±0,031,5±0,071,4±0,020,5±0,01палочкоядерные3,5±0,352,5±0,122,6±0,112,6±0,112,5±0,102,1±0,122,0±0,102,0±0,12сегментоядерные44,3±1,2029,7±1,428,2±1,327,5±1,628,5±1,829,7±1,329,8±1,330,1±1,9лимфоциты44,6±1,1247,2±1,1846,4±1,1945,8±2,047,3±1,845,7±0,1244,7±0,1142,1±0,01моноциты2,9±0,114,8±1,054,7±1,044,6±1,94,8±0,094,6±0,114,2±0,114,2±0,01Тромбоциты, тыс/мкл210±15,0215±6,4217±6,5216±4,5215±4,2215±5,2217±6,1210±6,3Общий белок, г/л70,32±1,168,05±1,2067,15±1,5066,1±1,959,3±1,265,6±1,970,1±1,773,1±1,9альбумин, %36,71±0,528,41±2,3425,62±2,95524,3±2,820,1±1,332,8±0,634,8±0,6835,6±0,7α -глобулин, %26,4±0,2626,12±1,5426,18±1,3424,3±1,529,2±0,326,1±1,530,0±0,530,0±0,6β -глобулин, %15,12±0,5614,12±0,7914,18±0,8215,3±2,3219,2±1,214,01±0,816,2±0,3816,7±0,38щел.фосфатаза, ед/л4,62±0,085,53±0,745,63±0.658,71±0,8312,3±1,23,84±0,065,82±0,056,10±0,05

По данным таблицы видно, что у поросят второй экспериментальной группы происходит снижение концентрации гемоглобина на 23,8%, уменьшение количества эритроцитов на 14,28%, сегментоядерных нейтрофилов на 32,8%, снижение общего белка на 3,2%. В то же время отмечается увеличение количества лейкоцитов на 61,7%, эозинофилов на 97,2%, лимфоцитов на 7,1%, щелочной фосфотазы на 19,9%.

У поросят третьей экспериментальной группы на третьи сутки по сравнению с животными второй группы происходило увеличение количества лейкоцитов на 4,4%, глобулинов на 8,2%, активной щелочной фосфотазы на 2,8%. В то же время происходило снижение показателя общего белка на 2,4%, альбуминов на 9,9%. На пятые сутки происходило дальнейшее увеличение количества лейкоцитов, эозинофилов, глобулинов, активной щелочной фосфотазы, снижение показателя общего белка, альбумина. Через 15 суток после применения антгельминтика происходило уменьшение показателя общего белка, альбуминов при увеличении количества лейкоцитов, эозинофилов, а и b-глобулинов и активности щелочной фосфотазы.

У поросят четвертой экспериментальной группы на третьи сутки происходило увеличение количества эритроцитов на 65%, сегментоядерных нейтрофилов на 5%, альбуминов на 12%, в то же время отмечалось уменьшение количества лейкоцитов на 7,7%, эозинофилов на 48%, общего белка на 4,3%, активной щелочной фосфотазы на 32%. Через 5 суток происходило увеличение концентрации гемоглобина на 49,1%, количества эритроцитов на 23,7%, сегментоядерных нейтрофилов на 7,4%, общего белка на 19%, альбуминов на 44,6%. Отмечено уменьшение лейкоцитов, эозинофилов, моноцитов, тромбоцитов, активной щелочной фосфотазы. На 15 сутки увеличивается концентрация гемоглобина, эритроцитов, сегментоядерных нейтрофилов, общего белка, альбуминов, а-глобулинов и отмечается уменьшение лейкоцитов, эозинофилов, юных и палочкоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, активности щелочной фосфотазы.

Таблица 3
Бактериологические показатели кишечника поросят экспериментальных группПоказатели1 группа (контроль)2 группа (инвазир.)3 группа (прототип)4 группа (предлагаемый)3 сутки5 сутки15 сутки3 сутки5 сутки15 суткиэнтеробактерии, м.т./г.0,003×10⁶0,01×10⁶-0,000016×10⁶-0,00003×10⁶ 0,000009×10⁶гемолизирующие кокковые и энтеропатогенные, м.т./г.0,035×10⁶0,075×10⁶0,0064×10⁶0,0001×10⁶0,00009×10⁶0,00009×10⁶--клостридии, м.т./г.0,002×10⁶0,008×10⁶0,044 ×10⁶-0,05×10⁶0,12×10⁶--бифидобактерии, м.т./г.267×10⁶72×10⁶59×10⁶72×10⁶13×10⁶152×10⁶271×10⁶390×10⁶дрожжеподобные грибы, м.т./г.0,13×10⁶-0,39×10⁶0,016×10⁶0,024×10⁶0,37×10⁶0,28×10⁶0,22×10⁶стафилококки, м.т./г.--0,0045×10⁶-0,00009×10⁶---сальмонеллы, м.т./г.--0,0003×10⁶0,002×10⁶0,001×10⁶0,003×10⁶--соотношение полезной микрофлоры к условно-патогенной267:172:152:172:113:1152:1271:1390:1

Таким образом, по данным таблицы 3 видно, что применяемый в ветеринарной практике для дегельминтизации препарат аверсект-2 в терапевтических дозах оказывает негативное влияние на энтеробиоценоз свиней, выражающееся в подавлении полезной микрофлоры (бифидобактерий), в то же время способствует усилению роста условно-патогенных и патогенных микроорганизмов (стафилококков, гемолитических энтерококков, сальмонелл, клостридий). В то же время после сочетанного применения указанного антгельминтика и пробиотика коредона происходит быстрое улучшение количественного и качественного состава энтеробиоценоза. Экспериментальные данные позволяют сделать вывод, что предлагаемый способ дегельминтизации улучшает количественный и качественный энтеробиоценоз, гематологические и биохимические показатели крови животных, этим самым повышая терапевтический эффект в 1,5-2 раза.

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает введение аверсекта-2 и дополнительно пробиотика коредона в дозе 50 мг/кг живой массы в течение пяти дней. Способ улучшает количественный и качественный энтеробиоценоз, гематологические и биохимические показатели крови. Оказывает высокий терапевтический эффект. 3 табл.

Способ лечения и профилактики нематодозов поросят, включающий введение антигельминтика аверсект-2, отличающийся тем, что поросятам дополнительно вводят пробиотик коредон в дозе 50 мг/кг живой массы в течение 5 дней.